透射电镜使用及常规样品观察

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1、电镜技术头验报告1='姓名：专业:学号:口期：成绩:任课老师：实验名称：实验二：透射电镜使用及常规样品观察一、实验目的:了解透射电了显微镜的基本原理、电镜生物标本的制备方法及电镜金属标本的制备方法和观察二、实验原理：透射电子显微镜是以图象方式提供样品的检测结果，其成像的决定因素是样品对入射电子的散射，包括弹性散射和非弹性散射两个过程。薄样品成像吋，未经散射的电子构成背景，而像的衬度取决于样品各部分对电子的不同散射特性。采用不同的实验条件可以得到不同的衬度像。透射电子显微镜不仅能显示样品显微组织的形貌，而且可以利用电子

2、衍射效应同样获得样品晶体学信息。透射电镜的构造及与光学显微镜比较:照明系统二成像系统透射电子显微镜透射光学显微镜三、仪器与材料：仪器：JEM-2100型透射电子显微镜、超薄切片机、恒温箱、400目铜网等材料：金样品四、实验内容：1、了解透射电镜生物标本超薄切片的制备：取材：用锋利的刀片切取lmin3目标样本组织，立即投入固定液中，取材要迅速，以防止细胞缺氧发生超微结果变化；I古I定：把样本立即投入到0.lmol/L(PH7.4)的二甲碑酸钠缓冲液配制的2.5%戊二醛中,4°C固定2小时。然后用0.lmol/L(pH7

3、.4)的二甲碑酸钠缓冲液洗三次，再放入用相同缓冲液配制的1%娥酸中固定2小时(4°C)；脱水；浸透；包埋；聚合：把装有标本和包埋剂的胶囊置35、45、60温箱中各24小时，使包埋剂聚合，硬化，由流体变为均匀的固体；超薄切片：一般透射电镜的切片厚度不能超过lOOmn,通常超薄切片厚度为50-70nm；染色：将样本置于枸缘酸铅染液中染色，l%NaOII溶液洗一次，水洗二次，干燥后观察。2、透射电镜标本的制备(由老师完成)：一个金样品超薄切片2、用透射电镜观察金样品3、对所观察样晶进行拍照五、实验结果及思考：实验结果以照片

4、形式附在最后。思考：1、透射电镜的制样目的：要使样品做的很薄，以利于电子束的穿过。2、什么是超薄切片技术：超薄切片技术包括：取材、固定、脱水、浸透、包埋、切片及染色。电镜样品采用戊二醛和餓酸双重固定，用酒精或丙酮脱水，环氧树脂进行包埋。3、铜网的构造及其作用：铜网一般直径为3毫米，上面铳有许多微米大小的孔，在铜网上覆盖了一层很薄的火棉胶膜并在上面蒸镀了碳层以增加其膜的强度，被分析样品就承载在这种支撑膜上。4、SEM照片与TEM照片比较：SEM图象是三维的，而TEM图象是平而二维的；SEM图象的标尺一般比TEM的大近十

5、倍；SEM图象反应的是样品表面的信息，而TEM图象反应的是样品内部结构。铜网铜网网孔铜网上的膜金颗粒电子衍射图测量金颗粒电子衍射图半径：由内圈到外圈，半径依次为：4.17l/nm>4.71l/nm>7.03l/nm>8.341/nm