hif审审1α和vegf在大鼠liri模型中的表达及沐舒坦的肺保护作

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1、天津医科大学硕士学位论文HIF-1α和VEGF在大鼠LIRI模型中的表达及沐舒坦的肺保护作用姓名：赵晨光申请学位级别：硕士专业：临床医学；外科学胸心外指导教师：宋世辉201105天沣医科大学硕士学位论文中文摘要目的：通过采用肺缺血再灌注损伤(1ungischemic．reperfusioninjury,LIRI)的动物模型，观察缺氧诱导因子一la(HIF．1a)和血管内皮生长因子(VEGF)在肺缺血再灌注损伤中的意义，进一步揭示缺血再灌注损伤的发生机制，通过沐舒坦药物干预分析沐舒坦在肺缺血再灌注损伤中的作用。方法：阻断肺门60分钟，再灌注6小时建立大鼠肺缺血再灌注损伤动物模型。将

2、50只Wistar雌性大鼠，随机分为五组，空白对照组(Control组)：不对动物作任何处理，无呼吸机辅助，直接麻醉后剖胸取肺组织标本，此组作为各组术前空白对照；缺血再灌注损伤组(m组)：气管切开，呼吸机辅助，左侧开胸，游离左肺门，阻断60min后开放阻断钳，关胸，自开放肺门阻断钳开始，6小时后处死动物，取肺标本；缺血再灌注．手术对照组(IR．Sham组)：气管切开，呼吸机辅助，左侧开胸，游离左肺门，不阻断，关胸，自关胸开始，6小时后处死动物，取肺标本；纯缺血组(I组)：气管切开，呼吸机辅助，左侧开胸，游离左肺门，阻断60min后，不开放阻断钳，直接取肺标本；单纯缺血．手术对照组

3、(I-Sham组)：气管切开，呼吸机辅助，左侧开胸，游离左肺门，不阻断，取肺标本。各组设计纳入lO只大鼠，如有试验期间死亡，则继续补足至lO只。实验结束时，摘取肺组织，测肺组织湿／干重比值(W／D)，制成匀浆测肺组织IL．1B、TNF．a，采用组织病理学、免疫组织化学染色技术与图像分析技术，观察肺组织病理学改变，VEGF及HIF．1a的表达。之后再取雌性Wistar大鼠40只评价沐舒坦在肺缺血再灌注损伤中的保护作用。分组如下：(1)空白对照组(Control组)：不对动物作任何处理，无呼吸机辅助，直接麻醉后剖胸取肺组织标本，此组作为各组术前空白对照(2)缺血再灌注．手术对照组(I

4、R-Sham组)：气管切开，呼吸机辅助，左侧开胸，游离左肺门，不阻断，关胸，自关胸开始，经股静脉以微量注射泵持续静脉输入生理盐水(5ml／kg／h)，6小时后处死动物，取肺标本(3)缺血再灌注损伤组(IR组)：气管切开，呼吸机辅助，左侧开胸，游离左肺门，阻断60min后开放阻断钳，关胸，自开放肺门阻断钳开始，经股静脉以微量注射泵持续静脉输入生理盐水(5ml／kg／h)，6小时后处死动物，取肺标本(4)沐舒坦干预组(Ambroxol组)：气管切开，呼吸机辅助i左侧开胸，游离左肺门，阻断60rnin后开放阻断钳，关胸，自开放肺门阻●天津医科大学硕士学位论文断钳开始，经股静脉以微量注射

5、泵持续静脉输入沐舒坦溶液(Sml／kg／h)，6小时后处死动物，取肺标本。各组设计纳入10只大鼠，如有试验期间死亡，则继续补足至10只。实验结束时，摘取肺组织，测肺组织湿／干重比值(W／D)，制成匀浆测肺组织IL．113、TNF．Q，MPO。采用组织病理学、免疫组织化学染色技术与图像分析技术，观察肺组织病理学改变，VEGF及HIF．1et的表达。结果：各组肺组织湿／干比重：Control组、IR．Sham、I组、I-Sham组与IR组组间数据差异具有统计学差异(P

6、(P<0．05)．但I组与IR组差异无统计学意义。病理切片观察到取组肺组织充血水肿及炎细胞浸润较其他4组更加明显。各组肺组织HIF．1a蛋白的表达水平组问总体数据差异有统计学意义(PO．05)。缺血再灌注损伤组大鼠肺组织HIF．1a、VEGF基因表达的相关分析：经Pear

7、son相关性检验，缺血再灌注组大鼠肺组织HIF．1a、VEGF表达水平明显相关，提示LIRI期问2种因子表达之间存在相互影响或相互调控的可能性。沐舒坦干预组测得的大剂量沐舒坦干预后，IL．113、TNF．Q的含量以及MPO活性明显低于无药物干预的缺血再灌注损伤组。同时肺组织的W／D显著减低，Pa02明显升高。结合光镜下病理发现沐舒坦干预后，肺泡问隔水肿，肺内出血等较再灌注损伤组明显减轻。结论：HIF．1Q、VEGF均参与了LIRI；沐舒坦对于肺缺血再灌注损伤有保护作用。关键词：缺