超声波提取榕树叶（小叶）总黄酮及鉴别

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1、超声波提取榕树叶（小叶）总黄酮及鉴别　　关键词：超声波提取；榕树叶；总黄酮；鉴别　　TheTotalFlavanoneofBanyanLeaves（Flocculus）ExtractionandtheIdentificationbyUltrasonicakeuseoftheresourcesofbanyanleaves,avoidbanyanleavesetrytoextractandchecktheflavanoneofbanyanleaves.ResultsThecontentofthetotalflavanoneofbany

2、anleavesg/mlandtherateofrecoveryethodisapurelyphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealent;Banyanleaves;Totalflavanone;Identification　　榕树(banyan)是桑科榕属无花果类植物，全世界有800多种，主要分布在热带、亚热带地区。小叶榕为桑科植物榕树的叶,异名落地金线。我国榕属植物约100种，是热带雨林中的关键种类，主要分布在福建、广东、广西、海南、台湾和浙江等地。研究表明［1］：榕树叶

3、含三萜苷、黄酮苷、酸性树脂、鞣质等，其中黄酮类和萜内酯类等有效成分对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抑菌、抗癌等方面有显著效果，无毒副作用，并以此开发出多种药品和保健食品。当前国内外对于榕树叶中黄酮类化合物的研究还相对缺乏。目前有用水、石油醚、乙醇分别从榕树叶中提取黄酮类化合物的报道［1］，但是，这几种方法提取的时间长、工艺复杂、提取效率较低。近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道［2,3］，表明其具有耗能低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明

4、，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响［3］。但超声技术应用于提取榕树叶中黄酮类物质的研究尚未见报道，本文报道用超声波提取小榕树叶总黄酮及鉴别。　　1仪器与试剂　　1.1仪器KQ5200DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；UV755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZFI型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)；SHBIII循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。　　1

5、.2试剂95%乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；正丁醇AR；镁粉AR；乙酸镁AR；芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；榕树叶（小叶榕）采自右江民族医学院校园内。　　2方法与结果　　2.1总黄酮成分提取取新鲜榕叶，烘干，粉碎。称取榕树叶粉末约6g，加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤。滤渣再加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩5~7ml为止，放置100ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。

6、　　2.2测定方法依据以芦丁为对照品测定榕树叶中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。　　2.3定量实验总黄酮的含量测定　　2.3.1波长的选择取样品液适量，在0.30ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420~700nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。　　2.3.3提取物含量的测定精密吸取样品液5.00ml，置50ml容量瓶，再精密吸取样品液0.50ml，按标准曲线

7、的制备方法测定吸光度A=0.105，根据回归方程：A=6.9671×103+8.4181C，计算样品中总黄酮的含量C=2.660mg/ml。　　2.3.4回收实验精密量取样品液1.00ml，加入标准芦丁对照品2.00ml（0.10mg/ml），同前样品测定方法操作测定吸光度，求出回收率为100.2%。　　表1紫外可见分光光度计测定芦丁对照液吸光度（略）　　根据上表得回归方程：A=6.9671×103+8.4181C，r=0.9999　　2.4定性实验总黄酮的鉴别　　2.4.1颜色反应紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在滤纸上，在可见

8、光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏0.5min，立即在紫外光下观察，呈极明显的黄褐色荧光斑点。三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加１％三氯化铝乙醇溶液，吹干。在可见光下呈灰黄色，