豆豉中大豆异黄酮及苷元降血糖活性及其机理的研究论文

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1、豆豉中大豆异黄酮及苷元降血糖活性及其机理的研究论文郭瑞华霍文刘正猛吴少杰王和平王海龙梁彦云【摘要】目的研究永川豆豉中大豆异黄酮及苷元的降血糖活性及其降血糖机制。方法永川豆豉粉碎，脱脂，然后用65%的乙醇浸泡，超声提取两次。所得提取液离心后旋转蒸发，用无水乙醇提取可得大豆异黄酮的粗提品。正丁醇饱和的水溶液除糖及色素等。然后经硅胶分离出大豆黄素和染料木素。河南鼠注射四氧嘧啶造成高血糖模型，连续7d灌胃给予所提取的大豆异黄酮及苷元。用葡萄糖氧化酶法测定血糖水平。结果永川豆豉中的大豆异黄酮及苷元能显著地

2、降低四氧嘧啶糖尿病模型鼠血糖水平，缓解糖尿病症状；大豆异黄酮和染料木素都能抑制葡萄糖的活性，尤以染料木素最为明显。结论豆豉中的大豆异黄酮可以明显地降低小鼠的高血糖.freelechanismofYongchuanfermentedsoybeanisoflavoneglyconetoreducethelevelofbloodsugar.MethodsAftergroundandremovedofoil,Yongchuanfermentedsoybeanovedofsugarandpigmentat

3、ographytoyielddadezeinandgenestein.Highbloodsugarmodelice.ThemiceeasuredbyGOD(glucoseoxidase)method.ResultsThesoyaisoflavoneglyconefromYongchuanfermentedsoybeancanremarkablereducethelevelofbloodsugarcausedbyalloxan,relaxingthesymptomsofdiabetes.Bothc

4、rudeextractofsoyaisoflavonesfromYongchuanfermentedsoybeanandgenesteinhadtheabilitytoinhibittheactivityofα-glucosidase,orepotent.ConclusionThesoyaisoflavonesandisoflavoneglyconefromYongchuanfermentedsoybeancanobviouslyreducethehyperglycemiaofalloxanmi

5、ceandthemainponentofreducingbloodsugarmayduetogenestein.Keya公司），大豆黄素（纯度95%，sigma公司），α葡萄糖苷酶（EC3.2.1.20，sigma公司），还原型谷胱甘肽（中科院上海生物化学研究所），PNPG(4硝基酚αD吡喃葡萄糖苷，sigma公司)，四氧嘧啶(Alloxan，Sigma公司)，葡萄糖试剂盒GLU（氧化酶法，液体，北京北化康泰临床试剂有限公司），肝素钠(天津生物化学制药厂)，其它试剂均为国产分析纯。2

6、方法2.1大豆异黄酮及苷元的提取采用醇提法和超声连续提取法［10］除去糖类和色素，得黄白色固体粉末，为异黄酮粗品。2.2染料木素和大豆黄素的分离将大豆异黄酮溶解于适量甲醇中，在活化好的硅胶GF254板上点样，以三氯甲烷：氯仿（10∶1）展开剂，定距展开。风干后，在ZF1三用紫外分析仪于254nm下照射，呈深紫红色斑点，且有两个斑点的Rf值与染料木素和大豆黄素标准品的Rf值（0.65，0.62）基本一致。在上述条件下，将大豆异黄酮与硅胶板上点样展开，收集Rf值与染料木素和大豆黄素相同的斑点，分

7、别置于两个不同的烧杯中，捣碎成粉末，用无水乙醇溶解，超声条件下提取30min，以4000r/min的转速离心5min，离心液旋转蒸发后可分别得染料木素和大豆黄素的晶体，与硅胶板上点样展开，其Rf值与染料木素和大豆黄素基本一致。将染料木素和大豆黄素保存，备用。2.3小鼠的降糖活性研究2.3.1实验性四氧嘧啶糖尿病动物模型的建立取雄性昆明种小鼠（体重18～22g），随机分为3组。每组10只，分别为正常对照组（Normal），高血糖模型组(Control)，高血糖模型灌胃组(Alloxan)。高血糖模

8、型组及高血糖模型灌胃组禁食10h。按200ml/kg的用量，腹腔注射四氧嘧啶。72h后人工断尾取血，选取空腹血糖值大于11.0mol/l的小鼠作为高血糖模型小鼠。2.3.2大豆异黄酮及苷元对四氧嘧啶糖尿病小鼠的治疗实验高血糖模型灌胃组按100mg·kg-1·d-1用量经口服灌胃给药7d。正常组和高血糖模型组每天注射等剂量的生理盐水。每日观察小鼠皮毛、活动等生长情况。末次给药后，所有动物禁食10h，按试剂盒方法测定血糖值。处死小鼠取肾做病理切片（HE染色），显微镜下观察，结果如图1，2。表1豆豉中