天山岩黄芪根中多糖的提取及含量测定论文

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1、天山岩黄芪根中多糖的提取及含量测定论文海力茜陶尔大洪，孙莲，马合木提买买提明，何燕【关键词】天山岩黄芪根;,,多糖含量;,,分光光度法摘要：目的研究天山岩黄芪根中多糖的含量。方法采用分光光度法测定天山岩黄芪根中多糖的含量，以葡萄糖为对照品，以苯酚-浓硫酸为显色剂，在486nm处测定样品溶液的吸光度。结果标准曲线为A=51.654C+0.0372，r=0.9998.freelsemenoviiRegeletHerd.MethodsUsesmethodinspectrophotometrictodeterminethePolysac

2、charideintherootsofHedysarumsemenoviiRegeletHerd.Taketheglucoseastheparison,takethephenol-strongsulfuricacidasthedeveloper,λ=486nmdeterminationsamplesolutionattractstheluminosity.ResultsThestandardcurveethodissimple,sensitiveandaccurate.KeysemenoviiRegeletHerd;Polysa

3、ccharide;SX-spectrophotometry豆科岩黄芪属植物，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功能［1］。现代药理研究证明其有强心、利尿、降压、护肝、抗肾炎和提高免疫等作用。该属植物化学成分较复杂，其中具有生物活性的成分有多糖、木质素类、黄酮类化合物、香豆苯醚类、生物碱类、皂苷类、甾体类、氨基酸、微量元素等众多的生物活性物质［2~8］。天山岩黄芪HedysarumsemenoviiRegeletHerd为豆科(Leguminosea)岩黄芪属(HedysarumLinn.)植物，分布于新疆乌鲁木齐、伊犁、阿

4、勒泰、塔城等地区，经过调研和文献查新得知，对天山岩黄芪中多糖的提取及含量测定未见报道。因此，为了资源开发，我们首次对天山岩黄芪中多糖的提取及含量测定进行研究。多糖不仅是机体的重要组成部分，还具有提高机体免疫、抗菌、抗病毒、抗衰老、抗肿瘤、抗突变、降血脂、降血糖、防辐射以及改善动物生产性能等多种生物活性，同时由于它自身对细胞毒性极小，对正常细胞影响很小，因此多糖作为药物对于治疗多种免疫缺损疾病和自身免疫疾病有显著的效果。为此，我们采用可见分光光度法对天山岩黄芪根中多糖的含量进行了测定，为今后进一步地研究、开发该药用植物资源提供参考

5、。1材料与试剂1.1样品来源天山岩黄芪6月份采自新疆乌鲁木齐东山区，采后洗净，晾干，60℃烘干，粉碎后过60目筛备用。1.2仪器与试剂SX721分光光度计(上海第三分析仪器厂)，紫外分光光度仪，超声仪(SK8210HP)，水浴锅，酒精计，漏斗，分液漏斗，无水葡萄糖，苯酚分析纯，浓硫酸，95%乙醇，氯仿，正丁醇，活性碳。2方法与结果2.1多糖的提取与精制［9,10］天山岩黄芪根粉100g加水适量超声提取3次，30min/次，过滤，合并滤液，浓缩，加95%醇至含醇量为80%，静置过夜（4℃），过滤，分离出沉淀，加适量水溶解，加95%

6、醇至含醇量为80%，再静置过夜（4℃），过滤，分离出沉淀，加水溶解，除蛋白（氯仿∶正丁醇=4∶1），共除20次，加活性炭脱色，抽滤，加95%醇至含醇量为80%，静置过夜（4℃，过滤，分离出沉淀，冷冻干燥得多糖（0.5051g），密封备用。2.2溶液的制备2.2.1葡萄糖标准溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖0.1g，置100mg容量瓶中，加蒸馏水至刻度，再精密吸取10ml于另一容量瓶中，再加蒸馏水至刻度，摇匀备用，得0.1mg/ml的葡萄糖标准溶液。2.2.2苯酚溶液的制备称取苯酚100g，加锌片0.1g，NaHCO3

7、0.05g，蒸馏，收集182℃馏分，称取此馏分5g，加蒸馏水95ml，置棕色瓶中备用，得浓度为5%的苯酚溶液。2.2.3天山岩黄芪多糖液的制备精密称取干燥至恒重的天山岩黄芪多糖0.1g，置100mg容量瓶中，加蒸馏水至刻度，再精密吸取10ml于另一容量瓶中，再加蒸馏水至刻度，摇匀备用，得0.1mg/ml的天山岩黄芪多糖溶液。2.3最大吸收波长的选择分别配制0.1mg/ml的葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、醛糖溶液，分别精密吸取1ml于具塞试管中，分别加苯酚试液1ml，摇匀，迅速加浓硫酸5ml，振摇2min后，旋转于沸水浴中加热

8、15min，取出置冷水中冷却置室温，以苯酚-浓硫酸溶液为空白，用紫外分光光度仪在400~800nm范围内，扫描光谱图，得上述糖溶液的最大吸收分别为486，488，479，488，479nm。以同样的方法处理天山岩黄芪多糖样品溶液，在486nm处有最大吸收。2.4