大鼠海洛因依赖期间睾丸CgA-IR细胞的免疫组织化学研究.doc

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1、大鼠海洛因依赖期间睾丸CgA-IR细胞的免疫组织化学研究【摘要】　　目的：探讨大鼠睾丸嗜铬颗粒素A(CgA)免疫反应细胞在海洛因依赖期间的作用。方法：应用免疫组织化学SABC法及图像分析方法，研究大鼠海洛因依赖期间睾丸CgA免疫反应（IR）细胞形态学及功能的变化。结果：在生精小管之间的睾丸间质内可见到CgA-IR细胞，阳性产物存在于细胞胞质中；与正常组及对照组比较，海洛因依赖组大鼠睾丸CgA-IR细胞免疫染色强度明显减弱，阳性细胞数量明显减少（P<0.05）；图像分析结果表明，CgA-IR细胞的平

2、均灰度值在海洛因依赖期间呈增高趋势（P<0.05），尤以17d时最高。结论：在海洛因依赖期间，大鼠睾丸CgA-IR细胞数量减少、分泌功能减弱，与机体的调节过程有关。【关键词】嗜铬颗粒；睾丸；海洛因依赖；免疫组织化学；大鼠，Sprague-Dawley　　［Abstract］Objective:ToexplorethepossiblefunctionofChromograninAimmunoreactive(CgA-IR)cellsinrattestisduringheroindependence.

3、Methods:ImmunohistochemicalSABCmethodandimagineanalysiswereusedtostudythemorphologicalandfunctionalchangesofCgA-IRcellsinrattestisduringheroindependence.Results:TheCgA-IRcellswerelocatedintheinterstitialtissuebetweentheseminiferoustubules,andthepositives

4、ubstanceswereinthecytoplasm.Ascomparedwithnormalcontrolgroupandsalinecontrolgroup,inheroindependentgroupthenumberofCgA-IRcells(P<0.05),andtheimmunohistochemicalstainingintensitydecreasedevidently.Theresultofimageanalysisshowedthattheaveragegraydegreeo

5、ftheCgA-IRcellsincreasedduringheroindependence(P<0.05)，especiallyonthe17thday.Conclusions:ThenumberandthesecretionfunctionoftestisCgA-IRcellsdecreaseduringheroindependencewhichmightbeinvolvedinthephysiologicalregulationofheroindependence.　　［Keywords］c

6、hromaffingranules;testis;heroindependence;immunohistochemistry;rats,sprague-dawley　　嗜铬颗粒素A(C4gA)是广泛分布于神经内分泌细胞分泌颗粒内的一类蛋白质，具有调节机体神经-内分泌-免疫网络的功能。同时，CgA可作为一种肿瘤标志物，监测肿瘤的发展及转移。海洛因对机体的损害广泛而严重，特别是神经系统和下丘脑及垂体损伤后的效应损伤造成机体内神经递质、神经调质及内分泌免疫功能的失调[1]，目前尚未见对海洛因依赖期间大鼠睾丸内

7、分泌细胞形态学变化或CgA表达改变的有关报道。2006年4月-2007年10月，应用免疫组织化学、图像分析对大鼠海洛因依赖期间睾丸CgA免疫反应细胞的分布、形态及数量的改变进行研究，以探讨睾丸CgA免疫反应细胞在海洛因依赖期间的作用。　　1材料与方法　　1．1海洛因依赖动物模型　　　　成年雄性SD大鼠55只，体重180~220g（贵阳医学院实验动物中心提供），按配对原则随机分为正常对照组（NCG）5只，生理盐水对照组（SCG）25只，海洛因依赖组（HDG）25只。参照文献[2]制作动物模型，HDG大鼠腹

8、部皮下注射海洛因药液(纯度为61.48%，由贵州省公安厅提供)，首日剂量为3mg/kg，2次/d(上午8时，下午3时)，连续9d至成瘾，第9天剂量为27mg/kg。此后成瘾大鼠每日上午8时注射1次，维持剂量为27mg/kg，直至取材。SCG大鼠按体重每日注射与HDG相当剂量的生理盐水，并与HDG大鼠同时处死。NCG不予任何处理，常规喂养。　　1．2取材及标本处理　　　　HDG及SCG大鼠分别于模型建立的第10、17、24、31、38天取材，