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时间:2018-11-27
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1、生地黄多糖的微波提取及含量测定【摘要】目的从生地黄中提取多糖,并测定其含量。方法运用微波技术用水提醇沉法提取生地黄多糖,用酚-硫酸比色法测定多糖含量。结果测得生地黄多糖含量13.4186%,平均回收率为98.94%,RSD=1.34%(n=5)。结论运用微波技术从生地黄中提取出多糖,反应速度加快,实验结果令人满意。【关键词】微波技术;生地黄;多糖;提取;含量测定Microinationofpolysaccharideofrehmanniaglutinosaliboschroot【Abstract】Ob
2、jectiveTheextractionandcontentdeterminationspolysaccharidesofRehmanniaglutinosaLiboschroot.MethodsMicroanniaglutinosaLiboschrootinationetry.ResultsThepolysaccharidescontentofRehmanniaglutinosaLiboschrootis13.418%,recoveryrateis98.94%.ConclusionMicroanni
3、aglutinosaLiboschroothasbeenobtainedforthefirsttime.【Keyicroanniaglutinosaliboschroot;polysaccharide;extraction;contentdetermination生地黄为玄参科植物地黄RehmanniaglutinosaLibosch.的干燥块根,别名地髓、生地、干地黄等,地黄根茎主要含梓醇、地黄素、糖类、氨基酸、维生素A等成分。生地黄有败毒抗癌、清热凉血、养阴生津、医疮消肿、促进免疫、降压、抑制皮肤
4、癣菌等作用,可用于治疗传染性肝炎、功能性子宫出血等。微波技术的应用,近年来得到很大发展。微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。微波辐射(MCL-3型连续微波反应器(四川大学无线电系)。葡萄糖(AR)105℃干燥恒重,苯酚(AR),硫酸(AR)。生地黄:购买于石河子市药店,干燥品,粉碎待用。 2标准曲线的绘制2.1标准葡萄糖溶液的配制精确称取干燥恒重的葡萄糖25.2mg,加适量水溶解,转移至250ml容量瓶中,加水至刻度,摇匀,配成浓度为100.8μg/ml标准葡萄糖溶液备用。2.25%苯酚试
5、剂的配制取苯酚100g,加铝片0.1g和NaHCO30.05g,蒸馏,收集182℃馏份,称取7.5g,加水150ml溶解,置棕色瓶内放冰箱备用。2.3标准曲线绘制精确量取葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置干燥试管中,分别加水使成1.0ml,再分别加入5%苯酚溶液1.6ml,摇匀,然后加浓H2SO47.0ml,充分摇匀,室温放置25min,在400~600nm处测定其最大吸光度,同时做一空白。将上述实验数据做回归处理得回归方程:A=0.0691C+3×10-3R2
6、=0.9981r=0.99905。3生地黄多糖的提取及精制生地黄破碎后,称取30g,置500ml烧瓶中,将此烧瓶放入MCL-3型连续微波反应器中,依次用300ml石油醚(60~90℃)、乙醚和80%乙醇回流提取,调整功率560CL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提取20min,调整功率630g,水溶解后定容到100ml容量瓶中,摇匀,作为多糖储备液。精确量取多糖储备液0.20ml,加水至1.0ml,按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式计算换算因素:f=W/CD式中:W为多糖重量(μg),C
7、为多糖液中葡萄糖的重量(μg),D为多糖的稀释倍数。测得f=2.9115。5样品测定分别精确称取生地黄粉末0.200g、0.250g、0.203g,用80%乙醇浸泡过夜,再于MCL-3型连续微波反应器中用80%乙醇回流20min,调整功率560CL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提取20min,调整功率630CL-3型连续微波反应器中用80%乙醇回流20min,调整功率560CL-3型连续微波反应器中,继续以水回流提取20min,调整功率630Φ细胞等免疫细胞的功能,还能促进白介素、干扰素、肿瘤坏
8、死因子等细胞因子的产生。目前对多糖的研究方兴未艾,多糖的作用机制以及生物功能与结构的关系的研究不断深入,而且不断有新的多糖物质被发现。微波技术应用于植物细胞破壁,大大地加快了反应速度,有效地提高了收率。本实验从生地黄中提取多糖,并对其含量进行测定,反应时间缩短了12倍,多糖含量为13.4186%。生地黄多糖的提取方法、结构组成、药理作用及生物学功能有待进一步研究。【参考
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