akt2调节肾癌细胞专移及其临床意义的分析

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1、优秀毕业论文天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的：探讨AKT2在肾癌组织中的表达情况及其临床意义，体外实验中，应用小RNA干扰技术降低AKT2的表达对肾癌细胞迁移和侵袭能力的影响，明确AKT2在肾癌细胞转移中的作用。方法：1．用免疫组化的试验方法检测AKT2在肾癌组织中的表达情况，统计分析AKT2表达与各临床病理参数之间的相关性，统计AKT2的临床意义。2利用小RNA干扰技术，应用合成的小RNA干扰质粒转染肾癌细胞ACHN，建立AKT2稳定降表达细胞系，用Westernblotting技术检测转染效率。3

2、用趋化运动实验和划痕实验检测AKT2降表达对肾癌细胞运动能力的影响。4体外侵袭实验检测AKT2降表达对肾癌细胞侵袭能力的影响。5用黏附实验检测AKT2降表达对肾癌细胞黏附能力的影响。采用磷酸化特异性抗体检测AKT2降表达对EGF刺激后integrin[31磷酸化水平的影响。6采用磷酸化特异性抗体检测AKT2降表达对EGF刺激后肌动蛋白结合蛋白eofilin磷酸化水平的影响。7用WesternBlotting方法检测AKT2降表达对PKC(活化程度的影响，进一步明确AKT2在肾癌细胞趋化运动中作用的分子机制

3、。结果：1．削I汀2在不同类型肾癌组织表达阳性率不同，透明细胞癌阳性率40．6％(54／133)，乳头状肾细胞癌的阳性率34。6％(28／81)，嫌色细胞癌阳性率63．3％(31／49)，差异有显著性(氏0．05)。2．透明细胞癌、乳头状肾细胞癌AKT2高表达与肿瘤分级、分期、转移均相关(尸

4、扰技术转染肾癌细胞ACHN后，建立AKT2稳定降表达细胞系，WesternBlotting检测AKT2蛋白水平表达明显下降。4．触汀2降表达的ACHN细胞的趋化运动能力比对照组细胞明显减弱精品参考文献资料优秀毕业论文天津医科大学硕士学位论文(P<0．05)。5．AKT2降表达的ACHN细胞的侵袭能力比对照组细胞明显减弱愀0．05)。6．AKT2降表达的ACHN细胞黏附能力比对照组细胞明显减弱(伙O．05)，EGF刺激后integrin81磷酸化水平降低。7．AKT2降表达能够降低ACHN细胞cofilin

5、的磷酸化水平。8．EGF刺激后降表达AKT2的表达减弱了PKC(的活化程度。结论：1．AKT2在不同类型肾癌组织中表达不同；2．透明细胞癌、乳头状肾细胞癌的AKT2高表达与肿瘤分级、分期、转移、预后均具有相关性，而嫌色细胞癌AKT2高表达只与肿瘤分期有关，与其它各临床病理参数并无显著相关性；3．AKT2参与调控]'EGF诱导的肾癌细胞的趋化运动和转移。4．AKT2有可能成为治疗转移性肾癌新的靶点。关键词：AKT2肾癌趋化运动转移预后Ⅱ精品参考文献资料优秀毕业论文天津医科大学硕士学位论文AbstractOb

6、iectivesDisscussiontheexpressionofAKT2inrenalCanCertissuesandanalysesitsclinicalsignificance．UsethesmallRNAtechnologytoknockdowntheexpressionofAKT2．InvestigatetheinfluenceofAKT2down—regulationinchemotaxisandtherelatedmolecularmechanism．Id饥ti母thatAKT2isnec

7、essaryforrenalcellcarcinomacellschemotaxis，andtrytofindanewtargettodesignantieaneerdrugs．Methods1．WeusedimmunohistochemistrymethodtodetecttheexpressionofAKT2indifferentrenalcellcarcinomas，analyzedtherelationshipbetweenAKT2expressionandelinicopathologicpar

8、ameters．2．WetrausfcctcdACHNcellswithsmallRNAinterferenceplasmidstodisruptAKT2expression，whichwasidentifiedbyWesternblottinganalysis．3．ChcmotaxisassayandwoundhealingassaywereperformedtodetecttheroleofAKT2inchemotaxis