微波辅助提取黄芪多糖及含量测定论文

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1、微波辅助提取黄芪多糖及含量测定论文龚苏晓，高展，张铁军，杨俊红，邸倩倩【摘要】目的以微波从黄芪中提取多糖，并测定其含量。方法运用微波技术提取黄芪多糖，采用正交设计法优选苯酚-浓硫酸法显色条件，并测定其多糖含量。结果苯酚-浓硫酸法的最佳显色条件为5%苯酚溶液的用量为1ml.freell，水浴温度为100℃，水浴时间为15min；微波辅助提取黄芪多糖的最佳功率和时间为900ethodsThepolysaccharidesfromRadixAstragali.icroiningthecontentofp

2、olysaccharidesfromRadixAstragaliizedbyphenol-sulfuricacidmethod.ResultsTheoptimuml5%phenolsolutionltestingsolutionandmixed.Then5.0mlconcerntratedsulfuricacidbiencefor5min,.freelin,folloicroin.ConclusionThepolysaccharidescanbeobtainedfromRadixAstragali

3、bymicroethod;Microembranaceus(Fisch.)Bge．var．mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch)Bge．的干燥根，是重要的益气中药，其性甘、温，入肺、脾经，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌的功效［1］。黄芪的化学成分主要为多糖类、皂苷类、黄酮类及氨基酸类，另外还含有单糖、低聚糖、黏液质、苦味素、胆碱、甜菜碱、叶酸等成分［2］。黄芪多糖是黄芪补气的主要活性物质，大量体内外实验及临床研究表明

4、，黄芪多糖具有增强机体免疫功能、强心、降压、降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效［3］。近年来微波技术在天然产物成分提取领域得到了很大的发展和应用，主要是利用微波的热效应。微波加热具有穿透力强、选择性高、加热效率高、耗能少、成本低、操作简便等特点。微波辅助提取法提取产物的副产品少，易分离提取，且微波加热易使植物细胞壁破裂而有效提高提取率。目前黄芪多糖的微波辅助提取的有关报道较少，本文采用微波辅助水提醇析法提取黄芪多糖并用苯酚-浓硫酸法测定多糖含量，为以后黄芪多糖微波提取法的

5、开发利用提供依据。1仪器与材料UV-1601型可见紫外分光光度计（日本岛津）。AB-104型电子分析天平（梅特勒-托利多上海仪器有限公司生产）。冷冻干燥机（Edl，加入2.5倍量95%乙醇，低温静置过夜，离心，沉淀用150ml蒸馏水溶解后，加入等体积5%三氯乙酸-正丁醇液反复3次除蛋白，离心，上清液用2mol/LNaOH调pH=7.0，离心，上清液加入2.5倍量95%乙醇4℃静置48h，离心，沉淀用75ml蒸馏水溶解，离心，上清液用中空纤维膜超滤，截留分子量6000以上的药液，浓缩，冷冻干燥得黄芪

6、多糖纯品。2.2黄芪多糖的含量测定方法2.2.1精制黄芪多糖供试液的制备精密称定60℃干燥至恒重的黄芪多糖10mg，加少量蒸馏水，微热使其全部溶解后，定容至250ml量瓶中。2.2.25%苯酚试剂的配制取苯酚100g，加铝片0.1g和碳酸氢钠0.05g，蒸馏，收集182℃馏分，称取此馏分5g，加水定容至100ml，置棕色瓶中存冰箱备用。2.2.3苯酚-浓硫酸法最大吸收波长的确定精密吸取2ml精制黄芪多糖供试液，另精密吸取蒸馏水2ml作空白对照，分别加入5%苯酚溶液1ml，混合均匀后快速加入浓硫酸5

7、.0ml，即刻摇匀，室温静置5min，沸水浴加热20min，取出，流水冷至室温，用紫外可见分光光度计在190～900nm范围内扫描，确定最大吸收波长为490nm。2.2.4显色方法的优选设计5%苯酚溶液的用量（A）、浓硫酸的用量（B）、水浴的温度（C）、水浴的时间（D）4个因素，每个因素取3个水平，选用L9（34）正交表进行实验。每组实验均精密量取精制黄芪多糖供试液2.0ml，按正交表中方案显色，测定490nm波长处的吸收度，以吸收值为评价指标，另同时测定2h内吸收值的稳定性（每间隔30min测1

8、次），计算吸收值的RSD。见表1～2。表1因素水平（略）表2L9（34）正交实验结果（略）由表2可见，以吸收度为主要考察指标，极差R值大小显示各因素作用主次为DCAB，直观分析其最佳显色条件组合为A1B2C1D1。经过方差分析，以吸收度为主要考察指标，A，B，C，D因素对吸收值大小的影响均无显著意义。综合直观分析和方差分析结果，同时考虑操作的简便和条件的易控性，最终确定最佳显色条件为待测溶液2ml，加入5%苯酚溶液1ml，混匀，迅速滴加浓硫酸5ml，摇匀，室温放置5min，沸水浴加