骆驼刺中黄酮类化合物的提取工艺研究

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1、骆驼刺中黄酮类化合物的提取工艺研究苏小川，黄昀，赵永昕，阿吉艾克拜尔·艾萨【摘要】　　目的筛选出提取骆驼刺中黄酮类化合物的最佳工艺。方法采用正交实验，考察乙醇浓度（A）、料液比（B）、提取时间（C）、提取次数（D）4个因素对骆驼刺（Alhagisparsifoliashap.）中总黄酮提取率的影响，用紫外分光光度计法进行检测。结果最佳提取工艺为：溶剂为40%乙醇，料液比1∶20，提取时间1.5h，提取3次。结论该工艺条件提取率高且稳定。【关键词】骆驼刺总黄酮正交实验芦丁　　Abstract：ObjectiveToselectanoptimalextr

2、actionprocessofthetotalflavonoidsfromAlhagisparsifoliaShap..MethodsTheorthogonaldesigne（C）andextractiontimes（D）onthecontentofflavonesinAlhgisparsifouashap..ResultsTheoptimumextractionconditiones.ConclusionTheoptimalextractionprocessofthetotalflavonoidsinAlhagisparsifoliaShap.is

3、stable.　　Keyinosae）骆驼刺属植物〔1〕，广泛分布于我国的内蒙古、甘肃、青海和新疆等地，为维吾尔医常用药材，在民间有悠久的应用历史，用于治疗风湿和癌症。现代药理学研究证明骆驼刺乙醇提取物有抑制移植性肝肿瘤细胞生长的作用〔2〕。　　黄酮类化合物广泛存在于生物体内，具有多方面的生理活性，例如心血管系统活性、抗菌及抗病毒活性、抗肿瘤活性、抗氧化、抗炎镇痛、保肝等〔3〕。我们在研究骆驼刺AlhagisparsifoliaShap.中的化学成分时发现骆驼刺中含有大量的黄酮类化合物，但骆驼刺中黄酮类化合物的提取工艺尚无文献报道。本实验以植物中总黄

4、酮的含量为考察指标，采用回流提取法，用正交实验优选提取条件，用分光光度法对骆驼刺中的总黄酮含量进行了测定。　　1材料与仪器　　1.1原料及试剂骆驼刺采自新疆托克逊，经中国科学院新疆生态与地理研究所生物标本馆沈观冕研究员鉴定为骆驼刺Alhagisparsifoliashap.全草。取干燥的骆驼刺粉碎，过6目筛备用。NaNO2，Al(NO3)3，NaOH，无水乙醇均为分析纯。芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所。　　1.2仪器DZTg，置50ml容量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀。精密量取20ml，置50ml容量瓶中，加水至刻

5、度，摇匀，即得（1ml中含无水芦丁0.2mg）。　　标准曲线的制备：精密称取对照品溶液1，2，3，4，5，6ml分别置25ml容量瓶中，各加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6min，加氢氧化钠溶液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15min，以相应的试剂为空白，用紫外分光光度法，在500nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，建立标准曲线，回归方程为Y=0.01163X-0.01214，其线性范围为8～48mg/L，相关系数r=0.9995。见表1。表1标准曲线数据（略）　

6、　2.2测定波长的选择取标准溶液1ml，按“2.1”项下操作，置于UV-2550型紫外分光光度计上在200～600nm范围进行扫描，总黄酮反应产物在500nm波长处有最大吸收，与《中国药典》〔4〕（2005版）一致。因此，选择500nm为测定波长。　　2.3骆驼刺中黄酮提取率的测定准确称取骆驼刺粗粉5g，不同条件下回流提取后过滤定容至250ml，取6ml滤液离心（6000r/min×4min）后取2ml滤液定容至25ml，同上述方法进行测定。　　总黄酮提取率（mg/g）=稀释倍数×C×V/5　　3结果与讨论　　3.1乙醇浓度对提取率的影响称取骆驼刺干

7、粉5g，在料液比为1∶15，提取时间为1h，提取2次，保持提取液微沸的条件下，不同乙醇浓度对骆驼刺总黄酮提取率的影响见图1。　　由图1可知，乙醇浓度在30%时，总黄酮提取率达到最大值，之后随着乙醇浓度的增大总黄酮的提取率逐渐下降。　　3.2料液比对提取率的影响　　称取骆驼刺干粉5g，在乙醇浓度为70%，提取时间为1h，提取2次，保持提取液微沸的条件下，不同料液比对骆驼刺总黄酮提取率的影响见图2。　　由图2可知，随着料液比的变化，浸取液比例越大，骆驼刺中总黄酮的得率也越大，当料液比达到1∶10以后，黄酮的提取率曲线增长变得平缓，变化不明显。　　3.3时

8、间对提取率的影响　　称取骆驼刺干粉5g，在乙醇浓度为70%，料液比为1∶15，提取2次，保持提取液微沸的条件