il-17对小鼠结肠癌肿瘤组织中细胞因子表达及cd4+t细胞亚群分布的影响

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：孺导师签章：懈级学院领导盖章：加心年J，月1日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他

2、人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签轹蠕导师签章：翮僻r月7日万方数据目录中文摘要·1英文摘要5研究论文IL—17在小鼠结肠癌发生发展中的作用前言月U舌．1’l0U材料与方法··1l结果··23附图··26附表··36讨论．．39结论．．．42参考文献··43综述IL．17对肿瘤微环境的影响．．45致谢．．52个人简历．．53万方数据中文摘要IL．17在小鼠结肠癌发生发展中的作用摘要目的：结肠癌是临床上常见的消化道肿瘤之，’，好发于50～60岁人群，占所有癌症的第三位。【l，2】随着经济的高速发展，

3、人们的生活水平不断提高，由此带来的饮食结构改变，如少纤维多脂肪，使得该病的发病率在全球范围内呈现逐年升高趋势。13]目前对于结肠癌的治疗仍以手术作为首选方式，术后或术前结合化学治疗等辅助方法取得，。定效果，但是其5年生存率低耐药性强等诸多因素，【4J促使我们亟待寻求更为有效的治疗手段。上个世纪80年代，肿瘤的生物治疗问世，至今已经成为第四种肿瘤治疗方法，而其中的免疫治疗为最常用的方法之一一。【5】免疫疗法就是通过增强人体免疫力，调整机体抗瘤能力，达到抑制肿瘤的发生、发展及转移。细胞因子是一类具有多种生物学效应的小分子蛋白，其家族成员很多在肿瘤的发生、发展

4、中起到重要作用，【6】因此细胞因子治疗已成为肿瘤免疫治疗的常用手段之一。IL．17作为Thl7细胞的特征性细胞因子，其在肿瘤t}l的作川引起厂我们的兴趣，前期研究结果显示接种C26／pcDNA3．1．IL一17细胞的小鼠移植瘤体积明显小于接种C26细胞和C26／pcDNA3．1细胞的小鼠移植瘤大小，这说明IL．17可以抑制肿瘤的生长，但是IL．17并不影响各组小鼠的生存期。因此，本研究将对IL．17在结肠癌发生发展中的作用进行深入研究，并探讨其抗瘤机制。方法：1荷瘤小鼠脾细胞亚群分布检测荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天，取各组小鼠脾脏，利用密度梯度离心法分离

5、脾淋巴细胞，分别提取各组脾淋巴细胞的RNA，Real．TimePCR法检测与各Th细胞相关的特征性细胞因子和转录因子的表达。2IL．17对肿瘤组织中淋巴细胞浸润情况检测荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天，取各组小鼠肿瘤组织，甲醛固定后制备蜡块，切片后HE染色法观察接种C26／pcDNA3．1．IL．17细胞的小鼠肿瘤组织与接种C26／pcDNA3．1细胞和接种C26细胞的小鼠肿瘤组织中淋巴细胞浸润数量的区别。万方数据中文摘要3IL．17对肿瘤组织中血管密度影响情况检测荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天，取各组小鼠肿瘤组织，甲醛固定后制备蜡块，切片后免疫组化法标记血管

6、，对比三组荷瘤小鼠肿瘤组织中血管数量。4荷瘤小鼠肿瘤组织中相关细胞因子检测荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天，Real．TimePCR法和Westernblot法检测肿瘤组织中相关细胞因子的表达情况。5荷瘤小鼠肿瘤组织中Thl，Th2，Thl7，Treg细胞特征性转录因子的表达情况检测荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天，分别取各组小鼠肿瘤组织，Real．TimePCR法分别检测Thl、Th2、Thl7、Treg细胞的特征性转录因子。6IL．17对肿瘤细胞凋亡情况研究荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天，取各组小鼠肿瘤组织，甲醛固定制备蜡块，切片后TUNEL法检测各肿瘤组织中

7、凋亡细胞数量。结果：1IL．17影响荷瘤小鼠脾细胞亚群分布研究Real．TimePCR法检测结果显示，与接种C26、C26／pcDNA3．1的荷瘤小鼠相比，IL．17可以使接种C26／pcDNA3．1．IL．17细胞的荷瘤小鼠脾淋巴细胞中ROR．矿细胞、IFN．丫+细胞、Th2+细胞和IL．10+细胞细胞增多(尸O．05)。2IL．17对肿瘤组织中

8、淋巴细胞浸润情况研究HE染色结果显示IL．17可以使小鼠肿瘤组织中淋巴细胞浸润数