xiap xaf1在胃癌bgc823细胞株的表达以及去甲基化对bgc823细胞生物学行为的影响

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1、论文缩略词索引英文缩写英文全称中文名字5-Aza-CdR5-Aza-2'-deoxyctidine5．脱氧杂氮胞苷DEPCDiethylpyrocarbonate焦炭酸二乙酯DNMTDNAmethyltransferase甲基转移酶DMSODimethylSulfoxide二甲基亚戳FC醚Flowcytomery流式细胞仪M订3．(4，5-dimethylthiazol2y1)2，53．(4，5。二甲基噻唑一2)一2，5-．diphenyltetrazoliumbromide二苯基四氮唑溴盐PIPropidiumiodide碘化丙锭Kr-PCRRevers

2、etranscriptionpolymerase逆转录．聚合酶链反应chainreactionInhibitoryofapoptosisproteinfactor凋亡抑制蛋白西子家族familyIFNInterferon干扰素劂忽TNF．relatedapoptosis-inducing肿瘤坏死因子相关凋亡诱ligand导配体XIAPXchromosomelinkedinhibitorofX连锁凋亡抑制蛋白apoptosisprotein脚lXl艘associatedfactor1X连锁蹋亡抑铡爱自相关阏子lCARDCaspaserecruitmentdo

3、mainCaspas募集结构域5原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：牛匿关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家有关部门

4、或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本入授权兰州大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为兰州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。谳～：哗导师签名：纪氩期：一XIAP、XAFI在胃癌BGC823细胞株中的表达以及去甲基化对BGC823细胞生物学行为的影响中文摘要圈的：胃癌的发生是一个多因素、多阶段、有序的过程。细胞的过度增殖和细胞凋亡异常是其发生的生物学基础。研究中发现～类具有明显抑制细胞凋亡作用

5、的蛋白因子，被称为凋亡抑制蛋白因子家族(IAP)，IAP家族成员在结构上具有1至3个高度保守的杆状病毒凋亡抑制因子重复序列(BIR)结构域n3，在肿瘤的增殖异常及对抗肿瘤药物耐受形成中发挥了重要佟用，X染色体相关凋亡抑制蛋自(XIAP)是IAP家族中抑$1]caspase活性最强的成员。XIAP相关因子l(X矗F1)是一个薪近发现可以拮抗XIAP抗凋亡作用的蛋自，它可以逆转XIAP对细胞的保护。艘用在多种肿瘤细胞和组织中存在低表达或表达缺失，删用的基因沉默与其启动子高甲基化明显相判羽。本研究采用5一脱氧杂氮胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌细胞株进行处理。检

6、测删用和XIA,嗟因表达，并分析肿瘤细胞生物学行为变化，以期进一步探讨胃癌的发生机制并寻找胃癌治疗的新方法。方法：将胃癌细胞BGC823分为不加任何处理的对照组和经不同浓度5-Aza-CdR处理的实验组。相差显微镜观察各组细胞形态学的改变；应用MTT比色法检测不同浓度6-Aza-CdR对细胞增获活性及I岛值的影响；PI染色和流式细胞仪(K鹾)检测不同浓度5-Aza-CdR处理72h后缨胞瘸期分布和细胞凋亡率；逆转录一聚合酶链反应(腿一PcR)法检测用药前后XAFl和删尸基因表达的变化。免疫组织化细胞学法检测XAFI与XIAP蛋白的表达与定位。结果：兰州大学

7、研究生学位论文用l×10喝，5x10峭，10×10qmol／L的5-Aza—CdR处理BGC823细胞6天后，试验组细胞增殖抑制率较对照组明显升高(尺0．05)，并星剂量依赖关系；流式细胞仪分析表明，各药物浓度处理72h后凋亡率明显增加：试验组凋亡率分别为4．53±O．2i％、8．1l±1．01％、王1．56±0．86％，与对照组(O．5l±0．01％)相比差异显著(必0．05)。在5-Aza-CdR处理翦，未检测到8Ge823细胞株觑群基蠢mRNA表达，经过5-Aza-CdR处理后，删剐mRNA重叛表达，XIAP在未处理的BGC823细胞株中呈现高表达；

8、免疫细胞化学显示，XIAP蛋白主要位于胞浆，XAFI蛋白主要定位于