海洛因戒断、脱毒及复吸对大鼠睾丸EGF、βEP、CgA免疫反应细胞及血清FSH、LH水平影响的分析

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1、目录摘要„„„„„„„„„„„„„„2前言„„„„„„„„„„„„„„4材料与方法„„„„„„„„„„„„6结果„„„„„„„„„„„„„„8讨论„„„„„„„„„„„„„„20参考文献„„„„„„„„„„„„„25英文摘要„„„„„„„„„„„„„30致谢„„„„„„„„„„„„„„31略缩词表„„„„„„„„„„„„„32论文原创性声明„„„„„„„„„„33附：综述„„„„„„„„„„„„341海洛因戒断、脱毒及复吸对大鼠睾丸EGF、β-EP、CgA免疫反应细胞及血清FSH、LH水平影响的研究组织学与胚胎学2008级研究生：谢莉导

2、师：梁文妹教授摘要：目的研究海洛因戒断、脱毒、复吸期间大鼠睾丸表皮生长因子（epidermalgrowthfactor，EGF）、β-内啡肽（β-endrophin，β-EP）、嗜铬颗粒素A（chromograninA，CgA）免疫反应（immunoreactive，IR）细胞形态功能的变化，以及血清卵泡刺激素（follicle-stimulatinghormone，FSH）、黄体生成素（luteinizinghormone，LH）放免测定结果的改变。探讨睾丸EGF、β-EP、CgA、以及FSH、LH在大鼠海洛因戒断、脱毒和复吸期间的可

3、能作用。方法正常雄性SD大鼠63只，随机分为实验组21只，盐水对照组21只和正常对照组21只。实验组大鼠又分为海洛因戒断、美沙酮脱毒治疗、海洛因复吸三组，每组7只。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型，戒断组大鼠于第10d注射纳洛酮建立戒断模型；其余大鼠用美沙酮脱毒治疗6d；最后剩余大鼠予再次注射海洛因7d建立复吸模型。各组大鼠心脏取血，用于放射免疫法测定；多聚甲醛灌注固定，取睾丸组织，免疫组织化学SABC法、细胞计数、图像分析法进行研究。结果1.EGF：与正常及盐水对照组比较，戒断组EGF-IR细胞染色加深，图像分析测定，免疫反应强度

4、增强，平均灰度值降低，但细胞数有所减少；脱毒组EGF-IR细胞免疫反应强度有所下降，但仍强于正常及盐水对照组，细胞计数有所恢复；复吸组中EGF-IR细胞免疫反应强度较正常及盐水对照组减弱，平均灰度值升高，细胞数再次减少。2.β-EP：戒断组中β-EP-IR细胞免疫反应强度较正常及盐水对照组增强，平均灰度值降低，细胞数减少；美沙酮脱毒后β-EP-IR细胞免疫反应强度及细胞计数在脱毒后逐渐恢复；海洛因复吸后，β-EP-IR细胞免疫反应强度减弱，平均灰度值升高，细胞计数再次减少。3.CgA:海洛因戒断组，CgA-IR细胞免疫反应强度减弱，细胞

5、计数减少；美沙酮脱毒后CgA-IR细胞免疫反应强度和细胞计数在脱毒后逐渐恢复，较正常和盐水对照组无明显差异；复吸组CgA-IR细胞染色变浅，平均灰度值升高，细胞计数再次减少。4．放射免疫测定结果表明，LH在大鼠戒断和复吸期间处于较低水平，脱毒期间与正常组和盐水组比较无明显差异；FSH在大鼠戒断、2脱毒、复吸期间则变化无统计学意义。结论在戒断和复吸期间，EGF、β-EP、CgA在大鼠睾丸内的表达及血清LH的分泌受到影响，参与了机体的内分泌调节。经过美沙酮脱毒后β-EP、CgA的表达及血清LH的分泌接近正常，提示经美沙酮治疗后大鼠睾丸内β-

6、EP、CgA及血清LH功能可能有所恢复，而EGF脱毒后表达虽有下降，但仍高于正常，可能尚未完全恢复。放射免疫测定血清FSH的结果则提示海洛因戒断、脱毒、复吸可能对血清FSH的分泌影响较小。关键词：EGF;β-EP;CgA;睾丸；海洛因；戒断；脱毒；复吸；大鼠；美沙酮；免疫组织化学；放射免疫。3前言海洛因滥用影响着全球大约1千万的人口，在15-64岁之间的人口中流行率平均达0.4%[1]。大量的基础和临床资料都表明，海洛因滥用可引起机体多种器官的损害。正常机体中有常量的内源性阿片肽，当给与外源性阿片肽，会竞争性结合内源性阿片肽受体[2]。

7、如中断海洛因的摄入，机体内源性阿片类物质缺乏，阿片受体及其内源性阿片肽系统不能调节各系统的变化而出现戒断症状[3]。戒断症状的出现又是导致海洛因复吸的主要因素。睾丸是哺乳动物生长发育和种族繁衍的重要生殖器官。其主要的结构为生精小管、睾丸间质。睾丸间质细胞呈圆形或者多边形，核圆居中，位于生精小管之间的富含血管的睾丸间质内，主要分泌睾酮，此外还分泌表皮生长因子（epidermalgrowthfactor，EGF）[4]、β-内啡肽（β-endorphin，β-EP）[5]、嗜铬颗粒素A（chromograninA，CgA）[6]等。EGF是

8、最早由Cohen在小鼠颌下腺中发现的一种小分子蛋白质[7]。大鼠出生后睾丸即开始产生EGF，主要由间质细胞分泌产生[4]。EGF对上皮、胃肠道、生殖系统（尤其对睾酮的发生）有着广泛的影响。β-EP为具有吗啡