《色谱法简介》ppt课件

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1、一．教学内容色谱分离的基本概念和基本原理色谱分离的理论基础简单的色谱定性和定量分析的方法2.1色谱法概述2.1.1色谱法的起源和发展胡萝卜素(黄色)石油醚+植物色素石油醚CaCO3固定相叶绿素(绿色)叶黄素(黄色)液液分配色谱硅胶水乙醇－氯仿(流动相)各种氨基酸硅胶为载体水为固定相年代发明者发明的色谱方法或重要应用1906Tswett用碳酸钙作吸附剂分离植物色素。最先提出色谱概念。1931Kuhn,Lederer用氧化铝和碳酸钙分离a-、b-和g-胡萝卜素。使色谱法开始为人们所重视。1938Izmailov,Shraiber最先使用薄层色谱法。1938Taylor,Uray

2、用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。1941Martin,Synge提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色谱）。1944Consden等发明了纸色谱。1949Macllean在氧化铝中加入淀粉黏合剂制作薄层板使薄层色谱进入实用阶段。1952Martin,James从理论和实践方面完善了气-液分配色谱法。1956VanDeemter等提出色谱速率理论，并应用于气相色谱。1957基于离子交换色谱的氨基酸分析专用仪器问世。1958Golay发明毛细管柱气相色谱。1959Porath,Flodin发表凝胶过滤色谱的报告。1964Moore发明凝胶渗

3、透色谱。1965Giddings发展了色谱理论，为色谱学的发展奠定了理论基础。1975Small发明了以离子交换剂为固定相、强电解质为流动相，采用抑制型电导检测的新型离子色谱法。1981Jorgenson等创立了毛细管电泳法。一、色谱法的定义2.1.2色谱法定义和分类定义：利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。特点：高超的分离能力，是一种物理化学分析方法具体优点：（1）分离效率高。（2）应用范围广。（3）分析速度快。（4）样品用量少。（5）灵敏度高。（6）分离和

4、测定一次完成。（7）易于自动化，可在工业流程中使用。定性能力较差。色谱法的缺点二、色谱法的重要概念固定相流动相色谱柱1、按流动相所处的状态分类气相色谱---用气体作流动相液相色谱---用液体作流动相气—固色谱气—液色谱液—固色谱液—液色谱三、色谱法的分类超临界流体色谱2、按固定相使用的形状分类①柱色谱：固定相装在柱管内。②纸色谱③薄层色谱(纸色谱和薄层色谱又统称作平板色谱)3、按分离过程的物理化学原理分类①吸附色谱(L－S，G－S)②分配色谱(L－L，G－L)③离子交换色谱(L－S)④空间排阻色谱(L－S)吸附色谱(L－S，G－S)分配色谱(L－L，G－L)Conditio

5、nedsorbentGoodtransportbetweensampleandsorbent硅胶水离子交换色谱(L－S)OHElectrostaticattractionSilicabaseCO2HCO2-OCON(CH3)2+NNH3+SO3-空间排阻色谱(L－S)2.2色谱分离原理1.分配系数（K）Cs：被测组分在固定相中的浓度Cm：被测组分在流动相中的浓度2.2.1分配系数和分配比分配系数意义：①K是热力学常数，K值除了与温度、压力有关外，还与被测物、固定相和流动相的性质有关。②K值大→Cs大→tR长→移动速度慢。③若两组分的K值相等→两个组分分离开。2.分配比（k）

6、β：相比分配比的意义：①k随K和β的变化而变化；②k值越大→ms越多→柱的容量大k又称作容量因子。③k是表征色谱柱对被测组分保留能力的主要参数。2.2.2色谱法分离原理色谱分离过程的特点：不同组分在通过色谱柱时移动速度不等。流动相BBA空气BA+BA检测和记录A+B+空气进样固定相流动相10020030040050.0310.00160.0780.00470.1180.00880.1380.01490.1380.021100.1250.03110.1050.04120.0830.045130.0630.052.3色谱流出曲线五种磺胺的色谱图气相色谱分离多环芳烃色谱图一、色谱

7、流出曲线或色谱图以检测器对组分的响应信号为纵坐标，流出时间(或流出体积)为横坐标作图所得的曲线。R——f(t,V)二、色谱流出曲线构成：由基线和色谱峰组成。基线：指仅有流动相通过而没有待测物，检测器响应信号随流出时间的变化。色谱峰：在基线上突起的部分，它是由引入流动相中被测物引起的。色谱图或色谱流出曲线描述色谱峰三种参数峰高(或峰面积)——峰的大小区域宽度——峰的形状保留值(时间t、体积v)——峰的位置2.3.1色谱峰高斯分布曲线1．峰高h2．标准偏差σ，0.607h处，拐点处，峰宽正好为2σ3．峰面积AA＝1