yh1基因对人鼻咽癌细胞株cne-2z细胞生长增殖抑制作用研究

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1、广东医学院硕士学位论文YH1基因对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞生长增殖抑制作用研究姓名：黄文杰申请学位级别：硕士专业：@指导教师：何志巍200905聊基因对人鼻咽癌细胞株CNE一2Z细胞生长增殖抑制作用研究中文摘要【目的】研究珊基因对人低分化的鼻咽癌细胞株CNE．2z细胞生长增殖的影响，进一步确定其与鼻咽癌发生发展的关系。【方法】1．生物信息学方法分析预测珊的生物学特征。2．利用免疫组织化学方法检测阳7在鼻咽癌和慢性鼻咽炎症组织中的表达情况。3．将删蛋白编码序列插入到真核表达质粒pcDNA4／Hi胡Ⅵax中，构建狞订高表达的pcDNA4／His／Ma】【

2、．瑚重组质粒并测序鉴定。4．将pcDNA4／His／MaX．删重组质粒经脂质体介导转染入CNE一2Z细胞中，通过w醯temblot实验检测删在被转染细胞内的表达。5．将珊高表达重组质粒pcDNA伽is／Ma)【．删和删低表达重组质粒si对临．珊分别转染CNE．2Z细胞后，利用MTT实验和流式细胞技术，研究珊基因对人低分化鼻咽癌细胞株CNE．2Z细胞生长增殖的影响。【结果】1．预测得出：删可能为分泌型小蛋白。2．删基因在鼻咽组织的细胞浆中表达，且在人鼻咽癌组织中比在慢性鼻咽炎组织中有更低频率的表达。3．成功构建出Ⅲ，高表达的pcDNA4／His／Max一蹦，

3、重组真核表达质粒，将pcDNA4／His／Max一脚转染CNE一2Z细胞后，删在细胞内相对高表达。4．脚能明显抑制人鼻咽癌细胞株CNE一2Z细胞的生长增殖。【结论】掰J7能明显抑制鼻咽癌细胞的生长增殖，是鼻咽癌发生发展中的重要候选抑瘤基因之一。【关键词】鼻咽癌；删；PU烈C；CNE．2Z；基因功能2StlldytheFunc伽nof珊GeneonCeuGr删thandProUferationinHumanNasopharyngeaICarcinomaCeULineCNE一2ZCeUsAbstract【objectivelT0studythe缸lCtiono

4、f疆以g朗eoncellgrow吐l锄dproli触嘶oniIlhummnasophar)，Ilgcalcardnomacdlli鹏CNE·2Zcells．【Methods】1．Anal)，zcd锄dforecastednlebi010舀calcharaCt鲥sticsof珊即teillbybioillf．0nnaticsmetllods．2．DetermiIledmeexpressio鹏ofy捌proteiIliIl6ssuesofnasopharyllgealcarcinomaanddⅡ‘oIlicnasophar)，Il百tisbyimmunolli

5、stoch锄i曲叮溉n．3．IIlsenedtllecodingsequeilceofymint0eIll(aryoticcxpressionpl硒IIlidtoconS饥lCtpcDNA4／His／Max-珊plasmid，tllenidentifieditbyDNAsequellcing．4．Tr姐s矗∞tedtllepcDNA佣is／Ma】【-脚7plasmidintoCNE-2Zcellsusing1枷触锄inc觚ddetectedtlleexpression1evdof删proteinbywest锄blot鹪sayintlle仃asfIected

6、cells．5．StudicdⅡ1ee彘ctof删inllibitingⅡlegrowm锄dproli储atjon0nn硒opharyIlg砌carCinomacenlineCNE-2ZcellsbyMTTandnowcytome臼呼【Results】1．Thcpfcdicatedresult丘．ombioinfonnaticsm础odsistIlatmebiolo西calcharact嘶sticsof珊proteinshouldbeasec]retpmteill．2．删protcinw硒detectediIlcytol舯phandⅡleexpressio

7、nleVclofitinNPCtissueswaslowerⅡl觚inchr0IlicnasopharyIl西tisbyimmuohistoCh锄ist叮stain．3．Wb叭ccess如llyc0璐仃uctedⅡle删overeXpressionpla锄idbyDNAsequ∞cing锄dWest锄blot鹞say．o呱dataShow。dtllat珊protcincouldbchiglllyeXpr懿sediIltlleCNE一2ZcellstaJls矗蔽edwimpcDNA4／His／MaX·聊plaSmid．34．CNE一2Zccus舯wtll锄d

8、proli觚i∞wercsi班丘c锄tlyh11libitcdiI