e2f3 ar hif审审1α在pc3中的表达及相互关系

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1、优秀毕业论文天津医科大学硕士学位论文E2F3、AR、HIF-1α在PC3中的表达及相互关系姓名：闫凯申请学位级别：硕士专业：临床医学；外科学泌尿外指导教师：吴长利201105精品参考文献资料优秀毕业论文天津医科大学硕士论文中文摘要前列腺癌患者占全部男性癌症患者的11％，占全部男性癌症死亡人数的9％。我国前列腺癌患病率低于西方国家，但是近年来有逐步上升的趋势。引起前列腺癌的危险因素尚未明确，但是遗传因素是已经被确认的最重要的因素之一。前列腺癌患者早期可无任何症状，目前诊断主要靠直肠指检，PSA检查，经直肠B超，前列腺穿刺活检以及影像学的检查，其各项检查都有一定的缺陷，可能在早期诊断方面有一定的

2、困难，错失治疗的最佳时期，预后不佳，对患者造成痛苦。E2F3基因是最近研究比较热门的基因，其表达与前列腺癌的恶性程度有关，在前列腺癌的发生发展中起促进作用。E2F3通过与pRb及相关蛋白等多种细胞周期依赖性蛋白及激酶的相互作用来参与细胞周期的调控，对细胞周期和DNA的复制有重要的调节作用。E2F3是细胞周期调控过程中起核心作用的转录因子，控制着细胞增殖过程中众多基因的表达，是细胞合成间期中由G1进入S期所必需的转录因子。E2F3与视网膜母细胞瘤蛋白(Retinoblastomaprotein，pRB)关系密切，pRB的主要功能就是通过对E2F3的调节而起生长抑制作用。E2F3的高表达往往提示

3、预后不良。检测E2F3：-白勺表达有助于前列腺癌的诊治以及恶性程度和预后的判断。E2F3可望成为诊断前列腺癌和评估预后的指标。lm灿是生物进化过程中普遍存在的保守的现象，它是由小的、双链的RNA所激发，通过对靶基因的mRNA的降解所导致的基因转录后沉默。RNAi是一种非常保守的基因沉默机制。在原始生物中RNAi能够保护基因组免受病毒或者其它基因片段的插入，并且在生物的发育过程中调节众多基因的表达。腺相关病毒(adeno．associatedVil21S，AAV)载体是近年来研究最为广泛、最受关注的基因治疗载体。其具有宿主范围广、免疫原性低、安全性高、稳定性好等特点，AAv载体被认为是未来基因

4、治疗中最有希望的新一代病毒载体。目的：探讨AAV转染PC3细胞的效率，通过检测E2F3、AR、HⅢ．1Q在PC3中的表达，分析三者在前列腺癌致病中关系，旨在探讨E2F3、AR在前列腺癌发生发展中的作用，同时比较细胞增殖指标E2F3、AR和HIF．1a在前列腺癌中表达的关系。方法：对PC3细胞进行体外培养，探索细胞生长的最佳条件。用AAV病毒转染培养的PC3细胞，在荧光显微镜下拍摄转染效果图片。并进行转染率的计算，探索最佳转染浓度及时间。MTT法探索AAV转染后PC3细胞生长活性，绘制转染后细胞生长曲线。通过ELISA方法研究E2F3、AR和H球．1Q在PC3精品参考文献资料优秀毕业论文天津医

5、科大学硕士论文’细胞中表达的相互关系。结果：AAV可高效转染PC3。AAV与PC3作用60分钟后，1×PBS冲洗2次，浆细胞培养液37℃过夜，24hr后用荧光显微镜可观察到绿色荧光的表达，AAV转染PC3最佳浓度为1×105v．g／cell。24h，48h和72h的荧光表达有增强的趋势(P

6、试验提供参考。’．关键词：前列腺癌舢w病毒RNA干扰E2F3ARHIF．1QPC3ELISAII精品参考文献资料优秀毕业论文天津医科大学硕士论文一-————二_——————————————————————————————————————————一AbstractProstatecancerpatientsaccountedfor11％ofallcancerpatients．andofthecanc盯deaths9％．InChina,prostatecanc．宅rratesarelowerthaninthewesterncountrjes．butinrecentyearshasgraduall

7、yrisingtrend．ThecauseofprostateCRll∞I"h弱nmbeendear．Butthegeneticfactorisalreadyconfirmedoneofthemostimportantfactors．Prostatecanc掼patientscannothaveanysymptoms，thediagnosisdependmainly0nadigitalrect／llexami