新辅助热化疗对乳腺癌微血管密度和血清vegf的影响论文

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1、新辅助热化疗对乳腺癌微血管密度和血清VEGF的影响论文蒋金恒包国强何显力高德明马庆久【摘要】目的:研究新辅助热化疗对乳腺癌患者肿瘤微血管密度(MVD)、血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响.方法：应用免疫组织化学技术及酶联免疫吸附测定法（ELISA），观察新辅助热化疗和新辅助化疗后肿瘤MVD的变化,检测乳腺癌患者接受新辅助热化疗和新辅助化疗前后血清VEGF含量.结果：新辅助化疗组与对照组相比，MVD明显下降［(47.4±13.3)个/HPvs（81.7±17.6）个/HP，P0.05］；新辅助热化疗组与新辅助

2、化疗组及对照组相比，MVD下降更明显［(26.8±5.9)个/HPvs(47.4±13.3)个/HP及（81.7±17.6）个/HP，P0.05］.与对照组相比，新辅助化疗和新辅助热化疗后血清VEGF含量均明显降低［(315±154)ng/Lvs（156±53）ng/L，P0.05；（307±156）ng/Lvs（140±47）ng/L.freelicrovesseldensity,MVD)是衡量肿瘤血管形成程度的标志.而血管内皮生长因子(vascuiarendotheliaicellgroAb，免疫组化染色试剂盒

3、，DAB染色剂（北京中杉金桥生物技术有限公司）.1.2方法1.2.1实验分组按术前治疗方案不同分为对照组，新辅助化疗组和新辅助热化疗组，每组20例，三组患者临床病理资料无统计学差异（表1）.①新辅助化疗组：术前行新辅助化疗方案，采用多烯紫杉醇+阿霉素+环磷酰胺方案，共完成2个周期治疗；②新辅助热化疗组：术前行新辅助热化疗方案，其化疗方案同新辅助化疗组.热疗采用脉冲聚焦微波加热治疗系统（南京启亚医疗设备有限公司，脉冲峰值功率6000～32000VD检测MVD采用免疫组化法检测，将所有待染石蜡切片，脱腊至水，PBS振洗

4、3min×3；30mL/LH2O2去离子水封闭30min.PBS振洗3min×3；3mol/L尿素消化30min，柠檬酸修复，PBS振洗3min×3；用滤纸将片子擦干后，置于湿盒内，37℃正常血清封闭30min；滴加一抗（3mg/L），放入冰箱4℃过夜；d2，取出片子，37℃复温30min，PBS振洗3min×3；滴加二抗，37℃于湿盒内孵育30min，PBS振洗3min×3；滴加ABC复合物，37℃于湿盒内孵育30min，PBS振洗3min×3；DAB显色20min，自来水充分冲洗，苏木素淡染，乙醇逐级脱水，透明

5、，封片.结果判定（微血管定量方法）参照VD.微血管的判定不以是否形成管腔或管腔内有无红细胞为记数单位，而是以与邻近的微血管明显分离的染色阳性的单个内皮细胞簇均作为一个血管计数，凡管腔大于8个红细胞，带较厚肌层的血管均不计数.1.2.4血清VEGF检测血清VEGF采用酶联免疫吸附测定法检测，VEGF含量的检测及结果计算按照VEGFELISA试剂盒说明书进行.统计学处理：应用SPSS11.0统计软件对数椐进行统计学分析，数据以x±s表示，分析采用t检验.P0.05为差异有统计学意义.2结果2.1组织MVD计数免疫组化C

6、D34染色，显示三组乳腺癌组织切片中微血管均呈现不同程度的棕黄色（图1）.MVD数值分别为（81.7±17.6）个/HP，（47.4±13.3）个/HP和（26.8±5.9）个/HP，组间差异有统计学意义（P0.05）.2.2血清VEGF含量结果显示，血清VEGF含量对照组为(304±156)ng/L；新辅助化疗组化疗前为(315±154)ng/L，化疗后为(156±53)ng/L（P0.05）.新辅助热化疗组在热化疗前为(307±156)ng/L；热化疗后为(140±47)ng/L，新辅助热化疗前血清VEGF的含

7、量明显高于热化疗后血清VEGF的含量，差异具有统计学意义(P0.05).3讨论乳腺癌新辅助化疗可以缩小肿瘤及淋巴结体积，使原发肿瘤及淋巴结降期，提高保乳率，改善癌旁浸润情况，降低癌细胞活力消灭微转移灶，提高可手术率，减少术中播散及术后转移，消灭亚临床病灶，减少复发的潜在危险.肿瘤热疗是利用物理能量在组织中积聚而产生热效应,使肿瘤组织温度上升到有效治疗温度,并维持一段时间,以杀死癌细胞,又不损伤正常细胞的一种治疗方法［2-3］.肿瘤新辅助热化疗即化疗联合热疗,可能成为临床上一种新的肿瘤治疗的方法.实体肿瘤的生长和转移

8、依赖新生血管的形成，而MVD与肿瘤浸润、复发和转移等生物学特性密切相关.MVD可作为判断肿瘤预后的独立指标.VEGF为特异的血管内皮细胞刺激因子，能够促进内皮细胞的增殖、分裂，促进新的血管生成，同时可引起细胞外基质改变而有利干肿瘤细胞在合适的微环境形成新的转移灶［4-5］.我们检测新辅助化疗及新辅助热化疗前后的MVD值和血清VEGF含量，新辅助热化疗和新辅助