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1、榕树叶黄酮类的提取工艺研究【】黄酮类化合物是一类活性物质，并具有特殊的保健及疗效功能。本文采用乙醇提取法提取榕树叶中总黄酮，通过正交试验设计确定最佳提取条件。结果表明，四种因素对提取率的影响分别是：乙醇浓度>料液比>提取时间>提取温度，乙醇提取法最佳工艺为：70％乙醇，料液比为l：30（g/mL），提取温度60℃，提取1h。 【关键词】榕树叶；总黄酮；乙醇提取；正交设计 1前言 近年来,世界上掀起了植物药开发的热潮,植物药以其天然低毒的特点倍受青睐,而黄酮类化合物以其广谱的药理作用引人瞩目。随着研究方法和技术的不断提高,又发现了黄酮许多新的种类和生理作用，除了从
2、药材中提取分离黄酮类化合物外,也需对其他一些未开发的药源进行研究。我国榕树分布较广，为了充分利用榕树叶资源,研究其最佳提取工艺，对我国黄酮类化合物应用于各个方面起了一定的推动作用。因此榕树黄酮是一类具有较高开发价值的物质，既可作为心血管疾病的原料药，还可广泛应用于功能食品、保健食品、饮料、食品防腐保鲜剂及化妆品中,具有广阔的开发前景。 2实验原理 我们通过时中草药成分结构分析，去估计它们的此类性质和选用的溶剂。甙类都比其甙元的亲水性强，特别是皂甙由于它们的分子中往往结合有多数糖分子，羟基数目多，能表现出较强的亲水性，而皂甙元则属于亲脂性强的化合物。[1] 总的说来，
3、只要中草药成分的亲水性和亲脂性与溶剂的此项性质相当，就会在其中有较大的溶解度，即所谓“相似相溶”的规律。本文利用乙醇来提取榕树叶中的黄酮类物质，采用单因素和正交试验法考察乙醇浓度、料液比、温度及提取时间对榕树叶黄酮提取率的影响。 3实验部分 3.1材料原料：新鲜榕树叶。 试剂：芦丁标准品（净重20mg，含量99%+），无水乙醇(AR)，亚硝酸钠(AR)，硝酸铝(AR)，氢氧化钠(AR)。 3.2仪器设备 DHG-90764A型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司），DJ-02型中药粉碎机（上海淀久中药机械制造有限公司），电子天平（MC京制00000249
4、号，北京赛多利斯仪器系统有限公司），501型超级恒温器（上海实验仪器厂有限公司），SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司），721E型可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司） 3.3实验方法 3.3.1原料处理新鲜榕树叶，恒温干燥箱70℃干燥至恒重，用粉碎机粉碎(40目筛)备用。 3.3.2黄酮的提取工艺流程榕树叶粉末→浸泡→乙醇提取→过滤→定容(10mL)→测吸光值，计算提取率。 3.3.3工艺参数的筛选据文献资料[3]及综合因素，选用乙醇浓度、提取温度、提取时间和乙醇溶液用量作参考因素，以测定的浸取提取液中总黄酮含量作参考指标，进行正交试验，以确
5、定最佳条件，用分光光度法测定提取液吸光度值，根据标准曲线计算粗提取液的总黄酮含量。 3.4黄酮含量的测定 3.4.1测定原理黄酮类化合物是植物的重要次生代谢产物，也是一些保健品和中药材的有效成分之一。黄酮类化合物的定量方法常用的有HPLC法和分光光度法，在实际生产和科研过程中，对于黄酮单体的定量常采用HPLC法，而对总黄酮含量的测定，考虑到方法的简便、快捷以及可行性，多采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。在碱性条件下黄酮类化合物与铝盐形成络合物、在510nm波长处有最大吸收峰。[2] 黄酮类化合物常含有下列结构单元，故常与铝盐、锆盐、镁盐等试剂反应，生成有色配合
6、物。 3.4.2测定方法[4]取1.00mL提取液于10.0mL容量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30mL,摇匀,静置6min;再加10%硝酸铝溶液0.30mL,摇匀,静置6min;再加4%氢氧化钠溶液4.00mL,用60%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置12min,以试剂作空白液,用分光光度计于510nm处测吸光度，所测样品吸光度值经标准曲线回归方程换算后，求出提取液总黄酮浓度，然后按下式计算提取率：E％=m／M×100％ 式中：E％一为提取率 m一经换算后提取液中总黄酮质量 M一样品质量 4结果与分析 4.1芦丁标准曲线的绘制和回归方程以芦丁为标样，准确称取
7、芦丁10.0mg置于烧杯中，加60％乙醇水溶液溶解并转移至100mL容量瓶，加入60%乙醇至刻度，定容摇匀即可得芦丁的标准溶(0.10mg/mL)。分别精密吸取0.10mg/mL芦丁溶液0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00mL于10.0mL容量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30mL,摇匀,静置6min;再加10%硝酸铝溶液0.30mL,摇匀,静置6min;再加4%氢氧化钠溶液4.00mL,用60%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置12min,以试剂作空白液,于510nm处测吸光度，结果如下。以芦丁含
