重组人超氧化物岐化酶基因工程菌稳定性研究

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1、为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。重组人超氧化物岐化酶基因工程菌稳定性研究　　摘要：目的：研究重组人超氧化物岐化酶毕赤酵母基因工程菌的遗传稳定性。方法：基因工程菌连续传代50次，每10代取样保藏菌种，通过对菌株形态、菌落形态、质粒稳定性、目的基因的PCR鉴定，蛋白表达的SDS-PAGE鉴定来评价工程菌的稳定性。结果：在连续传代50代的过程中，菌株、落形态与原始工程菌相比无明显差异，质

2、粒保有率高，PCR鉴定结果显示，重组载体携带目的基因传至50代未消失，SDS-PAGE结果表明，传至50代蛋白表达量无明显差异。结论：该工程菌有良好的遗传稳定性。　　关键词：重组人超氧化物岐化酶；毕赤酵母工程菌；遗传稳定性　　中图分类号：Q78文献标志码：A文章编号：2095--0011-02　　Abstract：Objective：tostudythegeneticstabilityofrecombinanthumansuperoxidedismutasePichiapastoris.Methods：thegenetica

3、llyengineeredbacteriaweresubculturedfor50times，andthepreservationstrainsweresampledevery10generations.Themorphologyofthestrain，colonymorphology，plasmidstabilityandtargetgenewere为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余

4、文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。identifiedbyPCR.SDS-PAGEanalysisofproteinexpressionwasusedtoevaluatethestabilityofengineeringbacteria.Results：therewasnosignificantdifferenceinthestrainandcolonymorphology

5、betweentheoriginalengineeringstrainandtheoriginalengineeringstraininthecourseofsuccessivesubculturefor50generations.Theplasmidretentionratewashigherthanthatoftheoriginalengineeringstrain.TheresultsofPCRidentificationshowedthattheplasmidretentionratewashigh.Theresul

6、tofSDS-PAGEshowedthattherewasnosignificantdifferenceintheexpressionofproteinfromtherecombinantvectortothe50thgeneration.Conclusion：theengineeringstrainhasgoodgeneticstability.　　Keywords：recombinanthumansuperoxidedismutase；engineeredPichiapastoris；geneticstability为了

7、充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。　　超氧化物歧化酶是生物�w防御氧化损伤的一种十分重要的生物酶，具有清除体内氧自由基的能力，能较好地抵御氧自由基和其他氧化物自由基对细胞质膜的毒性[1]，在机体保护方面起

8、重要作用，在医药与化妆品方面有很好的应用前景。巴斯德毕赤酵母具有许多其他蛋白表达系统所不具备的优点，在表达产物的加工、外分秘、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势，现已广泛用于外源蛋白的表达[2-3]。由于巴斯德毕赤酵母自身分泌的蛋白非常少，且培养基中不含其他蛋白，分泌的外源蛋白占了