涎腺粘液表皮样癌中ⅳ型胶原的表达及临床意义

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1、涎腺粘液表皮样癌中Ⅳ型胶原的表达及临床意义【摘要】目的：探讨Ⅳ型胶原蛋白在涎腺粘液表皮样癌中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学Ｓ-Ｐ方法，对４６例涎腺粘液表皮样癌进行Ⅳ型胶原蛋白的检测。结果：涎腺粘液表皮样癌中Ⅳ型胶原与其分化程度及淋巴结转移有关（P<0.0５），而与患者的性别、年龄无关（P>0.0５）。结论：Ⅳ型胶原的异常表达与涎腺粘液表皮样癌的生物学行为密切相关，可作为评估涎腺粘液表皮样癌预后的有效指标。【关键词】涎腺；癌/粘液表皮样；免疫组织化学【ABSTRACT】Objective:Toinvestigatetheclinicalsigni

2、ficanceofⅣcollagenexpressionsinmucoepidermoidcarcinomaofsalivarygland.Methods:TheexpressionsofⅣcollagenprotEinsmunohistochemistryS-Pmethodin46casesucoepidermoidcarcinomaofsalivarygland.Results:Ⅳcollagenphnodemetastasis.Ⅳcollagendidnotcorrelatealignantprogressionofmucoepidermoidcareinom

3、ainsalivaryglangandhaveimportanteffectonpredictingtheprognosisforthepatientsucoepidermoidcarcinomainsalivaryglang.【KEYucoepidermoid;Immunohistochemistry近年来,随着分子生物学研究的进展,有关细胞外基质与肿瘤细胞之间的相互作用在癌细胞浸袭中的意义有了较深入的研究,其中肿瘤基质中Ⅳ型胶原在肿瘤细胞的异常改变已成为研究热点。Ⅳ型胶原由血管内皮细胞所合成,并且是血管基底膜的组成成分［1］　。为探讨涎腺粘液表皮样癌表现出不同转

4、移能力的可能机理，对Ⅳ型胶原蛋白的表达进行了研究，旨在进一步阐明涎腺粘液表皮样癌的生物学特性及临床意义。1材料和方法1.1材料收集1990～2002年首次来河北北方学院附属第一医院手术治疗的涎腺粘液表皮样癌患者46例，其中男性25例，女性21例；发病年龄40～60岁；有淋巴结转移9例，无淋巴结转移37例。对手术切除标本46例进行取材，经10%中性甲醛溶液固定，梯度酒精脱水，石蜡包埋，切片厚度为4～5μm，HE染色确诊。1.2试剂采用武汉博士德生物工程公司提供的Ⅳ型胶原单克隆抗体，S-P试剂盒，DAB显色剂购自北京中山生物公司。1.3方法S-P免疫组织化学方法,染色过

5、程严格按试剂盒规定程序进行，切片常规脱蜡至水，经0.3%过氧化氢10min，枸橼酸盐缓冲溶液加热抗原修复20min，正常羊血清封闭10min，吸去多余血清后滴加第一抗体（Ⅳ型胶原单克隆抗体,即Ⅳcollagen）4℃孵育过夜。清洗后滴加第二抗体，37℃30min,再清洗,滴加第三抗体，37℃30min,DAB显色,用已知免疫组化阳性切片做阳性对照,PBS代替第一抗体做阴性对照。1.４判断标准Ⅳ型胶原阳性染色显示涎腺粘液表皮样癌巢周围基底膜的完整程度分为4级:完全缺如(-)、碎片型(+)、断续型（++）、连续型（+++）。1.5统计学方法统计分析方法为χ2检验，P&l

6、t;0.05为有统计学差异。2结果Ⅳ型胶原表达与涎腺粘液表皮样癌病理指标之间的关系见表1。Ⅳ型胶原在涎腺粘液表皮样癌中表达的强弱与癌组织的分化程度及淋巴结转移有关（P<0.05）,而与患者的性别、年龄无关（P>0.05）。表1Ⅳ型胶原表达与涎腺粘液表皮样癌病理指标之间的关系（略）注：与低分化组相比*P<0.05；与有转移组相比△P<0.05３讨论基底膜是阻止肿瘤细胞浸润扩散过程中的一道天然屏障。Ⅳ型胶原是基底膜的重要成分，Ⅳ型胶原以原纤维的形式存在，通过共价键交联组成多价三维网结构，其分布变化与各种恶性肿瘤转移潜能有关［２,３］。在正常状态下

7、，基底膜呈稳定且致密连续，能阻止大分子通过，肿瘤可破坏其连续性，并浸润、转移［４］。目前，Ⅳ型胶原异常表达的机制还不清楚，在肿瘤组织中的异常表达取决于各种因素。Ｄahlman等［５］研究发现肿瘤细胞可通过直接的细胞与细胞间接触或者是通过细胞因子，如血小板演生因子（PDGF）和转化生化因子（TGF－β）刺激成纤维细胞ColⅣmRNA的转录。Pfohler等［６］研究证实，在肿瘤中ColⅣmRNA水平表达是升高的。在肿瘤浸袭和转移过程中，组织屏障作用的丧失是一个重要作用，但是近年来的研究发现，ColⅠ、ColⅣ自身的生物作用，尤其是对肿瘤细胞生物学行为的影响不可忽视