紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量论文

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时间:2018-11-24

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1、紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量论文【摘要】[目的]探讨翻百草中总黄酮含量的测定方法.[方法]以硝酸铝、亚硝酸钠及氢氧化钠为显色剂,利用紫外分光光度计测定翻白草中总黄酮的含量.[结果]最佳检测波长为510nm,芦丁质量浓度在20~50mg/L范围内时,吸收度与质量浓度呈良好的线性关系,回归方程为y=7.7457x+0.0009(r=0.9996),平均回收率为99.52%,RSD为1.23%.[结论]采用紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量简便易行,结果稳定可靠.【关键词】黄酮类分光光度法紫外线植物药用ABSTRACT:OBJECTIVETostudyass

2、aymethodoftotalflavanonecontentinPotentilladiscolorbunge.METHODSogenicagent,totalflavanonecontentofPotentilladiscolorbungeisdeterminedbyultravioletspectrophotometry.RESULTSTheoptimaldetective,andabsorbabilityandmassconcentrationassconcentrationofruting/L.Theregressionequationetrytodete

3、cttotalflavanonecontentinPotentilladiscolorbungeissimple,accurate,andsensitive.Keyetry,altravionlet;plants,medicinal翻白草(Potentilladiscolorbunge)为蔷薇科植物的干燥全草,含鞣质.freelg,置于100mL容量瓶中,加入700mL/L乙醇适量,微热溶解,放冷后再加入700mL/L乙醇稀释至刻度,摇匀,得质量浓度为0.10g/L的芦丁对照品溶液,低温保存,备用.2.2供试品溶液的制备精确称取翻白草100g,用700mL/L乙醇回

4、流提取,回收溶剂得浸膏.将浸膏用适量水溶解,乙醚脱脂,置于冰箱中冷却,有绿色沉淀产生,将过滤得到的滤液浓缩,干燥得到棕黄色粉末.准确称取已于105℃条件下烘干至恒定质量的黄酮样品20.0mg,用700mL/L乙醇定容至100mL.2.3测定波长的选择精确量取对照品溶液和供试品溶液各5mL,分别置于25mL容量瓶中,加入50g/L亚硝酸钠溶液1.0mL,摇匀,放置6min,加入100g/L硝酸铝溶液1.0mL,摇匀,放置6min,加入40g/L氢氧化钠溶液10.0mL,再加入水至刻度,摇匀,放置15min,在波长为200~700nm范围内扫描,结果2种溶液均在510n

5、m处有最大吸收,其他成分对测定无干扰.2.4标准曲线的绘制分别精确吸取芦丁标准液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于25mL容量瓶中,加入50g/L亚硝酸钠溶液1.0mL,摇匀,放置6min,加入100g/L硝酸铝溶液1.0mL,摇匀,放置6min,加入40g/L氢氧化钠溶液10.0mL,加入700mL/L乙醇至刻度,摇匀,放置15min,进样,于波长为510nm处测定吸收值(用不含芦丁的空白管对照调零).得回归方程:y=7.7457x+0.0009(r=0.9996),结果表明,测定芦丁质量浓度在20~50mg/L范围内呈良好的线性关系.2.5精确度

6、实验取对照品溶液于510nm波长处测定吸收值5次.结果示平均吸收值为0.252,RSD为0.54%(n=6),表明该方法精确度良好.2.6稳定性试验取供试品溶液,于0、10、30、60、90、120min时测定吸收值.结果表明,总黄酮与铝离子形成的红色络合物在1h内稳定,RSD为1.21%(n=6).2.7重现性试验精确称取药材样品1.0g,共5份,平行试验,于510nm波长处测定吸收值,结果见RSD为3.03%.2.8加样回收率实验精确称取于105℃条件下干燥至恒定质量的芦丁对照品100mg,置于100mL容量瓶中,以700mL/L乙醇溶解,稀释至刻度,摇匀,得芦

7、丁贮备液.取已知总黄酮含量的5个批次的样品各0.5g,置于100mL磨口锥形瓶中,加入上述芦丁贮备液10mL,加入700mL/L乙醇30mL,摇匀,测定510nm波长处吸收值,按回归方程进行计算处理,结果见平均加样回收率为99.52%,RSD为1.23%(表1).表1加样回收率实验结果2.9样品的测定精确称取研碎的样品0.5g,置于100mL磨口锥形瓶中,按照2.2项下方法制备样品供试液,同法平行制备3份.精确吸取供试品溶液5mL,按照2.4项下方法进行操作,在波长为510nm处测定供试液的吸收值,按回归方程进行计算处理,见平均含量为3.23mg,RSD为1.8

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