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时间:2018-10-31
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1、超声波提取枇杷叶总黄酮及其鉴别黄锁义,李卫彬,阳文辉,李容【关键词】超声波提取;,,枇杷叶;,,总黄酮;,,鉴别 摘要:目的为充分利用枇杷叶植物资源,避免资源的浪费,探讨枇杷叶总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从枇杷叶中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用紫外分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量C=0.9090mg/ml,回收率为100.9%,其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取枇杷叶黄酮类物质的有效途径。 关键词:超声波提取;枇杷叶;总黄酮;鉴别 Abs
2、tract:ObjectiveToinvestigatetheextractionandidentificationmethodsoftotalflavanonefromFoliumEriobotryae.MethodsTheflavonoidsFoliumEriobotryaeetryEriobotryae.ResultsBythismethodthedensityofthetotalflavanoneofFoliumEriobotryaeleavesobtainedg/mlandtherateofrecoveryethod
3、stogettheouteandthepurityoftheflavanoneishigh.Thismethodisapurelyphysicalprocessandhasnopollution.Itisanidealeriobotryaeleaves. Keyent;Foliumeriobotryae;Totalflavanone;Identification 枇杷叶为蔷薇科常绿小乔木植物枇杷Eriobotryajaponica(Thnnb.)Lindl.的叶,味苦,性凉。用于肺热咳嗽,气逆喘急,胃热呕逆,烦热口渴,清肺
4、止咳,降逆止呕。治疗腰椎增生性关节炎、前列腺增生、术后疼痛、痹症、肩周痛、消除乳房硬块及辅治神经疾病等症状〔1,2〕。研究表明〔3,4〕:枇杷叶的主要化学成分为橙花叔醇、金合欢醇以及丰富的黄酮类化合物。尚有α和β蒎烯、莰烯、月桂烯、对聚伞花素、芳樟醇、α衣兰烯、α和β金合欢烯、樟脑、橙花醇、牛儿醇、α毕澄茄醇、榄香醇、顺β,γ己烯醇和芳樟醇氧化物。亦含苦杏仁苷、熊果酸、齐墩果酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸、鞣质、维生素B和维生素C等,还含山梨糖醇。有文献报道枇杷叶中总黄酮的提取方法采用水提法〔3〕,但是,这种方法的提取效率仍然较低
5、。近年来,超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道〔4,5〕,表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明,利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,可加速植物材料中的有效成分进入溶剂,从而增加有效成分的提取率,缩短提取时间,并且还可避免高温对提取成分的影响〔5〕,但超声技术应用于提取枇杷叶中黄酮类物质的研究尚未见报道。本文报道用超声波提取枇杷叶总黄酮及鉴别。 1仪器与试剂 1.1仪器KQ5200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公
6、司);UV755B紫外可见分光光度计(上海分析仪器总厂);ZFI型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂);SHBIII循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)。 1.2试剂95%乙醇AR;亚硝酸钠AR;硝酸铝AR;氢氧化钠AR;三氯化铝AR;盐酸AR;氨水AR;冰醋酸AR;醋酸乙酯AR;芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);新鲜枇杷叶采自右江民族医学院校园内。 2方法与结果 2.1总黄酮成分提取取新鲜枇杷叶,烘干,粉碎。称取枇杷叶粉末约6g,加80ml95%乙醇,超声波提取2.5h,抽滤。滤渣再加80ml95%乙醇,超
7、声波提取2.5h,抽滤,合并两次滤液,减压回收乙醇至滤液仅剩5~7ml为止,放置100ml容量瓶中,用60%乙醇稀释至刻度,得样品液。 2.2测定方法依据以芦丁为对照品测定枇杷叶中总黄酮的含量,加入铝离子试剂,同时控制适宜pH值,使黄酮化合物与铝盐形成络合物,在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。 2.3定量实验总黄酮的含量测定 2.3.1波长的选择取样品液适量,在0.30ml5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下,经硝酸铝显色后,以试剂为空白参比液在420~700nm波长范围测定螯合物的吸光度,螯合物于510nm波长处有最大吸收
8、,故测定时选用此波长。 2.3.2标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液(0.10mg/ml)0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00ml于10.00ml容量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml,摇匀,静置6min;再加10%硝酸铝溶液0.3
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