超声波提取小叶榕总黄酮及鉴别

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1、超声波提取小叶榕总黄酮及鉴别【摘要】　　目的为充分利用小叶榕植物资源，避免资源的浪费，探讨小叶榕总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从小叶榕中提取总黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用分光光度法测定含量。结果测得供试品溶液中总黄酮的含量C=0.3916mg/ml，回收率为100.16%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无任何污染，是一条提取小叶榕总黄酮类物质的有效途径。【关键词】超声波提取；小叶榕；总黄酮；鉴别　　Abstract：ObjectiveTodevelopamethodfortheextractionandidentificati

2、onoftotalflavanoneofXiaoyerong.MethodsTheflavonoidsXiaoyerongetryinetheflavanoneofXiaoyerong.ResultsThecontentofthetotalflavanoneofXiaoyerongg/mlandtherateofrecoveryethodisapurelyphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealent；Xiaoyerong；Totalflavanone；Identification小叶榕为桑科植物榕树Ficusmicroc

3、arpaL.f.的干燥叶，又名细叶椿、细叶榕、垂叶榕，属桑科椿属常绿大乔木，高20～25m，生气根〔1～2〕。全年可采收，斩取叶和幼枝，除去树枝，取净叶片，晒干。小叶榕多生长于村边或山林中，分布于广西、广东、福建、台湾、浙江南部、云南、贵州。印度、缅甸、马来西亚也有。　　小叶榕既可作风景树、行道树，树皮纤维可制鱼网和人造棉，又具有药用价值。小叶榕的茎、皮、果、叶、胶汁等均可入药，具有祛风清热、活血解毒、散淤理湿等功效。民间多用于治疗关节风湿痛、跌打损伤、小便不通、风火牙痛、急性痢疾及肠炎、疥癣、痔疮等病症。其叶、皮、果等提取的浸膏是治疗咳嗽、感冒类中成药的主要原料。近年来，超声

4、技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道〔3～4〕，表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响〔4〕，但超声技术应用于提取小叶榕中黄酮类物质的研究尚未见报道。本文报道用超声波提取小叶榕总黄酮及鉴别。　　1仪器与试剂　　1.1仪器　　HS10260D型超声波清洗器(超声工作频率40kHz，天津市恒奥科技发展有限公司)；UV-2450型紫外-可见分光光

5、度计(日本岛津)；ZF7C型三用紫外分析仪(上海康华生化仪器制造有限公司)；2×Z-1旋片式真空泵（浙江黄岩求精真空泵厂）；AUY220型电子天平(日本岛津)。　　1.2试剂　　甲醇AR；乙醇AR；镁粉AR；盐酸AR；芦丁(Rutin)对照品（中国药品生物制品检定所）；新鲜小叶榕采自贵州省兴义市沧江乡。　　2方法与结果　　2.1总黄酮成分提取　　取新鲜小叶榕，烘干(55℃)，粉碎(过三号筛)。取55℃干燥至恒重的小叶榕粉末(过三号筛)约0.2g，精密称定，置100ml量瓶中，加70%乙醇90ml，，超声处理(功率250in，放冷，用70%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，得供试品溶液

6、。　　2.2测定方法依据　　以芦丁为对照品测定小叶榕中总黄酮的含量，用盐酸-镁粉显色法，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。　　2.3定量实验－总黄酮的含量测定　　2.3.1对照品溶液的制备　　精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每毫升中含芦丁0.2308mg的溶液，即得。　　2.3.2波长的选择精密量取芦丁对照品溶液（0.2308mg/ml）和供试品溶液各1.0ml，分别置加有镁粉100mg的具塞刻度试管中，将试管置冷水浴（15℃左右）中缓缓滴加浓盐酸3.0ml，摇匀，加70％乙醇至6ml，摇匀，置沸水浴中保温35min，取出，迅速冷却至室温，用70％乙醇补充至原体积，以相应试剂

7、为空白，在400～700nm波长范围内扫描测定吸收光谱。　　采用盐酸-镁粉显色法对总黄酮进行显色并进行全波长扫描。结果发观，用盐酸-镁粉显色后，芦丁对照品、供试品的最大吸收波长基本一致，均为（510±5）nm，重复性好，同时空白溶液显色前后及芦丁对照品、样品显色前在该波长处均无明显吸收，故选择盐酸-镁粉显色法，在510nm波长处测定小叶榕总黄酮含量。　　2.3.3标准曲线的制备　　精密量取对照品溶液1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，分别置加有镁粉100mg的具塞刻度试管中，将试管置