益肾胶囊对狼疮性肾炎大鼠的治疗作用

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1、益肾胶囊对狼疮性肾炎大鼠的治疗作用吴喜利，张王刚，孙万森，乔成林，张晓强【摘要】目的探讨益肾胶囊对狼疮性肾炎(lupusnephritis,LN)大鼠的治疗作用及其作用机制。方法观察益肾胶囊组大鼠肾功能、24h尿蛋白(PRO/24h)的变化，分别采用双抗体夹心酶联免疫吸附法及放射免疫法检测血清Th1/Th2细胞因子(IL2、IL10、TGFβ1、IL6、TNFα)水平的变化和光镜观察肾脏病理形态学的改变。结果经过6周的治疗，益肾胶囊组及强的松组大鼠肾功能、24h尿蛋白及血清IL6、IL10、TGFβ1、TNFα水平与模型组比较均明显降低，IL2明显升高(P0.05或P0.0

2、1)，且益肾胶囊组大鼠肾功能、24h尿蛋白及血清IL6、TGFβ1、TNFα水平明显优于强的松组(P0.05或P0.01);益肾胶囊组及强的松组肾脏病理改变均有不同程度的改善，两组比较无明显差异。结论益肾胶囊可明显降低LN大鼠24h尿蛋白和改善肾功能，其作用机制可能与调节血清Th1/Th2细胞因子网络平衡及减轻肾脏病理损害有关。【关键词】益肾胶囊;狼疮性肾炎;肾功能;24h尿蛋白;Th1/Th2细胞因子　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatethetherapeuticeffectofYishenCapsuleonlupusnephritis(LN)inrats

3、anditsmechanism.MethodsiditronM型尿液自动分析仪进行检测。　　1.4.2肾功能的检测于第6周末大鼠处死前由股静脉采血，4℃3000r/min离心10min，取1mL血清做肾功能测定。　　1.4.3相关细胞因子的检测大鼠血清IL2、IL10、TGFβ1水平的变化采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)进行检测;血清IL6、TNFα采用放射免疫法测定。严格按照说明书操作，并由专门实验室工作人员进行检测。　　1.4.4肾脏病理形态学的观察于实验结束后将全部大鼠放血处死，取肾皮质用100mL/L甲醛固定，逐级酒精脱水、浸蜡、包埋，常规切片4μm，常规HE、PA

4、S染色，光镜下观察其病理学改变。　　1.5统计学处理所有数据均以(±s)表示，采用SPSS13.0软件包进行统计分析，采用t检验。P0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1益肾胶囊对LN大鼠肾功能及24h尿蛋白定量的影响模型组、益肾胶囊组及强的松组大鼠肾功能及24h尿蛋白与对照组比较，均有显著性差异(P0.05或P0.01);益肾胶囊组及强的松组大鼠肾功能及24h尿蛋白与模型组比较，均明显降低(P0.05或P0.01)，且益肾胶囊组明显优于强的松组(P0.05，表1)。表1益肾胶囊对LN大鼠肾功能及24h尿蛋白定量的影响　　2.2益肾胶囊对LN大鼠细胞因子水平的影响模型组、益肾胶囊组及

5、强的松组大鼠细胞因子水平与对照组比较，均有显著性差异(P0.05或P0.01);益肾胶囊组及强的松组大鼠血清IL6、IL10、TGFβ1、TNFα水平与模型组比较均明显降低，IL2明显升高(P0.05或P0.01)，且益肾胶囊组大鼠血清IL6、TGFβ1、TNFα水平明显优于强的松组(P0.05或P0.01，表2)。表2益肾胶囊对LN大鼠细胞因子水平的影响　　2.3肾脏的病理改变正常组：HE、PAS染色后光镜下见肾小球呈卵圆形。肾小球毛细血管壁内皮细胞、毛细血管基底膜、足细胞、系膜细胞、系膜基质、肾小球囊壁上皮细胞、囊壁基底膜、肾小球囊腔清晰;肾小管上皮细胞、基底膜、肾小管腔清

6、晰;模型组：肾小球增大并可见明显的毛细血管基底膜弥漫性增厚，毛细血管基底膜增厚呈双轨状，致毛细血管壁增厚，血管腔狭窄，部分毛细血管小叶边缘呈小结节状(毛细血管球呈分叶状);系膜细胞也可见增生，未见毛细血管内皮细胞及足细胞增生，也未见毛细血管壁坏死、血管腔内玻璃样血栓及炎细胞浸润，未见毛细血管壁塌陷，肾小囊内未见渗出物及新月体形成。肾小管：近端小管可见小管上皮变性、坏死，小管基底膜完好，近端小管及集合管内可见蛋白，细胞管型;益肾胶囊组及强的松组：以上各病变皆有不同程度的改善，两组比较无明显差异(图1，图2)。　　3讨论　　系统性红斑狼疮是一种异常免疫调节和自身抗体过量产生引起的以T、B细胞异常活

7、化和病理性自身抗体过量产生为特征的自身免疫性疾病。有研究发现LN患者及动物模型体内存在着明显的细胞因子网络失衡，并证实Th1/Th2型细胞因子网络失衡在LN的诱导发生和发展中起关键作用[78]。由于对不同的研究对象，所报道的细胞因子分泌异常的表现不尽一致。Th1细胞主要分泌IL2、IFNγ、TNFα等细胞因子，而Th2细胞主要产生IL4、IL6、IL10和TGFβ等细胞因子[9]。