低氧环境下转染血管内皮生长因子165对人胃癌细胞体外侵袭

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1、低氧环境下转染血管内皮生长因子165对人胃癌细胞体外侵袭转移的影响袁翠林作者简介：袁翠林，（1985-），女，硕士研究生，E-mail:yclfiona@126.com;欧希龙，（1965-），男，副教授，E-mail:yclfiona@126.com.欧希龙1,2(1.东南大学医学院，江苏省南京市，210009；2.东南大学附属中大医院消化科，江苏省南京市，210009)摘要：目的探讨低氧环境下血管内皮生长因子165(VEGF-165)对人胃癌细胞侵袭转移的影响及可能的机制。方法利用腺病毒作为载体将已

2、构建成功含VEGF-165基因的重组腺病毒(Ad-VEGF-165)瞬时转染人胃癌细胞株BGC-823，利用低氧诱导剂氯化钴进行低氧干预低氧转染(D)组，以单纯低氧干预(B)组及单纯转染(C)组作为对照，以未转染未行低氧干预的正常细胞作为空白对照(A)组，应用Transwell小室分析低氧环境下VEGF165转染前后胃癌细胞迁移能力的变化；利用半定量RT-PCR方法对4组细胞中uPA、MMP-2的mRNA表达水平进行分析。结果D组胃癌细胞的侵袭能力及uPA、MMP-2的mRNA表达明显高于A、B、C组(

3、P<0·05)。结论低氧环境下转染VEGF-165能够明显提高人胃癌细胞BGC-823的侵袭能力及细胞中uPA、MMP-2的mRNA的表达，表明低氧环境下VEGF-165促进肿瘤细胞的侵袭转移。关键词：胃癌；VEGF-165；侵袭能力；uPA；氯化钴EffectsofVEGF165ontheinvasionandmetastasisofhumangastriccancercellsinvitroYuanCuilin1,OuXilong1,2（1.SoutheastUniversity,Nanjing21

4、0009,JiangsuProvinceCHINA；2.DepartmentofGastroenterology,ZhongdaHospitalAffiliatedtoClinicalMedicalCollegeofSoutheastUniversity,Nanjing210009,JiangsuProvince,China）Abstract：Objective　ToevaluatetheeffectsofVEGF165ontheinvasionandmetastasisofhumangastricca

5、ncercellslineBGC-823underhypoxia.Methods　TheBGC-823cellsweredividedinto4groupsoftransfectedwithAd-VEGF165transientlyandinducedbyhypoxiamimiccobaltchloride(groupD),inducedbyhypoxiamimiccobaltchloridealone(groupB),transfectedwithAd-VEGF165alone(groupC),and

6、blankcontrol(groupA).AtranswellcellculturechamberassayinvitrowasusedtodetectchangesinmigrationcapacityofBGC-823cells.TheexpressionsofuPAandMMP-2mRNAweredetectedbyRT-PCR.Results　TheBGC-823cellsweretransfectedsuccessfully.ThemRNAexpressionsofuPAandMMP-2ing

7、roupDweresignificantlyhigherthanthoseingroupsofA,BandC(P<0·05).Conclusion　HypoxiaandtransfectionofVEGF165intohumangastriccancercelllineBGC-823cansignificantlyincreasetheexpressionofuPA,andMMP-2indicatingthatVEGF165underhypoxiapromotestheinvasionandmetast

8、asisofthetumorcells.Keywords：Gastriccancer；VEGF165；transfection；uPA；Cobaltchloride低氧环境可以促进胃癌肿瘤血管生成、促进肿瘤的侵袭和转移。是恶性肿瘤微环境的特征之一。血管生长是一个过程，由于对蛋白质的信号级联需要一些处理时间。通过诱发组织缺氧，激活缺氧诱导因子1α（HIF-1a）引起的途径导致许多基因的转录激活，包括血管内皮生长因子[1]。血管内皮生长因子(v