蟾酥对可移植性小鼠淋巴细胞白血病疗效的研究

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1、蟾酥对可移植性小鼠淋巴细胞白血病疗效的研究作者：朱大诚尹小明陈秀珍罗小泉【摘要】目的探讨蟾酥对L615白血病的疗效及其可能机制，并对其临床应用提供参考。方法对小鼠行L615白血病造模。造模成功后，蟾酥溶液分别按低、中、高剂量进行腹腔注射给药，1次/d，连续10d，观测小鼠体重变化，生存时间，外周血白细胞计数、分类及血小板计数，肝脾指数，肝、脾、骨髓涂片及骨髓白细胞分类，流式细胞术测定细胞凋亡率。结果L615模型组体重明显减轻，蟾酥低、中、高剂量组体重无明显变化；蟾酥低、中、高剂量组小鼠生存时间比L

2、615模型组长，且中、高剂量具有显著差异；外周血象，同组不同病程，白细胞、血小板计数与实验前比较有显著差异,濒死期各组与L615模型组比较，白细胞、血小板计数，L615白血病细胞百分比有显著差异；白血病死亡小鼠蟾酥各组脾脏指数均低于L615模型组，且有差异；流式细胞术证实，蟾酥能诱导L615白血病细胞凋亡，凋亡率呈剂量依赖性。结论蟾酥对L615白血病具有一定的疗效，其机制之一是诱导白血病细胞凋亡，其次蟾酥能抑制L615白血病细胞对免疫系统的浸润。【关键词】蟾酥L615白血病模型生存时间细胞凋亡流式

3、细胞术Abstract:ObjectiveTostudythetherapeuticeffectsandthepotentialmechanismofChansuontheL61leukemiaandprovidesomeadvicetoitsclinicalpractice.MethodsAfterthemodelwasestabishedsuccessfully,Chansusolution(respectivelybythelow,middle,highdoseonceaday)wasinj

4、ectedintraperitoneallyfor10dayscontinually,thebodywEight,survivaltime,peripheralbloodleukocytecountandclassification,plateletcount,hepatosplenicindex,hepaticandsplenicandbonemarrowsmears,bonemarrowleukocyteclassificationwereobservedandtheapoptosisrate

5、sweredeterminedbyFCM.ResultsThewEIghtinL61groupdecreasedobviouslyandthegroupsinjectedwithChansuhadfewchanges;thesurvivaltimeofChansugroupswerelongerthanthoseofL61group,andthereweresignificantdifferencesbetweenmiddleandhighdoseChansugroups(PKeywords:Ch

6、ansu；L61leukemiamould；Survivaltime；Apoptosis；FCM以往的实验结果表明，蟾酥对淋巴细胞白血病CEM细胞具有较强的抑制作用，诱导CEM细胞调亡是其机制之一［1］。本研究进行体内实验，利用蟾酥溶液作用于可移植性小鼠淋巴细胞白血病-L615白血病，观察其疗效。现报道如下。　　1材料和方法药品蟾酥购于山东临沂爱康药业有限公司，按文献［1］配成浓度为10mg/ml的蟾酥溶液，滤过除菌，然后再配成，mg/ml和/ml种溶度备用。细胞培养L615白血病细胞株购于中国医

7、学科学院血液研究所。培养基为含体积分数10%的小牛血清的RPMI-1640，并加入双抗。在37℃，5%CO2，饱和湿度的培养箱中培养，取对数生长期细胞进行造模。1．3模型的建立取对数生长期L615白血病细胞，离心100r/min，min，去上清液，用生理盐水洗涤2次，调整细胞终浓度为×106/ml。取615近交系小鼠16只，鼠龄8～10周，体重24～2g，雌雄各半。无菌操作，每只小鼠腹腔注射接种L615细胞7×105个，造成L615白血病模型［2］。小鼠在层流架内饲养，一切与鼠接触的物品均按无菌要

8、求处理。分组及给药方法将L615白血病模型小鼠随机分为4组。每组雌雄各半，即L615模型组(模型组，每次给生理盐水)；蟾酥Ⅰ组，蟾酥Ⅱ组，蟾酥Ⅲ组。模型建立后，第2天开始按以上方案腹腔注射给药，1次/d，连续10d。观测指标①体重变化；②生存时间，用公式/C×100%计算其生命延长率；③外周血白细胞计数及分类，血小板计数；④肝脾指数；⑤肝、脾、骨髓涂片及骨髓白细胞分类。1．6流式细胞术分析　　取濒死期各组小鼠外周血，每个样本入已加淋巴细胞分离液的试管内，离心100r/min，20m