c636dnv对白纹伊蚊的致病性及其与登革病毒ⅱ型相互作用的分析

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1、优秀毕业论文06／36DNV对白纹伊蚊的致病性及其与登革病毒II型相互作用研究博士生：魏伟导师：张景强教授专业：生物物理学摘要[摘要]白纹伊蚊C6／36培养细胞浓核病毒(英文简称C6／36DNV)是本实验室在2002年发现的一株新的能感染白纹伊蚊的浓核病毒。该病毒属细小病毒科浓核病毒亚科短浓核病毒属，为二十面体单链DNA(4094nt)病毒。在核苷酸和氨基酸序列上，它与埃及伊蚊浓核病毒(爿a曲Nv)有很高的同源性；但在基因结构和某些重复序列上，它更接近于白纹伊蚊浓核病毒(Aa皿NV)。C6／36DNV能在C6／36细胞中

2、长期潜伏和传代培养，其外表与正常细胞相比未发现有差异。本实验研究了该病毒对白纹伊蚊的致病性及其与登革病毒II型之间的相互作用。(1)，用潜伏C6／36DNv的C6／36细胞(病毒DNA量为2．867×109COpy／m1)感染白纹伊蚊孵化后一日的幼虫24小时，在二十一天内幼虫平均死亡率达到97．46％。对孵化后六日的幼虫，则需要更长的感染时间(72小时)或更高的病毒浓度(病毒DNA量为6．1381X10“copy／m1)，平均死亡率达到40．75％，幸存下来的蚊子实验证明携带此病毒。(2)，用荧光定量PCR方法研究了受c

3、6／36DNV感染的白纹伊蚊体内病毒基因组量的动态变化，发现病毒基因组的量在感染后很快达到最高峰，之后逐渐下降；至幼虫发育为成蚊后，病毒基因组的量达到最低水平。这表明C6／36DNV不仅能致白纹伊蚊幼虫死亡，而且能潜伏在幸存的成蚊体内。对其后代幼虫和成蚊进行MR测定，结果均为阳性，表明C6／36DNV在白纹伊蚊中能垂直传播。(3)，用DEN-II感染潜伏了C6／36DNV的白纹伊蚊，发现C6／36DNV病毒量在感染DEN—II后会急剧增加达数百倍至数干倍之多，这表明DEN—II能够刺激潜伏在白纹伊蚊体内的C6／36DNV

4、大量增殖。精品参考文献资料优秀毕业论文(4)，用DEN-11分别感染潜伏C6／36DNV的白纹伊蚊和没有病毒潜伏的白纹伊蚊，分别提取蚊虫总RNA，随后将登革病毒RNA和白纹伊蚊看家基因核糖体蛋白rpL8RNA反转录为cDNA。用rpL8cDNh作为内标基因对登革病毒的量进行均一化校对，发现在潜伏了C6／36DNV的白纹伊蚊中，登革病毒基因组的量相对较低，而无病毒潜伏的白纹伊蚊中的登革病毒基因组量为前者的数百倍。这表明潜伏在自纹伊蚊体内的c6／36DNv能够抑制DEN—II的繁殖。(5)对感染C6／36DNV的白纹伊蚊进行

5、病理学研究，在感染后第四天，电镜观察发现在脂肪体细胞的核内有大量病毒晶格状排列。随着时间的延长，在细胞质中也发现有病毒晶格体存在，同时伴有核膜扩张，核内异染色质增多的现象。之后，病毒开始感染到其它幼虫组织，如真皮细胞，肌肉细胞等，并且被感染的组织严重病变，核膜破裂，溶解；线粒体中空，肿胀，嵴溶解；内质网扩张，溶解：细胞开始死亡。这一研究有望给白纹伊蚊的生物防治及控制登革病毒U型的传播带来新的思路。关键词：白纹伊蚊；致病性；C6／36DNV；登革病毒Ⅱ型Ⅱ精品参考文献资料优秀毕业论文Thepathogenioityofmo

6、squitodensoviruses(C6／36DNV)anditsnteractionwithDenguevirustypeⅡinAedesa／bopictusName：WeiWeiSupervisor：JingqiangZhangSpeciality：BiophysicsAbstractAedesalbopictusC6／36celldensovirus(C6／36DNV)，amosquitodensoviruses，isisolatedfromachronicallyinfectedAe．albopictusC6／

7、36cell．ThevirusbelongstothegenusBrevidensovirusofthesubfamilyDensovirinaeinthefamilyParvoviridae．Itissingle—strandedlinearDNAvirus．Eachdensovirusvirionpackageseitheraplusoraminussingle—stranded1inearDNAchain．Thevirionsappearasicosahedralnon—envelopedparticleswith

8、adiameterof18—26珊．ThesequenceanalysisandcompareshowedthatthenucleotideandcodedaminoacidsequenceofC6／36DNVarehighlyhomologoustotheAa印NVgenome，butgenomicorganiza