超声波提取枇杷叶总黄酮及其鉴别论文

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1、超声波提取枇杷叶总黄酮及其鉴别论文黄锁义，李卫彬，阳文辉，李容【关键词】超声波提取；,,枇杷叶；,,.freelg/ml.freelethodsoftotalflavanonefromFoliumEriobotryae.MethodsTheflavonoidsFoliumEriobotryaeetryEriobotryae.ResultsBythismethodthedensityofthetotalflavanoneofFoliumEriobotryaeleavesobtainedg/mlandtherateofrecover

2、yethodstogettheouteandthepurityoftheflavanoneishigh.Thismethodisapurelyphysicalprocessandhasnopollution.Itisanidealeriobotryaeleaves.Keyent;Foliumeriobotryae;Totalflavanone;Identification枇杷叶为蔷薇科常绿小乔木植物枇杷Eriobotryajaponica(Thnnb.)Lindl.的叶,味苦，性凉。用于肺热咳嗽，气逆喘急，胃热呕逆，烦热口渴，清

3、肺止咳，降逆止呕。治疗腰椎增生性关节炎、前列腺增生、术后疼痛、痹症、肩周痛、消除乳房硬块及辅治神经疾病等症状［1，2］。研究表明［3，4］：枇杷叶的主要化学成分为橙花叔醇、金合欢醇以及丰富的黄酮类化合物。尚有α和β蒎烯、莰烯、月桂烯、对聚伞花素、芳樟醇、α衣兰烯、α和β金合欢烯、樟脑、橙花醇、牛儿醇、α毕澄茄醇、榄香醇、顺β,γ己烯醇和芳樟醇氧化物。亦含苦杏仁苷、熊果酸、齐墩果酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸、鞣质、维生素B和维生素C等，还含山梨糖醇。有文献报道枇杷叶中总黄酮的提取方法采用水提法［3］，但是，这种方法的提取效率仍然较低

4、。近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道［4，5］，表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响［5］，但超声技术应用于提取枇杷叶中黄酮类物质的研究尚未见报道。本文报道用超声波提取枇杷叶总黄酮及鉴别。1仪器与试剂1.1仪器KQ5200DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；UV

5、755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZFI型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)；SHBIII循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。1.2试剂95%乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；新鲜枇杷叶采自右江民族医学院校园内。2方法与结果2.1总黄酮成分提取取新鲜枇杷叶，烘干，粉碎。称取枇杷叶粉末约6g，加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤。滤渣再加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，

6、合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩5~7ml为止，放置100ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。2.2测定方法依据以芦丁为对照品测定枇杷叶中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。2.3定量实验总黄酮的含量测定2.3.1波长的选择取样品液适量，在0.30ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420~700nm波长范围测定螯合物的吸光度，螯合物于510nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。2.3.2标准曲

7、线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白，于510nm处测定吸光度。结果见表1。表1紫外可见分光光度计测定（略）2.3.3提取物含量的测定精密吸取样品液0.50ml，置10.00ml容量瓶，按标准曲线的制备方法测定其吸光

8、度A=0.635，根据回归方程：A=2.230×10-4+14.46C，计算样品中总黄酮的含量C=0.9090mg/ml。2.3.4回收实验精密量取样品液1.00ml，加入标准芦丁对照品1.00ml（0.10mg/ml），同前样品测定方法操作测定吸光度，求出回收