升清胶囊对豚鼠胆石病相关基因的影响

《升清胶囊对豚鼠胆石病相关基因的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、升清胶囊对豚鼠胆石病相关基因的影响【关键词】,,胆结石［摘要］目的：探讨中药升清胶囊在分子层面防治胆石病的机制。方法：雌性豚鼠60只，随机分成正常组（喂正常饮食作为对照）、模型组（喂低蛋白饮食致石）和中药组（喂低蛋白饮食致石加中药升清胶囊治疗）。6周后处死并取材，观察动物成石情况，检测肝组织胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶（bilirubinUDPglucuronosyltransferase,BUGT）mRNA及胆固醇7α羟化酶(cholesterol7αhydroxylase,CYP7A1)mRNA表达。结果：各组

2、豚鼠成石比例分别为正常组2/14、模型组为9/11、中药组为4/14，组间有显著差异(P＜0.05)，正常组和中药组豚鼠的肝组织BUGTmRNA及CYP7A1mRNA表达明显高于模型组(P＜0.05)。结论：中药升清胶囊可能是通过上调肝组织中BUGTmRNA和CYP7A1mRNA的表达，干预胆红素和胆固醇代谢，抑制致石性胆汁形成，起到预防胆结石的作用。［关键词］胆结石;升清胶囊;BUGT;胆固醇7α羟化酶;基因EffectsofShengqingCapsulesoncholelithiasisrelatedgenesin

3、guineapigsABSTRACTObjective:ToexplorethemolecularmechanismsofShengqingCapsulesintreatingcholelithiasis.Methods:Sixtyfemaleguineapigsizedinto3groups:groupⅠ(fedaldiet),groupⅡ(fedationandtheexpressionsofbilirubinUDPglucuronosyltransferase(BUGT)mRNAandcholesterol7αhy

4、droxylase(CYP7A1)mRNAedingroupsⅠ,ⅡandⅢongthethreegroups(P<0.05).TheexpressionsofBUGTandCYP7A1mRNAsation,aybeduetoitsinterferenceofmetabolismofbilirubinandcholesterolandupregulationoftheexpressionsofBUGTandCYP7A1mRNAs.KEYMuLV逆转录酶（200U/μl），核糖核酸酶抑制剂（RNAsin，40U/μl

5、），Promaga公司产品；DNA标记物（100bp），生工生物技术公司产品。豚鼠胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶（bilirubinUDPglucuronosyltransferase,BUGT）上游引物(270289,20bp):5’ACTGGGCAACGCTAAGAAGG3’；下游引物(531512,20bp):5’TATGCCACAGGGAACAGAGC3’；PCR产物长度：262bp。豚鼠胆固醇7α羟化酶(cholesterol7αhydroxylase,CYP7A1)上游引物(812832,21bp):5’

6、GTTTCTCAATGACACGCTCTC3’；下游引物(12491229,21bp):5’AAAGTCAAAGGGTCTGGGTAG3’；PCR产物长度:438bp。豚鼠内参βactin上游引物(30bp):5’TCATGAAGTGTGACGTTGACATCCGTAAAG3’；下游引物（30bp）：5’GCTAGAAGCATTTGCGGTGCTCGATGGAGG3’；PCR产物长度：286bp。1.1.5主要仪器－85℃/371LELTBLV超低温冰箱，美国Harris公司；AA200DS电子天平，美国GG公司；匀浆器

7、，美国acia公司；LNGT83真空离心浓缩干燥器，太仓市华美生化仪器厂；DZF3型干燥箱，上海顿克仪器科技有限公司；DSHZ300型多用途水浴恒温振动器，上海一恒科技有限公司；X700型照相机，日本美能达公司；紫外线透射反射仪，北京利康达圣科技发展有限公司；752分光光度计，上海测维光电技术有限责任公司；DNAAmpCycler9600PCR热循环仪，9600型PCR基因扩增仪，KS400型计算机图像分析系统，美国PerkinElmer公司。1.2实验方法1.2.1造模方法采用本科室首创的低蛋白致石饮食所致的豚鼠胆结石

8、模型［1］。将豚鼠置实验室笼养，每笼5只，先喂养正常饲料1周以适应环境，造模时喂以致石性饲料，造模期间不限饮食量，自由饮水，控制青菜量。1.2.2动物分组将60只豚鼠随机分为3组，即正常对照组（正常组）15只、致石饲料造模组（模型组）25只、致石饲料造模并经中药升清胶囊治疗组（中药组）20只。正常组喂以正常饲料及适量