长春新碱对可移植性小鼠淋巴细胞白血病的疗效及其机制研究论文

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时间:2018-11-23

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1、长春新碱对可移植性小鼠淋巴细胞白血病的疗效及其机制研究论文朱大诚,尹小明,陈秀珍,罗小泉,闵建新【摘要】目的探讨长春新碱(Vincristine,VCR)对L615白血病的疗效及其可能机制。方法L615白血病造模成功后,分为对照组和VCR组,进行腹腔注射给药(对照组给生理盐水).freelechanismstotheL615leukemiaofVCR.MethodsAftermakingthemodelsuccessfully,putthemiceinto2groups,antithesesoneandVCRgroup.Thencarryonthecelia

2、cinjection(theantithesesonees.Observethesurvivaltime,arroarroinedbyFCM.ResultsTheantithesesgroup'seofVCRgroupent,especiallyinantithesesgroup);theplateletsfirstincreasedandthendecreasedandtillthedyingperiod.ThereountofL615cellsintheperipheralbloodofantithesesgroup(52.9%oftheleucocyt

3、enumber);17.25%inVCRgroupiceia.Toinducetheapoptosisofleukemiacellsisitsmainmechanism.Itmaydamagethenormaltissues,especiallytheimmunesystemor.Keyia;Lifeextensionrate;Apoptosis;FCM长春新碱(VCR)作为抗肿瘤化疗药早已应用于临床。有实验证明VCR能诱导髓系白血病HL-60,U937,K562等细胞凋亡[1~3],。这次我们利用VCR作用于可移植性小鼠淋巴细胞白血病——L615白血病,观

4、察其疗效,并探讨其可能机制。1材料与方法1.1药品及试剂VCR为上海华联制药有限公司产品(批号:050602A),用生理盐水配成浓度为25μg/ml的VCR溶液备用。细胞凋亡检测试剂盒为南京凯基生物科技发展有限公司产品。1.2细胞培养L615白血病细胞株购于中国医学科学院血液研究所(天津)。培养基为含体积分数10%的小牛血清(杭州四季青)的RPMI-1640(Gibco公司产品),并加入双抗(青霉素100μ/ml和链霉素100μg/ml),在37℃,5%CO2饱和湿度的培养箱(ThernoForma公司产品)中培养,取对数生长期细胞进行造模。1.3模型建立取

5、对数生长期L615白血病细胞(L615细胞),离心1500r/min,8min,去上清液,用生理盐水洗涤2次,调整细胞终浓度为1.4×106/ml。取615近交系小鼠(购自中国医学科学院血液研究所)8只,鼠龄10周,体重24~27g,雌雄各半。无菌操作,每只小鼠腹腔接种L615细胞7×105个,造成L615白血病模型(全身白血病)[4]。小鼠在层流架内饲养,一切与鼠接触的物品均按无菌要求处理。1.4分组及给药方法将L615白血病模型小鼠随机分为2组。每组雌雄各半,即对照组(L615模型组)(每次每只鼠给生理盐水0.4ml);VCR组(每次每只鼠给VCR0.3

6、mg/kg)。模型建立后,第2天开始按以上方案腹腔注射给药,隔日1次,共给药6次。1.5观测指标①体重变化;②生存时间,用公式(T-C)/C×100%计数其生命延长率(T、C分别为VCR组,对照组平均生存天数);③外周血白细胞()分析取濒死期两组小鼠外周血,每个样本0.5ml入已加淋巴细胞分离液的试管内,离心1500r/min,20min,然后小心吸出位于中间的白色层(白细胞),进行细胞计数(每个样本细胞数应大于1×106),用PBS洗涤,然后按凯基AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒要求进行操作。上机检测(流式仪为BECTONDICKNSON,B、

7、D公司产品),采用CenQuest软件获取10000个细胞,ModFitlt软件分析并获得结果。1.7统计学处理采用双侧t检验,P0.05认为差异有显著性。2结果2.1体重变化VCR组给药前,给药后第5天及濒死期小鼠体重无明显改变,但对照组濒死期与给药前比较,体重有所减轻,且具有显著性差异(P0.05)。结果见表1。表1两组小鼠体重的变化比较(略)g2.2生存时间VCR组与对照组比较,生存时间显著延长(P0.01),其延长时间及生命延长率见表2。表2两组小鼠生存时间比较(略)2.3外周血象给药5d后,同组与实验前比较白细胞及血小板数逐渐上升,且VCR组血小板

8、增高有显著意义。进入濒死期,白细胞数显著增高(P0.

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