黄芪中黄芪多糖含量的测定

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1、2011年7月第l3卷第7期中国现代中药ModemChineseMedicine黄芪中黄芪多糖含量的测定△赵强强，韩丽，潘媛，王淼，杨明(1．成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室，四川成都6l1137；2．江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室，江西南昌330004)[摘要]目的：建立黄芪中黄芪多糖的含量测定方法。方法：采用比色法测定黄芪多糖的含量。结果：测定波长为489nm，葡萄糖在2．0—14．0la,g·mL线性关系良好，平均加样回收率为99．84％，RSD=3．71％(n=6)。结论：该方法简便、准确、重复性好，可用于黄芪中黄

2、芪多糖的含量测定。[关键词】黄芪多糖APS；苯酚一硫酸法；含量测定黄芪为常用中药，是豆科植物蒙古黄芪即得。Astragal~membranaceu~(Fisch．)Bge．vat．mongholicus2．2供试品溶液制备(Bge．)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus精密称取黄芪粗粉5．0g，加碱水50mL回流提(Fisch．)Bge．的干燥根，具有补气升阳，固表止取2次，每次1h，放冷加溶剂补足重量，过滤，精汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，密吸取滤液0．2mL，蒸馏水定容至100mL量瓶中，敛疮生肌

3、的功能⋯。黄芪中含有皂苷、黄酮、多糖、摇匀即得。氨基酸及微量元素等多种成分，其中黄芪多糖2．3测定方法(Astragaluspolysaccharides，APS)是黄芪主要活性精密吸取对照品、供试品溶液各2mL于具塞试成分之一。现代研究表明，APS具有促进免疫调管中，分别加入5％苯酚溶液1．0mL，摇匀，迅速节]、抗肿瘤]、抗病毒、抗辐射、抗衰老等多种加入5．0mL浓硫酸，振摇2min，置沸水浴中加热生物活性。本实验采用比色法对黄芪中多糖进行含15min，然后置冷水浴中冷却30min，随行以蒸馏量测定。水为空白对照，在489llm处测定吸光

4、度。2．4线性范围考察刮1材料与方法精密吸取葡萄糖对照品溶液0．2，0．4，0．6，1．1仪器0．8，1．0，1．2，1．4mL置于25mL容量瓶中，加蒸UV一1700紫外分光光度计(SHIMADZU馏水至刻度，摇匀。精密吸取上述各溶液2mL于具CORPORATION)，FA1104电子分析天平塞试管中，按照2．3测定方法分别加入5％苯酚溶(HANGPING)。液1．0mL，在489am处测定吸光度。以吸光度对浓1．2试药度进行线性回归，得回归方程A=69．679C十河北黄芪(四川I利民中药饮片有限责任公司)，0．0253，r=0．9962。

5、结果表明，葡萄糖在2．0～经成都中医药大学鉴定教研室裴瑾副教授鉴定为膜14．0Ixg·mL线性关系良好。荚黄芪；D一无水葡萄糖对照品(中国药品生物制品2．5精密度试验检定所，批号：110833—200503，供含量测定用)；精密吸取葡萄糖对照品溶液6份，依法显色后苯酚、浓硫酸等试剂均为分析纯。测定吸光度，计算RSD=1．62％，说明仪器精密度2方法与结果良好。2．1对照品溶液制备2．6显色后稳定性试验精密称取105℃干燥至恒重的D一无水葡萄糖取黄芪多糖样品溶液2mL，依法显色后放置，100mg，加水溶解并定溶于100mL量瓶中，摇匀分别在0，

6、15，30，45，60min测定吸光度，计算[基金项目]国家科技重大新药创制专项(2009ZX09103—307)[通讯作者]韩丽，E—mail：hanliyx@163．eom；杨明，E—mail：yangmingl6@126．eom·29·2011年7月第13卷第7期中国现代中药ModemChineseMedicineJu1．2011Vo1．13No．7RSD=2．26％，表明样品溶液显色后1h内稳定。具塞试管中，加5％苯酚试液1mL，混匀，迅速加入2．7重复性试验5mL浓硫酸，振摇2min，置沸水浴加热15min，取对同一批黄芪多糖样品进

7、行6次独立测定吸光出置冷水中冷却，随行以蒸馏水为空白，于UV一度，结果RSD=3．58％。1700上从400～600nm进行扫描，发现对照品和样品2．8加样回收率试验溶液在489nm均有最大吸收，故波长确定为489nm。取6份已知含量的黄芪粗粉2．5g，精密称定，3．3溶剂用量考察精密加入适量葡萄糖对照品，按正文拟定的方法制精密称取5．0g黄芪粗粉3份，分别加人碱水备供试品溶液，精密吸取供试品溶液2mL于具塞试40，5O，60mL回流提取1h，放冷加溶剂补足重管中，按2．3测定方法分别加入5％苯酚溶液量，过滤，精密吸取滤液0．2mL，蒸馏水定

8、容至1．0mL，在489nm处测定吸光度，计算结果见100mL量瓶中，精密吸取上述溶液各2mL于具塞表1。试管中。按2．3测定方法分别加入5％苯酚溶液1．0mL，在