超声波提取芹菜总黄酮及鉴别论文

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1、超声波提取芹菜总黄酮及鉴别论文【摘要】目的为充分利用芹菜食物资源，避免资源的浪费，探讨芹菜总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从芹菜中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量C=0.2126mg/ml，回收率为100.3%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无任何污染.freelakeuseoftheresourcesofcelery，avoidceleryetrytoextractandchecktheflavanoneofcelery.Result

2、sThedensityofthetotalflavanoneofceleryg/mlandtherateofrecoveryethodisapurelyphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealent;Celery;Totalflavanone;Identification芹菜ApiumgraveolensL．属伞形花科一年生或二年生草本植物，异名药芹、旱芹。芹菜味辛、甘，性凉，营养丰富。已有研究证实，芹菜含有丰富的黄酮类化合物、多不饱和脂肪酸、矿物元素、丁基苯酞类、萜类、香豆

3、素衍生物、叶绿素、氨基酸与维生素、膳食纤维等［1］，其中，黄酮类化合物主要成分为水蓼素及7-甲基水蓼素,.freell95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤。滤渣再加80ml95%乙醇，超声波提取2.5h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩5～7ml为止，放置100ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。2.2测定方法依据以芦丁为对照品测定芹菜中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。2.3定量实验-总黄酮的含量测定2.3.1波长的选择取样品液

4、适量，在0.30ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420～700nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。2.3.2标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.13mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静

5、置12min，以试剂作空白参比液，于510nm处测定吸光度，结果见表1。表1紫外可见分光光度计测定吸光度（略）根据上表得回归方程：A=3.619×103+12.34C，r=0.9999。2.3.3提取物含量的测定精密吸取样品液0.50ml，置10.00ml容量瓶，按标准曲线的制备方法测定其吸光度A=0.137，根据回归方程：A=3.619×103+12.34C，计算样品中总黄酮的含量C=0.2162mg/ml。2.3.4回收率实验精密量取样品液1.00ml，加入标准芦丁对照品1.00ml（0.13mg/ml），同前样品测定方法

6、操作测定吸光度，求出回收率为100.3%。2.4定性实验-总黄酮的鉴别2.4.1颜色反应紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在滤纸上，在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏30s，立即在紫外光下观察，呈极明显的黄褐色荧光斑点。三氯化铝反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加１％三氯化铝乙醇溶液，吹干。在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈黄色荧光斑点。乙酸镁反应：取样品溶液点在滤纸上，滴加1%乙酸镁甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黄色斑点。盐酸-镁粉反应：取乙醇提取液1ml于试管中加镁粉

7、，再加入浓盐酸数滴（1次加入），在泡沫处呈紫红色。2.4.2纸层析取样品溶液10μl点在滤纸上。用正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5（体积比）为展开剂，上行展开5h，取出晾干。喷1%氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可见荧光斑点。3讨论3.1实验结果表明，本实验方法工艺简单，回收率为100.3%，利用本文所提供的超声波提取、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度较高。超声波可以强化乙醇浸提法，达到省时、高效、节能的目的，此方法采用全物理过程，无任何污染，是一条理想的提取黄酮类物质的途径，具有广阔的应用前景。3.2黄酮类化合物是一大类天然产物，

8、广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等［7］。天然来源的生物黄酮分子量小，能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障，能进入脂肪组织，进而体现