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时间:2018-11-01
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1、超声波提取小叶榕总黄酮及鉴别【摘要】 目的为充分利用小叶榕植物资源,避免资源的浪费,探讨小叶榕总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从小叶榕中提取总黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量。结果测得供试品溶液中总黄酮的含量C=0.3916mg/ml,回收率为100.16%,其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程,无任何污染,是一条提取小叶榕总黄酮类物质的有效途径。【关键词】超声波提取;小叶榕;总黄酮;鉴别 Abstract:ObjectiveTodevelopamethodfortheextractionandidentificati
2、onoftotalflavanoneofXiaoyerong.MethodsTheflavonoidsXiaoyerongetryinetheflavanoneofXiaoyerong.ResultsThecontentofthetotalflavanoneofXiaoyerongg/mlandtherateofrecoveryethodisapurelyphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealent;Xiaoyerong;Totalflavanone;Identification小叶榕为桑科植物榕树Ficusmicroc
3、arpaL.f.的干燥叶,又名细叶椿、细叶榕、垂叶榕,属桑科椿属常绿大乔木,高20~25m,生气根〔1~2〕。全年可采收,斩取叶和幼枝,除去树枝,取净叶片,晒干。小叶榕多生长于村边或山林中,分布于广西、广东、福建、台湾、浙江南部、云南、贵州。印度、缅甸、马来西亚也有。 小叶榕既可作风景树、行道树,树皮纤维可制鱼网和人造棉,又具有药用价值。小叶榕的茎、皮、果、叶、胶汁等均可入药,具有祛风清热、活血解毒、散淤理湿等功效。民间多用于治疗关节风湿痛、跌打损伤、小便不通、风火牙痛、急性痢疾及肠炎、疥癣、痔疮等病症。其叶、皮、果等提取的浸膏是治疗咳嗽、感冒类中成药的主要原料。近年来,超声
4、技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道〔3~4〕,表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明,利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,可加速植物材料中的有效成分进入溶剂,从而增加有效成分的提取率,缩短提取时间,并且还可避免高温对提取成分的影响〔4〕,但超声技术应用于提取小叶榕中黄酮类物质的研究尚未见报道。本文报道用超声波提取小叶榕总黄酮及鉴别。 1仪器与试剂 1.1仪器 HS10260D型超声波清洗器(超声工作频率40kHz,天津市恒奥科技发展有限公司);UV-2450型紫外-可见分光光
5、度计(日本岛津);ZF7C型三用紫外分析仪(上海康华生化仪器制造有限公司);2×Z-1旋片式真空泵(浙江黄岩求精真空泵厂);AUY220型电子天平(日本岛津)。 1.2试剂 甲醇AR;乙醇AR;镁粉AR;盐酸AR;芦丁(Rutin)对照品(中国药品生物制品检定所);新鲜小叶榕采自贵州省兴义市沧江乡。 2方法与结果 2.1总黄酮成分提取 取新鲜小叶榕,烘干(55℃),粉碎(过三号筛)。取55℃干燥至恒重的小叶榕粉末(过三号筛)约0.2g,精密称定,置100ml量瓶中,加70%乙醇90ml,,超声处理(功率250in,放冷,用70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,得供试品溶液
6、。 2.2测定方法依据 以芦丁为对照品测定小叶榕中总黄酮的含量,用盐酸-镁粉显色法,在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。 2.3定量实验-总黄酮的含量测定 2.3.1对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品适量,加甲醇制成每毫升中含芦丁0.2308mg的溶液,即得。 2.3.2波长的选择精密量取芦丁对照品溶液(0.2308mg/ml)和供试品溶液各1.0ml,分别置加有镁粉100mg的具塞刻度试管中,将试管置冷水浴(15℃左右)中缓缓滴加浓盐酸3.0ml,摇匀,加70%乙醇至6ml,摇匀,置沸水浴中保温35min,取出,迅速冷却至室温,用70%乙醇补充至原体积,以相应试剂
7、为空白,在400~700nm波长范围内扫描测定吸收光谱。 采用盐酸-镁粉显色法对总黄酮进行显色并进行全波长扫描。结果发观,用盐酸-镁粉显色后,芦丁对照品、供试品的最大吸收波长基本一致,均为(510±5)nm,重复性好,同时空白溶液显色前后及芦丁对照品、样品显色前在该波长处均无明显吸收,故选择盐酸-镁粉显色法,在510nm波长处测定小叶榕总黄酮含量。 2.3.3标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml,分别置加有镁粉100mg的具塞刻度试管中,将试管置
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