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1、姜黄素对胃癌细胞放疗敏感性影响的研究湖南中医药高等专科学校附属第一医院412000【摘要】目的：探讨姜黄素对人胃癌细胞株SGC-7901放疗敏感性的影响。方法：以人胃癌细胞株SGC-7901为研究对象，将人胃癌细胞株SGC-7901随机分成空白对照组、单纯姜黄素组、单纯照射组、姜黄素加照射组。用MTT比色法检测姜黄素对人胃癌细胞株SGC-7901增殖效应的影响；流式细胞仪检测姜黄素对人胃癌细胞株SGC-7901的凋亡率和细胞周期分布的影响。所有实验均重复3次，取其均值为最终结果。结果：姜黄素能诱导胃癌细胞株SGC-7901的凋亡，抑制其增
2、殖，且随着药物浓度的增加，凋亡率升高；单纯姜黄素组及姜黄素加照射组G2/M期细胞的比例明显升高。结论：姜黄素可显著提高胃癌细胞株SGC-7901的放疗敏感性，其作用机制可能与周期阻滞及其凋亡诱导效应相关。【关键词】姜黄素；胃癌细胞；放疗；增敏作用引言：临床上一些肿瘤对放疗敏感性相对较差，周围危及器官多，增加放射剂量多会导致较为严重的并发症，影响放疗疗效。临床希望有效的放射增敏剂来提高肿瘤细胞的放疗敏感性，从而在不增加或减少放疗剂量的情况下杀灭或控制肿瘤细胞，保护周围危及器官，提高临床疗效。姜黄素具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤和降血脂等多种作用，
3、能够诱导肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞的转移和侵袭并能够逆转肿瘤细胞耐药、增强放疗敏感性。木实验旨以胃癌细胞株SGC—7901为研究对象，探讨姜黄素是否对胃癌细胞株SGC-7901有放射增敏效应，为提高胃癌的放疗疗效提供可靠的实验依据。1.材料与方法1.1药物与细胞培养姜黄素购自SIGMA公司，以二甲基亚砚(DMSO)溶解制成10mmol/L的储存液备用。人胃癌细胞株(SGC-7901)为木实验室冻存保有，细胞培养采用DMEM培养基（10%胎牛血清、青霉素80U/MK链霉素100U/MI）,置于37°C,5%CO2培养箱中培养。放射治疗设备
4、为美国Varian公司的23EX电子直线加速器。1.2细胞照射医用直线加速器6MV一X射线照射,机架角180。射野25cm×25em,剂量率200cGy/min,吸收剂量2Gy。照射吋将培养瓶的细胞面朝下，在瓶上下加垫一块1.5cm厚的等效有机玻璃板，放疗源至有机玻璃板面的距离为100cm,2Gy等中心照射后，继续培养受照细胞。1.3MTT实验96孔培养板中每孔接种1×10A4细胞，培养至贴壁，更换为含姜黄素的培养液200μl,使终浓度分别为0、5、10、15、20、40、60、80μmol/L,每一浓
5、度设5个复孔，并设空白调零组，培养24h,培养结束后每孔加入MTT试剂20μl,继续培养4h。酶标仪检测吸光度值，并计算抑制率。1.4AnnexinV荧光染色检测细胞凋亡参照相关实验方法检测姜黄素对细胞凋亡的影响。细胞分为3组，姜黄素浓度分别为0、5、10μmol/Lo取生长指数期细胞，分别加入姜黃素后继续培养24h,胰酶消化并收集细胞，离心lOMin,弃上清液。4°C预冷PBS洗涤2遍，按试剂盒说明书操作，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。重复实验3次。1.5姜黄素对胃癌细胞细胞周期的影响实验分组情况：空白对照组（DMSO）,单纯
6、药物组（DMSO和姜黃素），单纯照射组（DMSO和照射）和姜黄素加照射组（DMSO、姜黄素和照射），利用流式细胞仪检测姜黄素和放射治疗对细胞周期的影响。1.6统计学分析本实验所有计量资料以'x±s表示，用SPSS16.0软件进行方差分析。P<O・05为差异，有统计学意义。2.结果2.1姜黄索对胃癌细胞株人胃癌SGC-7901的抑制作用及浓度选择姜黄素能够抑制胃癌细胞株SGC-7901的增殖，且这种作用随着浓度的升高而增强(见表1)。在低于10μmol/L浓度吋，姜黃素对胃癌细胞的抑制率低于10%,本实验选用5、1
7、0μmol/L浓度为放疗增敏浓度。2.2姜黄素对胃癌细胞的放疗增敏作用姜黃素预处理后的存活分数均低于单纯照射组(F浓度=5.63,P<0.05,表2)。2.3姜黃素对胃癌细胞株SGC-7901凋亡的影响姜黄素能够诱导胃癌细胞株SGC-7901的凋亡,这种作用随着药物浓度的增加而增强。5和10μmol/L姜黄素处理后，细胞的凋亡率是8.9±0.67%和11.9±0.93%<>与对照相比具有统计学差异(P<0.05),且10μmol/L姜黄素干预组凋亡率高于5μmol/L组(PV0.05)。
8、2.4姜黄素对细胞周期分布的影响见表3。单纯药物组和单纯照射组细胞的G2/M期细胞的比例较对照明显升高(P<0.05)o而姜黃素加照射组G2/M期细胞比例明显高于姜黄素组和单纯照射组(P<0.
