不同来源细胞因子诱导的杀伤细胞体外杀伤作用差异与其机制的探讨

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1、·不同来源细胞因子诱导的杀伤细胞体外杀伤作用差异及其机制的探讨不同来源细胞因子诱导的杀伤细胞体外杀伤作用差异及其机制的探讨专业：肿瘤学研究生：周敏仪指导教师：祁岩超教授中文摘要目的：比较患者自身来源的细胞因子诱导的杀伤（CIK）细胞与健康人来源的CIK细胞对肺癌细胞株A549杀伤作用的差异，初步探讨差异形成的机制，为临床应用健康人CIK细胞治疗恶性肿瘤提供理论依据。内容：1.健康人与恶性肿瘤患者来源的PBMC和CIK细胞对肺癌细胞A549体外杀伤作用比较；2.健康人与恶性肿瘤患者来源的PBMC和CIK细胞表面活性受体NKG2D表达水平的差异；3.健康人与恶性肿瘤患

2、者来源的PBMC和CIK细胞表型分析的比较；4.健康人与恶性肿瘤患者血浆中的NKG2D可溶性配体sMICA水平的差异。方法：1.健康人、恶性肿瘤患者各抽取足量外周静脉血，离心所得血浆用作sMICA水平检测。2.外周静脉血经密度梯度离心后获取单个核细胞，依次加入IFN-γ、CD3mAb、IL-2等细胞因子，诱导培养成CIK细胞。3.LDH细胞毒性检测试剂盒检测两种来源PBMC和CIK细胞在体外对肺癌细胞株A549的杀伤活性。4.应用流式细胞仪技术对两种来源PBMC和CIK细胞作表型分析，及检测PBMC····1····广州医学院硕士学位论文和CIK细胞NKG2D受体

3、的表达情况。结果：1.各组PBMC经细胞因子诱导前杀伤活性无显著性差异，经细胞因子诱导以后各组CIK细胞杀伤活性均较诱导前有提高，健康人组与晚期病人组间诱导后、前差值比较，健康人诱导后CIK细胞杀伤活性提高较晚期病人明显。2.细胞因子诱导前，健康人与各组患者间细胞表型与NKG2D表达未见明显差异，细胞因子诱导后，CD3+CD56+及NK细胞NKG2D比例在健康人中较晚期恶性肿瘤患者高，细胞因子诱导后与诱导前相比，健康人CD3+CD56+细胞比例及NKG2D在多个亚群细胞中升高较晚期恶性肿瘤患者明显。3.晚期恶性肿瘤患者血浆游离MICA水平较健康人高。结论：从患者和

4、健康人外周血提取的PBMC能通过细胞因子诱导成CIK细胞，两种来源的CIK细胞较其PBMC显示出更强大的体外抗肿瘤活性，健康人来源的CIK细胞的抗肿瘤活性又明显优于III期肿瘤患者来源的CIK细胞。健康人来源的CIK细胞的NKG2D受体表达率明显高于肿瘤患者来源的CIK细胞，而健康人血浆游离MICA浓度明显低于晚期恶性肿瘤患者。这可能是健康人来源CIK细胞的抗肿瘤活性优于肿瘤患者来源CIK细胞的可能机制之一。关键词：CIK细胞，杀伤作用，机制论文类型：应用基础····24····不同来源细胞因子诱导的杀伤细胞体外杀伤作用差异及其机制的探讨Studyonthecty

5、otyoxicityofcytokineinducedkillercellsfromdifferentsourcesinvitroandit’smechanismSubject：OncologyName：ZhouMin-yiSupervisor：Prof.QiYan-chaoABSTRACTObjective:TheaimofthisstudywastocomparethedifferenceofcytotoxicityagainsthumanlungcancercellA549betweenpatientCIKcellsandhealthydonorCIKcel

6、ls,toapproachthemechanismofthedifference,andtoprovethefeasibilityusinghealthydonorCIKcellsinclinical.Contents:1.TocomparethecytotoxicitybetweenPBMCandCIKcellsfromhealthydonorsorpatientsagainstA549invitro.2.TocomparetheexpressionofNKG2DbetweenPBMCandCIKcellsfromhealthydonorsorpatients.

7、3.TocomparethephenotypebetweenPBMCandCIKcellsfromhealthydonorsorpatients.4.TocomparetheplasmasMICAbetweenhealthydonorsandpatients.Methods:1.Peripheralbloodwascollectedfrommalignantdiseasepatientsorhealthydonors····3····广州医学院硕士学位论文respectively,plasmawerecollectedaftercentrifugeforsMICA

8、assay