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1、临床常用免疫学检测与临床意义 【摘要】目前临床多以血清免疫学乙型肝炎病毒标志作为诊断乙型肝炎的主要依据之一。但随着PCR方法对血清中HBVDNA检测及采用免疫组化法对肝组织HBsAg、HBcAg检测的开展,发现血清HBVM阴性并不能排除HBV感染的存在。为此,对近年来就诊病例进行了研究,目的在于了解血清中HBVM阴性而有病毒复制者的临床意义。 【关键词】乙型病毒性肝炎;肝硬化;病毒携带者 临床免疫学检验项目很多,本文从免疫血清学检验标志阴性的乙型肝炎病毒携带者及慢性肝病患者的临床意义。我国是乙型病毒性肝炎的高发区,而且他们对急、慢性乙型肝炎患者的预后判断尚有不足之处。而HBV-DN
2、A水平真实反映HBV所感染的数量,为临床诊断和治疗及了解病情提供更重要的依据。 1对象与方法 对有疑为病毒性肝炎者实施血清学检测,采用上海科华生物工程股份有限公司酶联免疫法试剂盒。以日立7060检测仪检测,经两次血清学检测后确定HBVM全阴者。ALT测定试剂购自上海科华,采用日立7060检测,ALT正常值<40U/L。血清HBVDNA定量及HCVRNA检测分别采用PCR-ELISA法HBVQPCR及HCVPCR-分子杂交试剂盒。HBVDNA检测系统采用UNG/dVTP防污染措施,检测结果特异性强。 1.1酶联免疫试验20世纪70年代盛树力等开始将酶联免疫吸附试验方法介绍至国内,其
3、发展迅速,很快覆盖了医学检验的诸多领域。双抗体夹心法是其中的代表。单克隆抗体的加入增加了检测的特异性;用辣根过氧化物酶标记链亲合素与生物素标记的一抗联用构成了高特异性、高敏感度的放大系统,在临床检测中构成了一道独特的风景线。乙肝血清标志物的检测结果可能出现多个模式,乙肝五项不同的结果模式具有不同的意义。最常见的模式及其临床意义在许多文章、书籍中有详细的阐述,这里就不再赘述。值得一提的是近年发现的因乙肝病毒抗原变异而出现的一些少见模式也能提供重要的病毒信息。 1.2免疫血清学检查病毒性肝炎抗体临床意义分析乙型肝炎病毒抗体机体感染乙型肝炎病毒后可以发生相应免疫反应,形成相应的抗原抗体。主要有乙
4、型肝炎表面抗原、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗体、乙型肝炎核心抗原、乙型肝炎核心抗体。由于乙型肝炎核心抗原在血清中不易检出,故临床除核心抗原外,另外5项指标称乙型肝炎二对半。重点说明传统乙肝血清标志物的临床意义1•各个单项的临床意义:①HBsAg阳性可见于急性乙肝的潜伏期、急性期及慢性乙肝病毒感染状态;②抗-HBs是保护性抗体,表明患者曾感染过乙肝病毒或注射过乙肝疫苗。HBsAg突变乙肝病毒可发生免疫逃逸,抗原检测时出现假阴性结果或抗原、(针对原抗原决定簇)抗体并存;③HBeAg其阳性和滴度与乙肝病毒的复制情况及传染性的强弱成正相关。但当与其表达有关的前C区或(和)
5、C区发生启动子/终止密码突变,可表现为HBeAg阴性,这些乙肝病毒变异株与重肝发生或慢性肝炎恶化有关。单一HBeAg作为判断乙肝病毒复制活跃与否的指标是不够的;④抗-HBe:出现于急性乙肝恢复期,持续时间较长。慢性乙型肝炎时,HbeAg、抗-HBe转换表示复制减少,传染性变弱。但抗HBe阳性不等于无复制和良好预后,抗-HBe阳性慢性乙肝并不鲜见;⑤总抗-HBc:见于急性期,恢复后可持续数月至数年,滴度渐降;慢性乙型肝炎组患者,抗-HBc持续阳性。抗-HBcIgM、抗-HBcIgG:前者高滴度,后者阴性或低滴度,有助于急性乙肝的诊断。抗-HBcIgM下降速度、滴度、持续情况与患者病情转归、预后
6、有关。 2结果 传统乙肝血清标志物是目前我国用于乙肝检测与筛查最普及的指标。前S1抗原作为一种新的检测指标,较HBeAg更准确的反映了乙肝病毒的复制情况,是传统乙肝血清学标志物有益的必要的补充。HBV-DNA是衡量乙肝病毒复制最灵敏、最精确的证据。在临床上应将这些指标综合分析才能真正了解患者的病情指导治疗。 3讨论 本研究由于条件所限,未能作序列分析,故此类变异株是否在流行上会作为特殊病毒株感染他人未能明确。然而此类患者的远期预后却不能不引起临床医师高度重视,目前尚不能除外此类血清HBVM阴性者引起某些原因不明的肝硬化或原发性肝细胞癌的可能性。 参考文献 [1]赵建平,赵丽莉.乙
7、肝病毒学清学指标与组织病毒存在状况的关系.临床肝胆杂志,2000,16(4):224. [2]刘锡光.病毒性肝炎实验诊断学.人民卫生出版社,1999. [3]闵福援,孙桂珍,王健,等.前S1蛋白在乙型肝炎诊断及预后判断中的作用.中华检验医学杂志,2004,4:224-226.