蟾酥对可移植性小鼠淋巴细胞白血病疗效的研究论文

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1、蟾酥对可移植性小鼠淋巴细胞白血病疗效的研究论文朱大诚尹小明陈秀珍罗小泉【摘要】目的探讨蟾酥对L615白血病的疗效及其可能机制，并对其临床应用提供参考。方法对小鼠行L615白血病造模。造模成功后，蟾酥溶液分别按低、中、高剂量进行腹腔注射给药，1次/d，连续10d，观测小鼠体重变化，生存时间，外周血白细胞计数、分类及血小板计数.freelechanismofChansuontheL615leukemiaandprovidesomeadvicetoitsclinicalpractice.MethodsAfterthemodeliddle,highdoseonceaday)e,p

2、eripheralbloodleukocytecountandclassification,plateletcount,hepatosplenicindex,hepaticandsplenicandbonemarroears,bonemarroinedbyFCM.ResultsTheeofChansugroupsiddleandhighdoseChansugroups(P0.05orP0.01);peripheralhemogram,.freeleegroup,leukocytecountandplateletcountchangedalotaftertheexperim

3、ent(P0.05orP0.01);duringthedyingperiod,parediacellpercentagehaddifferences(P0.05orP0.01);significantdifferencesiamiceandthoseinL615group(P0.05);theFCMprovedthatChansucouldinducetheapoptosisofL615leukemiacellsindose-dependentmanner.ConclusionChansuhassometherapeuticeffectstotheL615leukemia

4、.Toinduceapoptosisisoneofitsmechanisms.Also,Chansucaninhibittheinfiltrationofleukemiacellstoimmunesystem.Keyiamould；Survivaltime；Apoptosis；FCM以往的实验结果表明，蟾酥对淋巴细胞白血病CEM细胞具有较强的抑制作用，诱导CEM细胞调亡是其机制之一［1］。本研究进行体内实验，利用蟾酥溶液作用于可移植性小鼠淋巴细胞白血病-L615白血病，观察其疗效。现报道如下。1材料和方法1.1药品蟾酥购于山东临沂爱康药业有限公司，按文献［1］配成浓度为1

5、0mg/ml的蟾酥溶液，滤过除菌，然后再配成0.05，0.1mg/ml和0.3mg/ml3种溶度备用。1.2细胞培养L615白血病细胞株购于中国医学科学院血液研究所（天津）。培养基为含体积分数10%的小牛血清（杭州四季青）的RPMI-1640（Gibco公司产品），并加入双抗（青霉素100μg/ml和链霉素100μg/ml）。在37℃，5%CO2，饱和湿度的培养箱（ThernoForma公司产品）中培养，取对数生长期细胞进行造模。1．3模型的建立取对数生长期L615白血病细胞（L615细胞），离心1500r/min，8min，去上清液，用生理盐水洗涤2次，调整细胞终浓度为

6、1.4×106/ml。取615近交系小鼠（购自中国医学科学院血液学研究所）16只，鼠龄8～10周，体重24～27g，雌雄各半。无菌操作，每只小鼠腹腔注射接种L615细胞7×105个，造成L615白血病模型（全身白血病）［2］。小鼠在层流架内饲养，一切与鼠接触的物品均按无菌要求处理。1.4分组及给药方法将L615白血病模型小鼠随机分为4组。每组雌雄各半，即L615模型组（对照组）(模型组，每次给生理盐水0.4ml)；蟾酥Ⅰ组（低剂量组，每次按0.6mg/kg给药），蟾酥Ⅱ组（中剂量组，每次按1.8mg/kg给药），蟾酥Ⅲ组（高剂量组，每次按5.4mg/kg给药）。模型建立后

7、，第2天开始按以上方案腹腔注射给药，1次/d，连续10d。1.5观测指标①体重变化；②生存时间，用公式（T-C）/C×100%计算其生命延长率（T、C分别为试验组、对照组平均生存天数）；③外周血白细胞（）分析取濒死期各组小鼠外周血，每个样本0.5ml入已加淋巴细胞分离液的试管内，离心1500r/min，20min，然后小心吸出白色层（白细胞层），进行细胞计数（每个样本细胞数应大于1×106），用PBS洗涤，然后按凯基AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒（南京凯基生物科技发展有限公司产品）要求进行操作。上机检测（流式仪为