紫外分光光度法测定巴戟天中的低聚糖含量论文

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1、紫外分光光度法测定巴戟天中的低聚糖含量论文林芳花，林励，刘晓涵，汪金玉，马艳艳【摘要】目的建立测定巴戟天低聚糖含量的紫外分光光度法。方法巴戟天低聚糖水解后可形成果糖，果糖在盐酸的作用下生成羟甲基糠醛，照紫外分光光度法在285nm处测定吸收度。结果巴戟天低聚糖在5～30μg·ml-1范围内，浓度与吸光度呈良好的线性关系.freel，可用于含量测定，且专属性强［4］。作者拟参考此原理，建立测定巴戟天中的低聚糖含量的方法。1仪器与样品1.1仪器紫外可见分光光度计(VarianCary50,Australia）,电子天平（PrecisaXS225A,d=0.0001g,Sl-1的溶液。2.2供试品溶液

2、的制备精密称取巴戟天粉末1g，加入30%乙醇90ml，用索氏提取器提取至无色，滤过，滤液移至100ml量瓶，30%乙醇加至刻度，摇匀，即得。2.3光谱扫描在10ml具塞比色管中分别加入适量的对照品溶液、供试品溶液、对照品溶液和供试品溶液的混合溶液（体积比1∶1），准确加入浓盐酸3ml，加水至刻度，摇匀，在沸水中加热8min，取出后用流水冷却10min，进行光谱扫描。果糖和巴戟天低聚糖吸收光谱相似，最大吸收波长均为285nm，二者混合后最大吸收波长没有改变，见图1。2.4标准曲线的制备精密吸取果糖对照品溶液0.0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，按“2.3”项方法在285nm

3、测定吸光度，以果糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制回归曲线。其直线方程为Y=0.0417X-0.0141，相关系数R2=0.9993，果糖在5～30μg·ml-1范围内，浓度与吸光度呈良好的线性关系，见图2。图1光谱扫描图（略）图2标准曲线（略）2.5精密度实验精密吸取对照品溶液1.0ml，按上述条件测定，重复5次，果糖的平均吸光度为0.4297，RSD=2.34%（n=5）。2.6重复性实验精密称取供试品5份，分别按供试品溶液项下制备后，按上述条件测定,以药材干燥品计巴戟天低聚糖平均含量为35.33%，RSD=3.72%（n=5）。2.7稳定性实验取供试品溶液分别于10，20，30，40，5

4、0min按上述条件测定,巴戟天低聚糖平均吸光度为0.4279，RSD=2.67%（n=5）。2.8加样回收率实验定量精密称取已知含量的样品，加入一定量的果糖对照品，按上述方法制备供试品溶液，测定含量，计算回收率。结果见表1。表1加样回收率实验结果（略）2.9含量测定每批药材分别取3份制备供试品溶液，按上述条件测定，以药材干燥品计算低聚糖含量。结果见表2。表2巴戟天药材低聚糖含量测定结果（略）3讨论薄层鉴别显示巴戟天水提液和乙醇提取液的糖类物质主要斑点均与蔗糖的斑点Rf值相近，蔗糖为二糖，表明了上述条件提取液中糖类物质主要是低聚糖。本实验采用30%乙醇为溶剂提取巴戟天，既能较好地提取低聚糖，也能

5、减少多糖对测定结果的影响。本方法测定巴戟天低聚糖含量，样品无需预处理，不需要加入显色剂，对仪器要求不高，干扰物质少，抗坏血酸及可溶淀粉无干扰，葡萄糖浓度大于果糖浓度的5倍时才产生干扰(误差小于5%)［4］，在5～30μg·ml-1范围内，浓度与吸光度呈良好的线性关系，平均回收率高，方法简便、快速、灵敏、重复性好。低聚果糖是一种低糖、低热值、难消化物质，既能改善食品的口味，又对改善肠道功能、防治便秘和腹泻、降低血脂、提高人体免疫力等都具有显著功效［5］。巴戟天富含低聚糖，其组成基本为低聚果糖［3］，因此，有望将其开发成食品、保健品或药品，以更好地开发利用巴戟天资源。【