医学毕业论文体外构建的htahsp70bcg冲激的树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用

《医学毕业论文体外构建的htahsp70bcg冲激的树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、体外构建的HTAHSP70BCG冲激的树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用姓名：2014年6月25日体外构建的HTAHSP70BCG冲激的树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用作者：孙光，郭连英，沈洁，刘丹丹，施广霞，钱振超【摘要】目的观察体外构建的榄呑烯复合瘤苗抗原卡介苗热休克蛋白70复合物(HTAHSP70BCG)诱导的树突状细胞疫苗的抗肿瘤效应。方法来源于小鼠的肝癌HcaF榄香烯复合疫苗的抗原(HTA)与卡介苗来源的HSP70(HSP70BCG)在体外构建成HTAHSP70BCG复合物，用GMCSF和IL4诱导树突状细胞(DCs),分别用HTAHSP70BCG、HTA和HSP70BCG对其冲激。用

2、MTT法检测该DCs刺激的全脾细胞的增殖活性及被刺激的脾细胞的细胞毐活性。用流式细胞仪检测DCs表面CD86和CD40的表达。结果体外构建HTAHSP70BCG可以诱导DCs成熟，表现为DCs表达CD86和CD40上调，该DCs可以刺激全脾细胞增殖并使其产生特异性杀瘤活性，其强度明显大于HTA。结论体外构建HTAHSP70BCG复合物可以诱导DCs成熟，该DCs可以激活脾细胞产生较强的特异性抗瘤效应。【关键词】热休克蛋D70;树突状细胞；肿瘤瘤苗；抗瘤效应基金项目：教育部高等学校骨干教师资助计划AntitumorEffectsInducedbyDendriticCellVaccin

3、ePulsedwithHTAHSP70BCGComplexReconstitutedinVitroAbstract：ObjectiveToinvestigateantitumoreffectsinducedbydendriticcells(DCs)pulsedwithcomplexoftumorantigenfromelemenecombotumorcellvaccineheatshockprotein70ofBCG(HTAHSP70BCG).MethodsTumorantigenpeptidesfromclcmcnccomboHcaFcell(HTA)combinedwithHS

4、P70BCGintoHTAHSP70BCGinvitro.DCswereinducedinmediumwithGMCSFandIL4andpulsedwithHTAHSP70BCG，HTAandHSP70BCQrespectively.TheproliferationstimulatingeffectsonunseparatedsplenocytesandthecytotoxicityofthesplenocytesactivatedwithDCswereevaluatedwithMTTassay.TheexpressionofCD40andCD86onthesurfaceofDC

5、swasassessedbyflowcytometer.ResultsPulsingofHTAHSP70BCGresultedinDCsmaturation,characterizedbyupregulationofCD86andCD40.ProliferationindexofunseparatedsplenocytesfromHTAHSP70BCGgroupwassignificantlyincreasedascomparedwithHTAgroup.UnseparatedsplenocytesfromDCspulsedwithHTAHSP70BCGrevealedthecyt

6、otoxicityagaistHcaF，TheHTAfailedtorevealthecytotoxicityagainstHcaF.ConclusionHTAHSP70BCGcouldinduceDCsmaturationandthematureDCscouldactivatesplenocytestogeneratemorepotentspecificantitumoreffect.Keywords:Heatshockprotein70；Dendriticcell；Tumorvaccine；Antitumoreffects0引言热休克蛋D(Heatshockproteins,H

7、SPs)是细胞受到应激时新合成或合成增加的一组蛋白质，被称为分子伴侣，在细胞抗原的加工和提呈方而起重要作用［1］。分枝杆菌HSPs与相关抗原形成融合蛋白可诱导特异性T细胞反应，分枝杆菌HSP70富含T、B细胞表位，是细胞免疫的重要靶点，可被用来作为疫苗的载体［2］。现已证明，从肿瘤细胞来源的HSPs肿瘤肽复合物可诱导抗肿瘤免疫应答［3,4］,HSP70BCG能通过树突状细胞(Dendriticcell,DC)表面TLR4途径诱导DC成熟［5］。本炙验采用榄香稀处理的H