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1、宫颈HPV分型检测对宫颈癌早期诊断中的作用夏林(江苏省扬中市人民医院212200)【摘要】目的：探讨HPV分型检侧对宫颈癌早期的临床诊断价值。方法：选取2013年1月一12只于我院行液基细胞学检查不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)及以上的患者共286例。其中，不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)者234例，低度鱗状上皮内病变(LSIL)者43例，高度鱗状上皮内病变(HSIL)者5例，鳞状细胞癌(SCC)4例，所有患者均进行HPV基因亚型检查，井21种亚型。结果：HPV检查阳性患者96例(33.57%)。其中，高危型患者31例(10.84%)，来自ASCUS、LSIL、
2、HSIL及SCC患者分别为13例(4.55%)、11例(3.85%)、3例(1.04%)及4例(1.40%),平均年龄为(43.17±10.23)岁；低危型患者65例(22.72%),来自ASCUS、LSIL、HSIL及SCC患者分别为44例(15.38%)、19例(6.64%)、2例(0.70%)及0例，平均年龄(33.65±10.28)岁。结论：HPV分型检测是早期诊断宫颈癌的有效方法，与液基细胞学检测结合可以早期诊断宫颈癌，为患者提供早期治疗争取时间。【关键词】液基细胞学人乳头状瘤病毒宫颈癌早期诊断【中图分类号】R730.4【文
3、献标识码】A【文章编号】2095-1752(2014)21-0120-02近年来，宫颈癌的发病率逐年升高，尤其是在年较妇女中的发生率更是明显升高。液基细胞学的应用明显提高了宫颈癌前病变诊断的准确性，对检查阳性的患者再行人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测，则可以进一步了解其类型，更好地筛查出高危型患者。木文就液基细胞学检查ASCUS及以上(阳性)的患者进行HPV基因亚型检测，以便更有效地进行宫颈癌的早期诊断。1.研究对象和方法1.1临床资料：选取2013年1月-12月于我院行液基细胞学检查不典型鱗状上皮细胞(ASCUS)及以上的患者共286例。入选标准为：年龄21
4、-83岁，平均年龄(45.39±15.47)岁，排除妊娠及急性生殖道炎症，24h内无性生活，48h内无阴道用药史，至少半年内未进行任何宫颈病变诊断和治疗方法处理，所有患者均进行HPV检测。其中，不典型鱗状上皮细胞(ASCUS)者234例，低度鳞状上皮内病变(LSIL)者43例，高度鱗状上皮内病变(HSIL)者5例，鱗状细胞癌(SCC)4例。1.2检测方法：宫颈细胞学诊断依据TBS［l］(TheBathesdaSystem)诊断标准。细胞病理学检查宫颈细胞涂片标本由妇科门诊医师统-采集，并统-由病理科分析诊断。1.2.1主要试剂与仪器：Thinpre
5、p液基细胞学检测仪,HPV分型基因芯片试剂盒，电子阴道镜为SLC-2000B型。1.2.2液基细胞标本采集及处理：采用专用塑料刷收集患者宫颈外口和宫颈管的脱落细胞，装入盛冇Thin-Prep细胞保存液的小瓶中。保存液中的标本经ThinPrep2000系统程序化处理(将标本中的黏液、血液和炎细胞与上皮细胞分离，经高精密度滤器过滤后转移到静电处理过的载玻片上［2】)，制成直径为2cm的薄层细胞涂片，用95%酒精固定，行巴氏染色，最后中性树胶封片。1.2.3HPV检测实验方法：采用HPV核酸扩增分型检测系统进行HPV基因亚型的检测(21种)。将剩余标本转移入1.5mL
6、微量离心管中，用14000r/分离心5分钟后弃去上清液，管底的细胞块用50uL裂解液悬浮，100°C水浴加热15分钟,14000r/分再次离心5分钟，取上清液进行PCR扩增、杂交、洗膜及显色［3】。HPV分型检测:分为高危型和低危型［4】(高危型亚型:16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68;低危型亚型:6,11,42,43,44,CP8304)共21种基因型。1.3观察指标及判定方法：细胞学诊断标准采用TBS诊断标准。其中，ASCUS、LSIL、HSIL及SCC为细胞学检查阳性，即（+）。HPV-DNA扩增结果判
7、定采用肉眼观察检测结果的方法。HPV单-•感染吋，在膜芯片上相应HPV亚型探针位点处可见到1个蓝色斑点，双重或多重感染吋在膜芯片上可见到2个或2个以上的显色斑点［5］。1.4统计学分析：采用SPSS17.0软件对数据进行统计学处理及分析。计数资料采用卡方检验，以g=0.05为检验水准。1.结果HPV检查阳性患者96例（33.57%）。其中，高危型患者31例（10.84%）,来自ASCUS、LSIL、HSIL及SCC患者分别为13例（4.55%）、11例（3.85%）、3例（1.04%）及4例（1.40%）,平均年龄为（43.17±10.23）岁；低
8、危型患者65例（22.7
