抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿性关节炎早期诊断中的临床意义

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1、抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿性关节炎早期诊断中的临床意义【关键词】类风湿性关节炎类风湿性关节炎（rheumatoidarthritis，RA）是一种病因不明的自身免疫性疾病，以慢性多关节炎症为主要特征〔1〕，发病2年即可出现不可逆的骨关节破坏，因此RA的早期诊断对有效控制该病的病情尤其重要。目前，对于RA的诊断主要依靠临床表现及血清学指标类风湿因子（RF）检测，但均有碍于早期诊疗。2000年国外首次人工合成环瓜氨酸肽（CCP），并成功应用于RA患者血清中抗CCP抗体的检测〔2〕，且显示出较高的特异性和敏感

2、性〔4，5〕。我们应用ELISA法检测了抗CCP抗体在RA患者及对照组中的表达情况，并比较与RF的相关性，探讨抗CCP抗体对RA早期诊断的意义。1材料与方法1.1一般资料选择我院自2003年4月至2006年10月风湿免疫科收治的65例类风湿性关节炎（RA）患者作为观察组，均符合1987年美国风湿病协会修订的RA分类诊断标准;其中男性25例，女性40例（男女比例1:1.6）;年龄24～79岁，平均年龄58.5岁。选择2002年12月至2006年10月于我院就诊的48例患者作为非RA对照组，各项诊断均符合相应

3、的诊断标准;其中包括系统性红斑狼疮21例，原发性干燥综合征11例，骨关节炎9例，多发性肌炎5例，痛风2例;男性17例，女性31例（男女比例1:1.82）;年龄21～70岁，平均年龄60.3岁。选取的35例我院体检中心健康体检者作为正常对照组，其性别、年龄等指标与与上述两组均差异无统计学意义（P>0.05）。1.2研究方法采用ELISA法测定抗CCP抗体，具体步骤为采集所有受检人员的血清以样本缓冲液1:100稀释，-20℃保存待检;取待检液并加入酶修饰的精氨酸残基包被的反应板微孔中，以室温孵育60mi

4、n，再用洗涤缓冲液洗板3次后加入碱性磷酸酶标记的抗体IgG，继续用室温孵育30min，之后于每孔中添加P-硝基酞酚（PNPP）反应30min，最后加入终止液（2mol/L的硫酸）100μl终止反应，设定酶标仪波长为405nm进行检测（以吸光度A值表示）。反应板同时设空白对照、阳性对照和阴性对照，以样本浓度25u/L为阴性，t>25u/L为阳性;且在相同的反应条件下，不同板间同一阳性标准血清A值相对偏差波动在5%以内。实验所用试剂盒为欧洲诊断公司提供的第2代抗CCP抗体诊断试剂盒，操作严格按其说明进行

5、。用速率散射比浊法定量检测类风湿因子（RF），所用试剂由德灵公司提供，所用仪器ARRAY360型全自动蛋白分析仪由Beckman公司提供，RF值>30u/m1为阳性结果。1.3统计学分析统计学分析采用SPSS11.0统计软件进行处理，采用四格表计算抗CCP抗体的敏感性和特异性，组间比较采用χ2检验，P0.05表示有统计学意义，应用相关性分析判断抗CCP抗体与RF有无相关性。2结果148例受检人员的血清检测结果见表1从表1可见65例RA患者和48例非RA患者的阳性检出率分别为58.46%（38/65）

6、、6.25%（仅在系表1抗CCP抗体、RF在受检人员中的阳性率结果统性红斑狼疮患者中检测出3例），而健康组中未见阳性;χ2检验结果显示RA患者组的阳性检出率明显较高，差异有统计学意义（P0.05）。抗CCP抗体在诊断RA中的敏感性和特异性分别为58.46%和93.8%，较RF在敏感性上偏低（P0.05），特异性较RF的81.7%显著偏高;抗CCP抗体与RF在RA患者的血清中同时阳性的检出率为79.4%，经χ2检验，两者间差异无统计学意义（P>0.05）。3讨论RA为一常见的风湿性疾病，我国人群患病率

7、约为0.32%～0.36%，现代的治疗策略是早期积极应用改善病情抗风湿药（DMARDs），这与以往的“金字塔方案”相比能明显改善疾病后果。早期诊断、早期治疗是关键所在。RA的诊断目前仍参照1987年美国风湿病学会的分类标准，其中多为临床诊断指标，RF是唯一的血清学指标，且特异性不高。目前RA的早期诊断仍有一定的困难。2000年国外首次人工合成环瓜氨酸肽（CCP），并成功地在RA血清中检测出抗CCP抗体，结果发现抗CCP抗体有很高的特异性（98%）〔2〕。本次研究中在对148例受检人员的血清进行抗CCP抗体

8、和RF的检测中发现:抗CCP抗体对于健康对照组的阳性检出率为0%，而RF在35例健康人群中测出2例阳性（检出率为5.71%），此说明RF的特异性较之于抗CCP抗体差，且抗CCP抗体的特异性在本实验中达到93.80%，此结果符合多数文献报道的数据范围〔2，4，5〕;同时也说明抗CCP抗体是检测RA的一项特异性很高的血清学指标。实验还显示抗CCP抗体的敏感性为58.46%，此结果略高于国外Schellekens等〔5〕的报道结果。