松茸多糖提取工艺及质量测定

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1、松茸多糖提取工艺及质量测定廖丽娟,李英姬,金光洙【摘要】〔目的〕探讨松茸多糖的提取工艺.〔方法〕采用20g/LNa2CO3溶液在90℃条件下提取松茸多糖,采用苯酚硫酸比色法测定松茸多糖质量.〔结果〕每kg松茸中可测得的松茸多糖质量为33.1g.〔结论〕最佳提取条件为90℃,20g/L的Na2CO3.【关键词】多糖类;植物提取物;植物,药用ABSTRACT:OBJECTIVETostudythemethodsofextractionanddeterminationofpolysaccharidesinthetricholomamatsutake.

2、METHODSCrudepolysaccharidesthetricholomamatsutakethrouth20g/LNa2CO3extractionin90℃,boilingetryinethecontentofpolysaccharidesofthetricholomamatsutake.RESULTSThecontentofpolysaccharidesofthetricholomamatsutakeis33.1g.CONCLUSIONTheconditionofextractionofpolysaccharidesinthetrich

3、olomamatsutakeis20g/LNa2CO3extractionin90℃.Keyedicinal松茸〔Tricholomamatsutake（S.ItoetImai）Sing〕属担子菌门(Basidiomycota)担子菌纲(Basidiomycetes)伞菌目(Agaricales)口蘑科(Tricholomataceae)口蘑属(Tricholoma),它的菌肉肥厚,有香气,味道鲜美,是名贵的野生食药用菌〔1〕.临床试验结果表明,松茸具有治疗糖尿病,抑制癌细胞增植及抗应激反应等功效，主要药理活性成分为多糖类物质〔2,3〕.因此,松

4、茸多糖的提取和含量测定对松茸的开发及应用有重要意义.1材料1.1试药与试剂松茸采自吉林省龙井市三合松茸野生基地，用清水洗净,榨汁后切片放置3h,在60℃条件下干燥90min,准确称取质量,加入10倍量的二氯甲烷回流2次,每次３h,过滤,滤渣用10倍量的甲醇回流2次,每次4h,过滤,滤渣去除甲醇至无醇味，备用.葡萄糖对照品溶液的配制：精密称取105℃干燥至恒质量的葡萄糖25mg,用蒸馏水溶解并定容至100mL，备用.苯酚溶液的配制：取苯酚100g,加入铝片0.1g及NaHCO350mg,蒸馏,收集182℃馏分,称取馏分,配制质量浓度为50g／L的水

5、溶液,置于棕色瓶内放入冰箱备用.其他试剂均为国产分析纯.1.2仪器所用仪器有UV2201型紫外分光光度仪(日本津岛)、RE52A型旋转蒸发仪(上海亚荣仪器有限公司)、HHL，置于2个具塞试管中,加入蒸馏水1.0mL,苯酚液1.0mL,迅速滴加浓硫酸5.0mL.另取2个试管分别滴加蒸馏水2.0mL,同上操作,为空白液.1份在40℃水箱中恒温放置30min,余1份在沸水箱中放置30min，取出冷却至室温,15min后在490nm处测定吸光度值，分别为1.445，1.530,最终确定选择温度及时间为在沸水箱中放置30min.2.1.2浓硫酸用量精

6、密吸取1.0mL葡萄糖对照品溶液5份,分别加入苯酚液1.0mL,再分别滴加浓硫酸4.0,5.0,6.0,7.0,8.0mL,加入蒸馏水稀释至10.0mL,所测得的吸光度值分别为1.110,1.115,1.210,1.312,1.552,1.553.最终确定浓硫酸用量为7.0mL以上,即体积分数为0.625以上.2.1.3反应时间精密吸取1.0mL葡萄糖对照品溶液3份,分别滴加蒸馏水1.0mL,再分别滴加浓硫酸7.0mL,分别于沸水浴内恒温反应20,30,40min，所测得的吸光度值分别为1.412,1.552,1.553,最终选择的反应时间为30

7、min.2.2标准曲线的绘制精密吸取葡萄糖标准溶液0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8mL，置入具塞试管中,分别加入蒸馏水至2.0mL,再分别加入苯酚溶液1.0mL，摇匀,加入浓硫酸7.0mL,充分摇匀,静置10min,置于沸水箱内30min,取出,冷却至室温；另取1个试管以蒸馏水代替葡萄糖标准溶液作为空白对照,在490nm处测定吸光度值,以浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线,建立回归方程:A=6.0249X+1.1044,r=0.9995(n=8).结果表明,葡萄糖质量浓度在2.5～20.0mg／L范围内线性

8、关系良好.2.3提取松茸多糖的影响因素2.3.1温度分别于80℃,85℃,90℃,95℃,100℃条件下提取松茸多糖，所测得的松茸水提取