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时间:2018-11-23
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1、松茸多糖两种测定方法的比较研究论文刘倩,何法林,江春花,白淑芬,王慧芳,喇万英【摘要】目的选择一种准确、稳定、简便的松茸多糖含量测定的方法。方法对硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法测定松茸子实体多糖的含量进行比较。结果硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法分别在1.2~12mg·L-1(r=0.9993)和1.5~15mg·L-1(r=0.9991)范围内呈线性关系;精密度实验RSD分别为0.13%和0.31%;硫酸-蒽酮法在3h内稳定,苯酚-硫酸法在6h内稳定;含量测定结果分别为4.28%和4.95%。结论苯酚-硫酸法测定松茸多糖含量显色灵敏
2、,颜色稳定.freeloreaccurate,stableandconvenientmethodfordeteminationofPolysaccharidecontentinTricholomamatsutakeSing.MethodsPolysaccharidecontentinTricholomamatsutakeSinginedbytethods:athranone-sulfuricacidmethodandphenol-suifuricacidmethod.ResultsThestandardcurveofathr
3、anone-sulfuricacidmethodandphenol-suifuricacidmethodg·L-1(r=0.9993)and1.5~15mg·L-1(r=0.9991),athranone-sulfuricacidmethodethod.ethodissensitive,stableandconvenientandcanbeusedfordeterminationofpolysaccharidecontentinTricholomamatsutakeSing.KeyamatsutakeSing;Polysac
4、charidecontent;Anthranone-sulfuricacidmethod;Phenol-suifuricacidmethod松茸TricholomamatsutakeSing.是赤松、台湾松等树木的活体共生菌,又称松茸、松蕈、松蘑、鸡丝菌,属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、口蘑属[1]。子实体味道鲜美,有很高的营养价值和特殊的药用效果,被誉为“蘑菇之王”[2]。现代研究表明,松茸有治疗糖尿病、抗癌、镇咳、祛痰、平喘等作用[3]。松茸多糖含量的测定,有采用苯酚-硫酸法[4],有采用硫酸-蒽酮法[5]。本文对
5、松茸多糖的两种测定方法进行了比较研究,以选定一种方便快捷的适合松茸多糖含量测定的方法。1仪器1.1仪器722分光光度计;水浴锅,电子天平,干燥箱、循环水真空泵。1.2试药葡萄糖(中国药品生物制品检定所);95%乙醇、浓硫酸、蒽酮、苯酚均为分析纯,水为双蒸水。松茸购自吉林省博苑长白山特产科技有限公司。2方法与结果2.1对照品溶液的配制精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品10mg,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,配制成每毫升中含无水葡萄糖0.1mg的对照品溶液。2.2样品溶液的制备精密称取60℃干燥至恒
6、重的松茸细粉0.5g,置圆底烧瓶中,加80%乙醇150ml,加热回流1h,趁热滤过,残渣用80%乙醇洗涤3次,将残渣及滤纸置烧瓶中,加水150ml,加热回流1h,趁热滤过,烧瓶及残渣用热水洗涤3次,合并滤液与洗液,转移至250ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。2.3硫酸-蒽酮法测定松茸多糖的含量2.3.1标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1ml,分别置10ml具塞刻度试管中,各加水至2.0ml,摇匀,在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度,摇匀,冷却后置沸水浴中保温10min,取出,
7、立即置冰水浴中冷却10min,取出,以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法,在620nm波长处测定吸光度。以吸光度(Y)为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线[6],建立回归方程:Y=0.0357X+0.0222(r=0.9993)。结果表明:浓度在1.2~12mg·L-1范围内线性关系良好。2.3.2空白溶液的制备取水约2.0ml,置10ml具塞干燥试管中,在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度,摇匀,放冷后置沸水浴中反应10min,立即取出置冰水浴中冷却10min,即得空白溶液。2.3.3精密度实验分别精密量取对
8、照品溶液1ml,按“2.3.1”项下的方法重复测定6次,吸光度的RSD为0.13%,结果表明仪器精密度良好。2.3.4稳定性考察精密吸取按“2.2”项下方法制备的样品溶液1.0ml,自“加水至2.0ml”起,按照“2.3.1”项下方法每隔0.5h测定吸光度,连续6h,考察其稳定性。结果表明
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