膜分离技术纯化白藜芦醇的研究

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1、膜分离技术纯化白藜芦醇的研究刘志昌夏炎张莹陈莹韩骁万端极【摘要】　　目的利用膜分离技术分离纯化白藜芦醇，减少污染。方法虎杖苷液态发酵后浓缩，用60%的乙醇以1∶8的料液比在常温下提取，过滤得到滤液，然后将滤液用两级膜进行处理，用高效液相色谱（HPLC）法检测白藜芦醇的纯度。结果经微滤膜处理后白藜芦醇的纯度达30.5%，再经超滤膜处理，纯度达55.8%。结论该方法可降低生产成本，不使用有毒有害的溶剂，实现清洁生产。【关键词】膜分离技术；白藜芦醇；清洁生产　　Abstract：ObjectiveThemembraneseparat

2、iontechnologyusedinthepurificationofresveratroandreducingpollutionentation,resveratrotemperature,solid/liquidratio1:8,thefiltrateembraneequipments,thepurityofresveratrolicrofiltrationmembrane,andaftertheultrafiltrationmembranethepurityofresveratrocouldreach55.8%.Con

3、clusionThismethodcanreducethecostofproductionfulsolventsanditcanrealizecleanproduction.　　Keybraneseparationtechnology；Resveratro；Cleanproduction　　虎杖苷是蓼科蓼属虎杖干燥根茎中的一种有效成分，也可称为白藜芦醇苷。虎杖苷在植物中分布广，含量高，具有较强的生物活性。虎杖中的虎杖苷的含量在2%左右〔1〕。白藜芦醇也是虎杖的有效成分之一，其含量在0.1%～0.2%之间，属于多酚类化合物。白藜

4、芦醇有化学抗癌活性，同时具有抑制血小板凝聚、保护缺血器官、抗氧化及抑菌等重要的作用〔2〕，是目前世界上一种最新的药用保健活性物质。目前，该产品国际市场需求量大，具有良好的市场前景。传统纯化白藜芦醇的方法主要是大孔树脂吸附，这种方法主要存在原料消耗大、产品纯度不高、生产周期长、使用有毒化学物质多、污染大等缺点。本实验利用膜分离技术纯化白藜芦醇。报道如下。　　1材料和方法　　1.1仪器、原料、试剂和设备虎杖苷粗提物（粉末状，虎杖苷含量14.78%）；白藜芦醇标准品（成都思科华有限责任公司）；乙醇（工业纯）；HPLC：戴安V-1（湖

5、北工业大学膜技术研究所研制）；膜设备HGDM-2（湖北工业大学膜技术研究所研制）。　　1.2方法　　1.2.1白藜芦醇的HPLC法检测色谱柱C18柱（4.6mm×150mm）,柱温25℃；流动相甲醇-水为40∶60；流速1ml/min；进样量20μl；检测波长305nm。根据标准样的峰面积和进样浓度作回归曲线，白藜芦醇的回归方程为Y=1.40×108X+1.21×104,相关系数r=0.999913，在20～100μg/ml范围内和峰面积呈线性关系；虎杖苷的回归方程为Y=9.61×107X-1.84×105，相关系数为r＝0.

6、99982，在20～100μg/ml范围内和峰面积呈线性关系。　　1.2.2实验过程白藜芦醇分离纯化流程见图1。　　图1两级膜分离纯化白藜芦醇流程图（略）　　虎杖苷液态发酵后浓缩，用60%的乙醇以1∶8的料液比在常温下提取，过滤得到滤液，然后将滤液连续投入微滤膜装置中，收集其滤液，再将滤液投入超滤膜装置中，收集其滤液。超滤膜的浓缩液中含有大黄素，可以回收利用。实验过程中分别记录时间、操作压力、温度、膜通量等数据。　　1.2.3膜的清洗本实验完成后，微滤膜和超滤膜需要清洗，以恢复膜的水通量。先用复合清洗剂清洗，然后用次氯酸钠漂洗

7、，最后用清水洗至中性。观察膜清洗前后的通量变化情况。　　2结果　　2.1微滤膜除杂的结果取物料5kg进行提取，得到提取液79kg。取一定量的提取液烘干，再用HPLC检测，白藜芦醇的纯度为8.7%。将提取液连续投入微滤膜装置中，出料71.4kg，用时5.88h，平均通量为60.70L·m-2·h-1。我们考察了微滤膜在进口压力为0.9MP，出口压力为0.7MP，操作温度控制在45℃左右，流速为4.0m/s的条件下，膜通量随时间的变化关系。见图2。　　由图2可以看出，开始运行时，膜的通量为124.2L·m-2·h-1，由于冷的料液

8、的加入，系统的温度有所降低，所以通量有所下降。随着运行时间的延长，温度恒定，由于滤饼的形成和膜的压实作用或膜被污染、膜孔被堵塞，造成水通量开始慢慢衰减。衰减到一定程度后，由于膜表面形成了稳定的凝胶层，通量趋于稳定。停机时通量为47.3L·m-2·h-1。　　微滤膜主要是截留脂