神经肽Y在颈性眩晕中作用机制的实验分析

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1、-神经肽Y在颈性眩晕中作用机制的实验研究足导致颈性眩晕并不是单纯椎动脉受压所致，多种因素参与导致的颈部血管收缩舒张功能障碍有可能是导致眩晕症状的主要因素，神经肽Y(NeuropeptideY，NPY)是交感神经系统释放的主要神经递质之一，它是属胰多肽家族的一种肽类激素，它广泛分布于中枢及外周神经组织的交感神经元中，在中枢神经系统，神经肽Y的作用为促进食欲[8]，抗焦虑和抑制生殖功能，降低电生理活性及抑制异常脑电生理传导异常，交感神经兴奋性降低，导致血压下降，心率减慢[9]，并使新陈代谢变得缓慢[10]。在外周，其中在人颈上神经节中超过75%的交感神经节细胞中含有神经肤Y[

2、11]。神经肽Y与去甲肾上腺素(NE)共同存在于同一囊泡，交感神经受激惹后一起释放，对糖皮质激素和儿茶酚胺类协同作用，使血管收缩血压增高以增强机体对应激的反应敏感性。大量实验证实神经肽Y是一种高效的缩血管物质，它既可以直接作用于血管平滑肌细胞使血管收缩,又可以加强其它缩血管物质的收缩血管作用。NPY与去甲肾上腺素(noradrenaline，NA)共存于同一囊泡中，当交感神经元兴奋后通过直接分泌和可调节性分泌通路两种方式，使NPY和NA共同释放分泌，起神经递质和(或)神经调质作用，共同调节血管运动。交感神经受到激惹，不但可以直接分泌NPY和NA引起动脉的反射性痉挛，还通过

3、可调节性分泌通路释放分泌神经肽Y，使其缓慢持久地发生效应。二者作用相互协同，去甲肾上腺素维持动脉血压，短暂增加血管收缩，神经肽Y除了增加NA等收缩血管效应外，还能抑制某些如：乙酰胆碱、ATP、P物质等介质的舒张血管作用，导致血管收缩时间延长[12]；并通过血管平滑肌细胞(VSMC)增殖使血管重塑[13]，诱导单核细胞和(或)巨噬细胞浸润，局部血小板聚集，促使血管内膜增生，促进动脉粥样硬化和狭窄，导致缺血加重[14]。目前研究发现神经肽Y它与心血管疾病，糖尿病性视网膜病变，动脉粥样硬化，肥胖症，高脂血症等的发病率上升有关，故越来越受到人们的重视[15]。而关于NPY在颈部的

4、研究多用来判断颈椎局部交感神经的分布[16]，以及确定NPY及其受体是神经病理性疼痛发病过程中的关键分子，并建议利用NPY受体拮抗剂对疼痛进行基因治疗[17]等，而关于神经肽Y参与椎动脉狭窄供血不足导致颈性眩晕的实验研究及有关文献较少。本研究拟采用高坤、高延征[18]等方法，通过行颈前路手术损伤C4/5颈长肌、前纵韧带和椎间盘结构，行颈后路手术结扎并切断颈椎C4/5节段颈后肌群，同时切断C4/5节段的棘上及棘间韧带，该方法使实验动物颈椎稳定性结构遭到破坏，且长期位于颈椎反弓2---前言低头姿态，促使颈椎结构失稳，局部发生退行性改变，而保持屈曲低头位则使颈部交感神经节处于兴

5、奋状态。在长期而缓慢的压力环境中，使血管活性因子NPY释放增加，最终形成颈椎不稳及慢性椎动脉狭窄供血不全导致的颈性眩晕动物模型。通过结合影像学、血流动力学及病理形态学等检查，同时在不同时间段动态监测NPY这一个血管活性物质的变化情况，综合评估血管活性因子NPY对颈性眩晕发病原因中的作用及探讨其在病理生理变化过程中的机制。本研究期望能够通过NPY这一血管活性因子在制作颈性眩晕动物模型过程中的具体变化规律，分析神经肽Y与颈性眩晕的关系，进一步研究并阐明血管活性物质参与导致颈性眩晕的病因学说，为该病的理论观点及实验研究提供相关依据，并为临床提供一个具有早期诊断治疗价值的指标，提

6、高颈性眩晕的诊断治疗水平。3---材料与方法材料与方法1.材料1.1实验动物实验用清洁级日本大耳白兔30只，购于河南省康达实验动物有限公司(原河南省实验动物生产供应中心)，在河南中医学院实验动物中心饲养，室温25℃。雌雄各半，平均体重1.4-2.1kg，饲养超过一周，观察家兔一般情况良好后，开始进行实验。随机分为3组，手术组(A组)，假手术组(B组)，空白对照组(C组)，每组各10只。1.2主要实验试剂20%氨基甲酸乙酯(乌拉坦)兔(Rabbit)神经肽(NPY)ELISA检测试剂盒(北京华英生物技术研究所提供)0.9%生理盐水蒸馏水10﹪福尔马林苏木精染液1.3主要实验

7、仪器美国产Beckman22R低温离心机美国产Bio-Rad680酶标仪瑞士产MettlerToledo电子天平上海产其林贝尔GL-3250A磁力搅拌器海门产其林贝尔QL-901漩涡混合器上海产GElogic7彩色多普勒仪北京产GEDefinium6000DR(直接数字化X射线摄影系统)日本OLYMPUSBX41型号光学显微镜5---神经肽Y在颈性眩晕中作用机制的实验研究上海产PowerSign530显微图像采集系统德国产SLEECUT6062型号石蜡切片机加样器：5µL、10µL、50µL、100µL、200µL、500µL