低氧下血管内皮细胞生长因子转染人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞的分化

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1、低氧下血管内皮细胞生长因子转染人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞的分化中国组织工程研究第21卷第9期2017–03–28出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchMarch28,2017Vol.21,No.9www.CRTER.org低氧下血管内皮细胞生长因子转染人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞的分化陕西省西安市713000)·研究原著·胡继宏1，贾佳2，路娟1，王秋萍1，赵静苗1，靳利梅1，李金娟1(1甘肃中医药大学，甘肃省兰州市730000；2西安海棠职业学院，引用本文：胡继宏，贾佳，路娟，王秋萍，赵静

2、苗，靳利梅，李金娟.低氧下血管内皮细胞生长因子转染人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞的分化[J].中国组织工程研究，2017，21(9):1352-1356.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.09.008ORCID:0000-0003-0391-963X(胡继宏)文章快速阅读：文题释义：低氧环境下骨髓间充质干细胞的特性：人骨髓间充质干细胞来源于骨髓，骨髓内的氧浓度在3%-7%之间，属于生理性低氧环境，人骨髓间充质干细胞的自我更新及多向分化能力与这种低氧环境密不可分，且有研究认为低氧环境中的人骨髓间充质干细胞有较好的耐受

3、性，相对稳定的低氧浓度能增加人骨髓间充质干细胞的相关因子表达量，更能够促使其向神经元样细胞分化。如何在低氧环境中采用有效手段促使人骨髓间充质干细胞的定向分化，是目前众多学者研究的重点。血管内皮细胞生长因子促骨髓间充质干细胞内皮化：通过RT-PCR及Westernblotting检测均发现，转染血管内皮细胞生长因子的骨髓间充质干细胞经诱导后，内皮素mRNA及蛋白表达明显升高，前列环素mRNA和蛋白表达下降，与正常血管内皮细胞分泌此两种因子的情况一致，进一步说明血管内皮细胞生长因子具有促使人骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化的能力。摘要背景：已有研究发现血

4、管内皮细胞生长因子可诱导骨髓间充质干细胞分化为内皮细胞，但在机体损伤的低氧环境下，血管内皮细胞生长因子基因是否可促进骨髓间充质干细胞定向诱导分化为血管内皮样细胞？目的：观察低氧环境下，经血管内皮细胞生长因子诱导的人骨髓间充质干细胞是否能够向血管内皮样细胞分化。方法：在含体积分数5%O2环境中，将第3代人骨髓间充质干细胞分组培养，对照组以常规培养基培养，实验组以含血管内皮细胞生长因子载体的腺病毒诱导液培养。培养2周后，进行形态学观察及表面相关分子检测，ELISA检测细胞培养上清液中血管内皮细胞生长因子及内皮型一氧化氮合成酶因子水平，RT-PCR和West

5、ernblotting检测内皮素和前列环素蛋白表达。结果与结论：①对照组细胞数量较多，呈拥挤状，排列不齐，呈纤维样生长；实验组细胞多呈三角形或多边形，集落状生长，呈铺路石子样；②对照组CD31为阴性表达，CD105为阳性表达且阳性率为99.7%，表明细胞仍呈现骨髓间充质干细胞的表型。实验组CD31表达明显上升，阳性率为30.33%；CD105表达下降，阳性率为58.11%，呈现典型的内皮细胞表型；③与对照组比较，实验组内皮素、血管内皮细胞生长因子及内皮型一氧化氮合成酶表达增高(P<0.01)，前列环素表达降低(P<0.01)；④结果表明在低

6、氧环境下，血管内皮细胞生长因子具有促使人骨髓间充质干细胞向血管内皮样细胞分化的能力。关键词：干细胞；骨髓干细胞；血管内皮细胞生长因子；骨髓间充质干细胞；血管内皮细胞；内皮型一氧化氮合成酶；内皮素；前列环素主题词：干细胞；间质干细胞；血管内皮生长因子类；内皮细胞；组织工程基金资助：甘肃省高校基本科研业务费项目(2012-3)缩略语：骨髓间充质干细胞：bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells，BMSCs；血管内皮细胞生长因子：vascularendothelialgrowthfactor，VEGF1352P.O.Box1

7、0002,Shenyang胡继宏，女，1976年生，汉族，博士，副教授，硕士生导师，主要从事心血管病防治研究。中图分类号:R394.2文献标识码:A文章编号:2095-4344(2017)09-01352-05稿件接受：2016-11-23HuJi-hong,M.D.,Associateprofessor,Master’ssupervisor,GansuUniversityofChineseMedicine,Lanzhou730000,GansuProvince,Chinawww.CRTER.org110180CRTER.orgVascularendo

8、thelialgrowthfactortransfectioninduceshumanbone