三羊益心康胶囊对大鼠急性心肌缺血损伤的保护作用

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1、三羊益心康胶囊对大鼠急性心肌缺血损伤的保护作用作者：李伟李响王清陈颖丽付萍杨铭【摘要】　　目的观察三羊益心康胶囊的抗心肌缺血作用。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支法制备急性心肌梗死模型，利用二导联心电图、定量和半定量组织学法、血液生化法和电镜法观察三羊益心康胶囊对心肌缺血损伤的保护作用。结果三羊益心康胶囊可明显缩小心肌梗死面积（MIS）(P＜0.01)，减轻缺血心肌的损伤程度(P＜0.01)，改善缺血心肌的心电图变化(P＜0.01)，并能显著降低血清AST、LDH和CPK含量(P＜0.01)。结论三羊益心康胶囊对大鼠急性心肌缺血具有明显的保护

2、作用。【关键词】三羊益心康胶囊；麻醉大鼠；心肌缺血；保护作用　　三羊益心康胶囊是由吉林省中医药科学院自主研发的创新药物，主要由三七总皂苷及淫羊藿总黄酮组成，具有活血化瘀、温阳通痹的功效，临床上主要用于治疗冠心病心绞痛及心肌缺血性疾病。笔者曾报道“三羊益心康胶囊对麻醉犬血流动力学和心肌耗氧量的影响”及“三羊益心康胶囊对犬急性心肌缺血损伤保护作用的实验研究”〔1，2〕，为验证其确切的疗效及为临床应用提供更充分的科学依据，本实验采用另一种实验动物，即“结扎大鼠左冠状动脉前降支”8方法制备急性心肌缺血模型，探讨该药对急性心肌缺血的保护作用。　　1材料

3、与方法　　1.1药物　　三羊益心康胶囊，0.32g/粒，含药物0.125g/粒，由吉林省中医药科学院剂型室提供，批号：20000820。实验时取胶囊内容物用0.5%羧甲基纤维素钠（CMCNa）配制成3.00%、1.50%、0.75%浓度的混悬液备用。人口服用量1.92g/d，动物用剂量是人用量的22、11、5.5倍。阳性对照药正心泰胶囊由贵州奇凯制药有限责任公司生产(批号：20010101）。硝基四氮唑蓝（NBT），由上海灵锦精细化工有限公司提供(批号：298839)。天门冬氨酸氨基转换酶（AST）、肌酸磷酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（L

4、DH）测定试剂盒，由南京建成生物技术研究所提供(批号分别为：010121；090121；130071)。　　1.2动物　　Wistar大鼠90只，雄性，体重250～300g。由吉林省药品检验所动物室提供。合格证编号：101009。　　1.3仪器8　　CIMA400型图像分析仪（四川大学），BH2型OLYMPUS显微镜（日本），OLYMPUS全自动生化分析仪（日本）。　　1.4方法　　参照文献方法〔3〕，取雄性大鼠90只，随机等分为6组：对照组（假手术组），模型组（手术组），正心泰胶囊组（2g/kg），三羊益心康胶囊0.60、0.30、0

5、.15g/kg组。对照组和模型组均给予0.5%CMCNa，灌胃给药，每日1次，连续5d，体积均为20ml/kg。于实验第6天，手术前做二导联心电图1次，然后以乙醚浅麻醉大鼠，背位固定，胸部去毛，酒精消毒，沿左锁骨中线纵行切开皮肤约2cm，在胸左侧第五肋间钝性分离肌层，并沿胸骨左缘2mm处纵行开胸，暴露心脏，剪开心包，轻压胸壁，挤出心脏。在动脉圆锥与左心耳之间冠状静脉处，用细小弯针结扎左冠状动脉前降支（左心耳下缘1mm处，假手术组不结扎）造成急性心肌缺血，立即将心脏放回胸腔，迅速缝合胸壁。于术后1h再灌胃给药1次，术后24h做如下检查：（1）

6、测定二导联心电图，以结扎冠脉24h后心电图出现下列指征之一者即判定为心肌缺血阳性：T波高耸，J点升高0.1mV以上；T波低平（降低原T波高度的50%以上）、双向、倒置或心律不齐、心率减慢。T波高耸，J点升高0.18mV以上，T波低平（降低原T波高度的50%以上）、双向、倒置或心律不齐、心率减慢。（2）腹主动脉取血，采用OLYMPUS全自动生化分析仪测定心肌三酶（AST、CK、LDH）。（3）将动物处死，摘取心脏，将心脏横切，置入pH7.4的硝基四氮唑蓝溶液中，于37℃恒温水浴中染色3min，采用CIMA400型图像分析仪分别测量心肌梗死面积

7、（心肌梗死部分占心肌横断面面积的百分比）。（4）心肌损伤程度的半定量评价：心肌损伤程度按4级评定。0级：心肌未见明显坏死灶或仅有轻度间质水肿；1级：轻度心肌间质水肿，坏死心肌及变性心肌占总心肌面积1%～20%；2级：中度心肌间质水肿，坏死和变性心肌占总心肌面积21%～40%；3级：严重心肌间质水肿，坏死和变性心肌占总心肌面积41%以上。（5）心肌组织病理学检查。　　1.5统计学分析　　采用SPSS11.0统计软件，实验数据均以x±s表示，定量资料采用t检验，并进行单因素方差分析及组间均数差异的统计学分析，定性资料采用χ2检验方法分析。　　　　

8、2结果　　2.1三羊益心康胶囊对心肌梗死面积的影响8　　模型组动物心肌梗死面积明显增大，三羊益心康胶囊大、中、小剂量组和正心泰胶囊组均可明显减小心肌坏死面积，与模型