超声波提取肾蕨总黄酮及鉴别论文

《超声波提取肾蕨总黄酮及鉴别论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、超声波提取肾蕨总黄酮及鉴别论文黄锁义，罗建华，蒙春越，李容【关键词】超声波提取；,,肾蕨；,,.freelg/ml.freelethodoftotalflavanoneofNephrolepiscordifolia（L.）Presl.MethodsTheflavonoidsNephrolepiscordifolia（L.）preslinedbyspectrophotometry.ResultsThecontentofthetotalflavanoneofnephrolepiscordifolia（L.）Preslobtainedbythismethodg/mland

2、therateofrecoveryethodstogettheouteandthepurityoftheflavanone.Thismethodisapurelyphysicalprocessandhasnopollution.Itisanideal。地生或附生于溪边下、石缝中或树干上。主产于我国西南及福建、台湾、广东、广西、浙江、湖南。其药用部位为骨碎补科植物肾蕨(Nephrolepiscordifolia(L.)Presl.)的块茎或全草。性味功效为：甘、涩、凉。清肺止咳，止血，清热利湿。用全草煎服可治湿热黄疸；地茎加糖浓煎冲酒服，可治疗疝气；配杉树尖、夏枯草、

3、野萝卜菜煎服，可治淋浊、小便点滴、疼痛难忍［2］。还具有很好的抗菌、抗微生物、抗肿瘤等作用［3］。近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道［4，5］，表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响［5］。但超声技术应用于提取蕨类植物中黄酮类物质的研究尚未见报道，本文报道用超声波提取肾蕨植物总黄酮及鉴别。1仪器与试剂1.1仪器KQ

4、5200DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；UV755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZFI型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)；SHBIII循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。1.2试剂95%乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；正丁醇AR;氢氧化钠AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；镁粉AR;乙酸镁AR;冰醋酸AR；乙酸乙酯AR；芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；新鲜肾蕨植物采自广西金秀县。2方法与结果2.1总黄酮成分提取取新鲜肾蕨植物，烘干，粉碎。称取肾蕨植物粉末约6g，加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤。

5、滤渣再加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩25ml为止，放置250ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。2.2测定方法依据以芦丁为对照品测定肾蕨植物中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。2.3定量实验总黄酮的含量测定2.3.1波长的选择取样品液适量，在0.30ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420~700nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。

6、2.3.2标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白，于510nm处测吸光度。吸光度测定结果见表1。根据表1得回归方程：A=-0.0311+13.5184C，r=0.9999。2.3.3提取物含量的测定精密吸取样品液0.5ml，置10.00ml容量瓶，按

7、标准曲线的制备方法测定吸光度A=2.699，根据回归方程：A=-0.0311+13.5184C，计算样品中总黄酮的含量C=0.4039mg/ml。表1紫外可见分光光度计测定（略）2.3.4回收实验精密量取样品液2.00ml，加入标准芦丁对照品2.00ml（0.10mg/ml），同前样品测定的操作方法测定吸光度，求出回收率为102.6%。2.4定性实验-总黄酮的鉴别2.4.1颜色反应紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在滤纸上，在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏0.5min，立即在紫外光下观察，呈