涎腺粘液表皮样癌中p15与tgf β1的表达及意义论文

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1、涎腺粘液表皮样癌中P15与TGFβ1的表达及意义论文韩亮朱润庆马华玲刘卫容肖兰【摘要】目的：研究P15及TGFβ1在粘液表皮样癌中的表达，探讨它们在粘液表皮样癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测48例粘液表皮样癌及10例正常涎腺组织中P15及TGFβ1蛋白的表达。结果：粘液表皮样癌中P15的阳性表达率为72.69%(35/48)，显著低于正常涎腺组织中的表达(P0.05)。P15在高、中、低分化粘液表皮样癌中的阳性表达率分别为90.9%(20/22)、73.7%(14/19)、16.7%(1/6)，与组织分化程度存在显著相关性(P

2、=0.0026)。P15在粘液表皮样癌中的阳性率与淋巴结转移有显著性相关性(P0.05)，TGFβ1在粘液表皮样癌及正常涎腺组织中的阳性高表达率之间存在显著差异(P=0.001)。P15和TGFβ1在粘液表皮样癌的表达呈显著性相关性(P0.05)。结论：P15的表达与粘液表皮样癌的发生和发展关系密切，检测该指标有助于判断粘液表皮样癌的病理分级和预测淋巴结转移。TGFβ1的高表达可能与粘液表皮样癌的恶性生物学行为有关。【关键词】粘液表皮样癌P15；TGFβ1免疫组织化学肿瘤的发生是一个多因素多步骤的慢性病理过程。细胞周期是细胞的一种正常生活活动过程。近年来，细胞周

3、期与细胞癌变的关系被越来越多的学者所关注。细胞进入分裂周期需通过两个“限制点”：一是G1→S期转换之时，另一个是G2→M期过渡之际。而细胞增殖的关键是G1期的启动.freelinggro的11例，5cm的37例。另选取10例正常涎腺组织作对照。所有标本均经10%福尔马林固定、石蜡包埋、4μg连续切片，分别作HE及免疫组织(SP法)染色。所有患者术前均未作任何治疗，HE及免疫组化染色结果均经两位有经验的病理科医师双盲目法阅片且取得一致结果。粘液表皮样癌的诊断及病理分级依据《口腔组织病理学》第4版确定。2.2主要试剂鼠抗人P15单克隆抗体、兔抗人转化生长因子β1多

4、克隆抗体、即用型免疫组织化学超敏SP试剂盒(广谱)、DAB染色剂等均购自福州迈新生物技术开发公司。2.3实验方法按迈新公司提供的染色程序进行SP免疫组织化学染色。用已知的P15及TGFβ1阳性片作为阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。2.4结果判定P15阳性染色定位于细胞核和(或)细胞浆，以出现清晰的黄棕褐色颗粒判定为阳性，其表达以细胞核阳性着色为主，同时肿瘤细胞的胞浆也有表达。TGFβ1阳性细胞的着色主要表达在细胞浆和细胞膜，细胞核未见表达。每例先在低倍镜下选取阳性细胞多且分布均匀的区域，然后随机计数10个不重复、不重迭的高倍视野内的1000个细胞中的

5、阳性细胞数，计算阳性细胞的平均百分率。根据阳性细胞所占百分率，将P15的反应分为4级：Ⅰ级0%～5%,Ⅱ级6%～25%，Ⅲ级26%～50%，Ⅳ级≥50%(Ⅱ级以上为阳性表达)。TGFβ1的反应结果根据胞浆的着色程度分为：阴性（-）：胞浆无着色；弱阳性（+）：胞浆呈淡黄色反应；中等阳性（++）：胞浆出现棕黄色反应；强阳性(+++)：胞浆出现棕褐色着色(中等阳性以上为TGFβ1高表达)。2.5统计学处理各组数据结果以Fisher’s精确概率法或χ2检验进行显著性差异分析，以P0.05为显著性界限。3结果3.1P15在正常涎腺组织和粘液表皮样癌中的表达P15蛋白阳性表

6、达定位于细胞核和细胞浆，细胞核着色深，呈强阳性表达，细胞浆阳性表达相对较弱。10例正常涎腺组织均呈P15阳性表达(100%)，主要见于涎腺导管上皮细胞的胞浆和部分胞核以及血管内皮细胞。粘液表皮样癌中，P15的阳性表达率为72.9%，与正常涎腺组织中P15的表达相比具有显著性差异(χ2=5.513,P=0.0190.05)。P15基因蛋白在三种肿瘤上皮细胞中的表达以表皮样细胞最强，阳性细胞数最多，粘液细胞和中间细胞阳性细胞数目相对较少，但着色也较明显。高分化粘液表皮样癌中，P15阳性表达率为90.9%(20/22)，中分化粘液表皮样癌中P15阳性表达率为73.7%

7、(14/19)，低分化粘液表皮样癌中P15阳性表达率为16.7%(1/6)。经Fisher’s精确概率法处理(P=0.00260.05），显示P15的表达与组织分化程度存在显著性相关性，见表1。表1粘液表皮样癌中P15的表达（略）注：*与低分化粘液表皮样癌相比，P0.05。3.2TGFβ1在正常涎腺组织和粘液表皮样癌中的表达TGFβ1阳性染色定位于细胞浆及细胞膜，呈淡黄棕褐色，未见细胞核染色。正常涎腺组织中，TGFβ1的阳性着色见于各级导管上皮细胞、血管内皮细胞和涎腺间质中，阳性表达率为100%(10/10)，其中高表达率为30%。48例不同分化程度的粘液表皮

8、样癌中，TGFβ1均呈阳