天山岩黄芪根中多糖的提取及含量测定

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1、天山岩黄芪根中多糖的提取及含量测定作者：海力茜・陶尔大洪，孙莲，马合木提・买买提明，何燕【关键词】天山岩黄芪根;,,多糖含量;,,分光光度法　　摘要：目的研究天山岩黄芪根中多糖的含量。方法采用分光光度法测定天山岩黄芪根中多糖的含量，以葡萄糖为对照品，以苯酚-浓硫酸为显色剂，在486nm处测定样品溶液的吸光度。结果标准曲线为A=51.654C+0.0372，r=0.9998，RSD为1.28%，1.50%。结论该方法操作简单，灵敏度高。　　关键词：天山岩黄芪根;多糖含量;分光光度法　　　Abstract:ObjectiveTostudythe

2、quantityofPolysaccharideintherootsofHedysarumsemenoviiRegeletHerd.MethodsUsesmethodinspectrophotometrictodeterminethePolysaccharideintherootsofHedysarumsemenoviiRegeletHerd.Taketheglucoseastheparison,takethephenol-strongsulfuricacidasthedeveloper,λ=486nmdeterminationsamplesolutionattrac

3、tstheluminosity.ResultsThestandardcurveethodissimple,sensitiveandaccurate.　　KeysemenoviiRegeletHerd;Polysaccharide;SX-spectrophotometry　　豆科岩黄芪属植物，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功能［1］。现代药理研究证明其有强心、利尿、降压、护肝、抗肾炎和提高免疫等作用。该属植物化学成分较复杂，其中具有生物活性的成分有多糖、木质素类、黄酮类化合物、香豆苯醚类、生物碱类、皂苷类、甾体类、氨基酸、微量元素等众多的生物活性物质［2~8］

4、。天山岩黄芪HedysarumsemenoviiRegeletHerd为豆科(Leguminosea)岩黄芪属(HedysarumLinn.)植物，分布于新疆乌鲁木齐、伊犁、阿勒泰、塔城等地区，经过调研和　　2.2.3天山岩黄芪多糖液的制备精密称取干燥至恒重的天山岩黄芪多糖0.1g，置100mg容量瓶中，加蒸馏水至刻度，再精密吸取10ml于另一容量瓶中，再加蒸馏水至刻度，摇匀备用，得0.1mg/ml的天山岩黄芪多糖溶液。　　2.3最大吸收波长的选择分别配制0.1mg/ml的葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、醛糖溶液，分别精密吸取1ml于具塞试管中，分别加苯酚试液1ml

5、，摇匀，迅速加浓硫酸5ml，振摇2min后，旋转于沸水浴中加热15min，取出置冷水中冷却置室温，以苯酚-浓硫酸溶液为空白，用紫外分光光度仪在400~800nm范围内，扫描光谱图，得上述糖溶液的最大吸收分别为486，488，479，488，479nm。以同样的方法处理天山岩黄芪多糖样品溶液，在486nm处有最大吸收。　　2.4葡萄糖标准曲线的绘制分别精密吸取配制的0.1mg/ml的标准溶液0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml于具塞试管中，分别加蒸馏水1.0，0.8，0.6，0.4，0.2，0ml，分别给试管编号。分别加苯酚试液1ml，摇匀，迅速加浓硫酸5ml

6、，振摇2min后，旋转于沸水浴中加热15min，取出置冷水中冷却置室温，以苯酚-浓硫酸溶液为空白，于486nm处测吸光度,得回归方程A=51.654C+0.0372，r=0.9998（n=5），线性关系较好。　　2.5测定换算因子f精密称取已干燥至恒重的天山岩黄芪多糖4.048mg于100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，得多糖供试品溶液。精密吸取该溶液2ml，按“标准曲线”项下操作，测定486nm处的吸光度为2.9322，由回归方程计算供试品中葡萄糖的含量为0.056mg/ml，按下式计算f。f=g），由公式得f=3.614（n=3）。　　2.6样品中多糖的含

7、量测定精密称取样品1g于100ml容量瓶中，加水适量，80℃超声提取30min，加水至刻线，吸取2ml于具塞试管中，按“标准曲线”项下的操作，测定486nm处的吸光度。多糖（%）=CDf/g/ml）0.4ml，5份，天山岩黄芪多糖供试液（0.1mg/ml）0.4ml，5份，按“标准曲线”项下的操作，分别测定486nm处的吸光度，计算得RSD1=1.28%，RSD2=1.50%。　　3讨论　　通过对天山岩黄芪根中多糖的含量测定，可知其中多糖含量在5.23%～9.13%之间，可见用分光光度法测定天山岩黄芪根中多糖的含量是可行的。本方法稳定可靠，简单易行。