升清胶囊下调胆囊结石豚鼠胆囊上皮组织雌、孕激素受

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1、升清胶囊下调胆囊结石豚鼠胆囊上皮组织雌、孕激素受【摘要】研究雌激素受体和孕激素受体在胆固醇结石形成中的作用及升清胶囊对其表达的影响。方法：将80只雌性豚鼠随机分为正常对照组、模型组、熊去氧胆酸组和升清胶囊组，每组20只。除正常对照组外，采用高脂致石饮食法建立胆囊胆固醇结石模型。升清胶囊组和熊去氧胆酸组豚鼠分别灌胃相应药物。造模7周后观察各组豚鼠胆囊成石情况，并采用免疫组织化学法检测豚鼠胆囊上皮组织雌、孕激素受体的表达。结果：升清胶囊可降低造模豚鼠的成石率，与模型组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。按正常对照

2、组、升清胶囊组、熊去氧胆酸组和模型组的顺序，各组豚鼠胆囊组织雌、孕激素受体阳性表达半定量分级逐级升高，升清胶囊组与模型组、熊去氧胆酸组比较差异有统计学意义（P<0.05）。各组间雌、孕激素受体阳性表达率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：疏肝利胆方药升清胶囊可下调雌、孕激素受体的表达，降低胆固醇结石形成。【关键词】雌激素受体孕激素受体胆固醇结石豚鼠升清胶囊Objective:Tostudytheroleofestrogenreceptor(ER)andprogesteronereceptor(PR

3、)intheformationofcholesterolcalculusandinvestigatetheeffectsofShengqingCapsule(SQC),aChinesepatentherbalmedicinealeguineapigsalcontrolgroup,untreatedgroup,ursodeoxycholicacidgroup(UDCAgroup)andSQCgroup.ThecholesterolgallstoneinisteredtotheguineapigsintheSQCgroup

4、andUDCAgroup.After7inistration,alltheanimalsationanddetecttheexpressionstheERandPRintheepithelialtissueofgallbladderbyimmunohistochemicalmethod.Results:Gallstone.TheincidenceofcalculusformationintheSQCgroup(27.78%)thenormalcontrolgroupthroughtheSQCgroupandUDCAg

5、rouptotheuntreatedgroup.Exceptfortheformertationofcholesterolstone.AndShengqingCapsulecandog/片，由上海三维长江生化制药有限公司生产，批号为20040502。1.3胆固醇结石模型制备采用高脂致石饮食法建立胆固醇结石模型［3］。致石饲料主要成分为玉米粉15%、黄豆粉10%、面粉10%、鱼粉3%、麸皮10%、食盐1%、酵母粉1%、苜蓿粉40%、酪蛋白2%、猪油2%、蔗糖5%及胆固醇1%。由上海申旺实验动物中心提供。胆囊内有块状或絮状

6、沉淀物，并经红外光谱分析证明为胆固醇性质者为造模成功。1.4主要试剂与仪器鼠单克隆雌激素受体(estrogenreceptor,ER)抗体（sc787）与鼠单克隆孕激素受体(progesteronereceptor,PR)抗体（sc538）均购于美国SantaCruz公司。RM2145型切片机、HI1210型展片机和HI1220型烤片机（德国Leica公司生产），OlympusCX31型光学显微镜（日本Olympus公司生产）。1.5动物分组与处理80只豚鼠常规适应性喂养1周后，采用随机数字表分为正常对照组、模型组

7、、熊去氧胆酸组和升清胶囊组，每组20只。正常对照组豚鼠喂食正常饲料、少量青菜及生理盐水。模型组予造模饲料、少量青菜及等容量的生理盐水。熊去氧胆酸组和升清胶囊组分别予造模饲料、少量青菜和相应药物灌胃。给药量按体表面积法计算，升清胶囊给药量0.161g/(kg·d)、熊去氧胆酸给药量40.25mg/(kg·d)，2次/d灌胃，连续7周。1.6取材灌喂第49天，所有豚鼠禁食12h，于次日晨8时用2％戊巴比妥钠60mg/(kg·d)腹腔注射麻醉，以新洁尔灭酊消毒皮肤后开腹，取出胆囊，观察胆囊成石情况，计算胆囊成石率，并取出结石

8、，采用红外光谱分析法进行胆石定性。1.7免疫组化法检测ER和PR表达剪取各组豚鼠胆囊组织0.5cm×0.5cm，用10％甲醛固定，常规石蜡制片，厚度5μm，全部标本进行免疫组化PAP染色，苏木素复染，封片，光学显微镜下观察胆囊组织ER阳性细胞与PR阳性细胞的染色情况。每组均用ER阳性及PR阳性乳腺癌组织切片作阳性对照，用磷酸盐缓冲